醫(yī)療器械檢化員微生物培訓(xùn)-資料下載頁(yè)
2024-12-29 17:49本頁(yè)面
【正文】 1ml。 ? 4再洗脫 :將樣品從洗脫液 A中取出瀝干，移入另一定量的無(wú)菌洗脫液中 (B)。 ? 5再處理 :將 B洗脫液置旋渦混臺(tái)器 (2800次／ min)振蕩 2min。 ? 6再注皿 :取 B洗脫液 2ml，分別注入兩個(gè)無(wú)菌平皿內(nèi)，每平皿 lml。 ? 注：當(dāng)微生物數(shù)少時(shí) ,從 B洗脫液開(kāi)始，即可用無(wú)菌濾膜過(guò)濾后直接放培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 ? 7如此反復(fù)洗脫 4次．即 A、 B、 C和 D，直至洗脫累積量 (初始污染菌 )不再增加，最后瀝干樣品，將其平鋪于無(wú)菌平皿中 (E)。然后將熔化并冷至 45～ 48℃ 的 NA培養(yǎng)基，分別注入 A～ E各平皿每皿15ml。 ? 8待凝固后，放置在規(guī)定的培養(yǎng)條件下 (30～ 35℃ ， 48h～ 82h)培養(yǎng)，進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)。 校正因子 =1/= 校 正 因 子 計(jì) 算 校 正 因 子 計(jì) 算 ? 同批產(chǎn)品，需抽取 35件，進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)，確定最小、最大及平均回收率和初始污染菌數(shù)。 ? 根據(jù)校正因子，滅菌前初始污染計(jì)數(shù)乘以校正因子即為產(chǎn)品帶菌總數(shù)。 初始污染菌方法驗(yàn)證 ? 檢驗(yàn)洗脫液有無(wú)抑菌作用 ? 檢驗(yàn)樣品有無(wú)抑菌作用 無(wú)菌洗脫液 ＋ 初始污染 菌樣品 ＋ 100cfu 菌種 初始污染菌方法驗(yàn)證（藥典） 在 3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)中 : 洗脫液對(duì)照組 (4)的菌回收率應(yīng)均不低于 70%。（ 4/2） 100％ 試驗(yàn)組 (1)的菌回收率應(yīng)均不低于 70% （ 13） /2 100％ 100cfu/ml 菌種 無(wú)菌洗脫液 ＋ 初始污染 菌樣品 無(wú)菌洗脫液 ＋ 100cfu 菌種 初始污染菌方法驗(yàn)證（ ISO11737） ? 選用滅菌產(chǎn)品，如果洗脫技術(shù)中用到洗脫液，每一產(chǎn)品都應(yīng)經(jīng)受常規(guī)微生物洗脫技術(shù)，則將一定數(shù)量的易受破壞的微生物放人洗脫液中，回收微生物。 ? 選用滅菌產(chǎn)品，如果產(chǎn)品直接放人培養(yǎng)基中，可以參照無(wú)菌實(shí)驗(yàn)的抑菌實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。 滅菌產(chǎn)品 ＋ 100cfu 菌種 常規(guī)洗脫 回收細(xì)菌數(shù) 100cfu/ml 菌種 1 實(shí)驗(yàn)組 2 對(duì)照組 實(shí)驗(yàn)組回收細(xì)菌數(shù) /對(duì)照組菌數(shù) 100％ ≥70％ 初始污染菌方法驗(yàn)證（ ISO11737） 微生物實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)前 實(shí)驗(yàn)中 實(shí)驗(yàn)后 環(huán)境控制 培養(yǎng)基質(zhì)量 滅菌控制 人員控制 無(wú)菌操作 方法驗(yàn)證 靈敏度實(shí)驗(yàn) 無(wú)菌檢查 無(wú)菌實(shí)驗(yàn) 初始污染菌 B/F 驗(yàn)證洗脫液 驗(yàn)證樣品無(wú)抑菌作用 儀器校正 沉降菌檢測(cè) 簡(jiǎn)化操作 物體表面細(xì)菌總數(shù) 物體表面細(xì)菌總數(shù) ? 方法：將內(nèi)徑為 5cm 5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物件體表面，根據(jù)物體表面積大小，采平行樣 l～ 4個(gè)，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)涂抹 10次（往返計(jì)為 1次），將棉拭子放入 l0ml滅菌生理鹽水的采樣管中。 物體表面細(xì)菌總數(shù) ? 將每個(gè)采樣管震打 80次，混勻， 10倍遞減稀釋，每個(gè)稀釋度（取 3個(gè)稀釋度）分別取1ml放于滅菌培養(yǎng)皿（每個(gè)稀釋度傾注 2塊平板），用普通瓊脂培養(yǎng)基作傾注培養(yǎng)，置 37℃ 溫箱培養(yǎng) 24h,觀察結(jié)果，取菌落數(shù)為 30～ 300的培養(yǎng)皿計(jì)算，求出平均菌落數(shù)。 菌數(shù)（ cfu） /cm2= 平均菌數(shù) 稀釋倍數(shù) /采樣面積（ cm2） 生產(chǎn)人員手細(xì)菌總數(shù) 生產(chǎn)人員手細(xì)菌總數(shù) ? 方法：被檢人五指并攏，將浸有滅菌生理鹽水的棉拭子在右手指曲面，從指尖、甲溝至指根處往返涂抹 10次后，將棉拭子放入 10ml滅菌生理鹽水的試管中。 生產(chǎn)人員手細(xì)菌總數(shù) ? 將每個(gè)采樣管震打 80次，混勻， 10倍遞減稀釋，每個(gè)稀釋度（取 3個(gè)稀釋度）分別取1ml放于滅菌培養(yǎng)皿（每個(gè)稀釋度傾注 2塊平板），用普通瓊脂培養(yǎng)基作傾注培養(yǎng)，置 37℃ 溫箱培養(yǎng) 24h,觀察結(jié)果，取菌落數(shù)為 30～ 300的培養(yǎng)皿計(jì)算，求出平均菌落數(shù)。 ? 菌落數(shù)（ cfu） /每只手 =平均菌數(shù)稀釋倍數(shù) 平皿計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)原則 ? 。若其中一個(gè)平板有較大片狀菌苔生長(zhǎng)時(shí)，則不應(yīng)采用，而應(yīng)以無(wú)片狀菌苔生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的平均菌落數(shù)。若片狀菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均勻時(shí)，則可將此一半的菌落數(shù)乘 2以代表全平板的菌落數(shù)，然后再計(jì)算該稀釋度的平均菌落數(shù)。 ? 30~300之間的，當(dāng)只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則以該平均菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)即為細(xì)菌總數(shù) (見(jiàn)例 1)。 ? 30～ 300之間，則按兩者菌落總數(shù)之比值來(lái)決定。若其比值小于 2，應(yīng)采取兩者的平均數(shù)；若大于 2，則取其中較小的菌落總數(shù) (見(jiàn)例 2及例 3)。 平皿計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)原則 ? 300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見(jiàn)表 1，例 4)。 30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見(jiàn)表 1，例 5)。 30～ 300之間，則以最近 300或 30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù) (見(jiàn)表 1，例 6)。 ? ，則以小于 1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告 (見(jiàn)表 1，例 7)。 稀釋度選擇及菌落總數(shù)報(bào)告方式 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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