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蛋白質與氨基酸-資料下載頁

2025-09-30 15:54本頁面
  

【正文】 轉運蛋白)、貯存蛋白、運動蛋白、保護或防禦蛋白、受體蛋白、控制生長和分化蛋白、毒蛋白、膜蛋白等。 ( passive protein) 對生物體起支援和保護作用,主要指硬蛋白包括膠原蛋白、角蛋白、絲蛋白、彈性蛋白等。 五、蛋白質的架構 當多肽的分子量大到足夠具有一定的空間架構時就稱為蛋白質。 蛋白質與多肽的主要 差別 ︰ 分子量,空間架構 為了對蛋白質架構敘述的方便,人為地將蛋白質的架構分為一級架構、二級架構、三級架構和四級架構。 蛋白質的一級架構又稱初級架構,二級架構、三級架構、四級架構的三度空間排列稱蛋白質的空間架構、進階架構、三維架構或構象。 隨著蛋白質化學研究的進展,越來越多的人認為在二級架構和三級架構之間應加入超二級架構和架構域這兩個層次,所以蛋白質的架構層次為 ︰ 一級架構 二級架構 超二級架構 架構域 三級架構 四級架構 (一)蛋白質的一級架構( primary structure) 1.定義 ︰ 蛋白質的一級架構是指蛋白質多肽鏈中氨基酸的排列順序( sequence),一級架構的主要連接鍵是肽鍵。 2.蛋白質一級架構的測定 概況 : 序列測定前的準備工作 ︰ 樣品的純度 相對分子質量 鏈的數(shù)目 氨基酸組成 一級架構的測定主要用 小片段重疊 的原理 序列測定方法 ( 1)末端分析 ︰ 包括 N端分析, C端分析 N端分析方法 二硝基氟苯法( DNP法、 DNFB法或 FDNB法) 丹磺醯氯法( DNS法) 氨肽酵素( aminopeptidase, Apase) 法 Ala Val Gly 亮氨酸氨 肽 酵 素 ( Leucine amino peptidase, LAP) 專一性 : A=非極性氨基酸時 快 A=其它氨基酸時 慢 A B N端 A=Leu時 最快 C端分析 硼氫化鋰還原法 H N C H C O O HRL i B H 4H N C H C H 2 O HR水 解混 合 氨 基 酸 H 2 N C H C H 2 O HR+C 端 羧肽酵素( carboxypeptidase, Cpase) 法 4種羧肽酵素的來源和專一性 羧 酵 來源 專一性 CpA 胰臟 能釋放除 pro、 Arg和 Lys以外的所有 C端氨基酸 CpB 胰臟 主要水解 C端為 Arg或 Lys的 鍵 CpC 植物或微生物 相當廣泛 , 幾乎能釋放 C端的所有氨基酸 CpY 麵包酵母 可釋放 C端所有氨基酸 ( 2)肽鏈的拆開和分離 共價鍵 非共價鍵 ( 3)肽鏈的部分水解 化學方法 ︰ 溴化氰( CNBr) 裂解法 : 酵 素分 解方法 ( 4) 短肽段的分離和氨基酸序列測定 ( 5)找重疊肽從而推斷整個肽鏈的氨基酸序列 ( 6)雙硫鍵位置的確定 對角線電泳 ( 7)醯胺基位置的確定 3.蛋白質測序舉例 insulin 4.指紋圖譜( finger print) 法 近年來由於 DNA序列的測定發(fā)展很快,可將相應於蛋白質的 DNA序列測定出來後,推出蛋白質的序列,為蛋白質一級架構的測定帶來了新的曙光。 一級架構測定展望
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