蛋白質(zhì)與氨基酸-資料下載頁
2025-09-30 15:54本頁面
【正文】 轉(zhuǎn)運蛋白）、貯存蛋白、運動蛋白、保護或防禦蛋白、受體蛋白、控制生長和分化蛋白、毒蛋白、膜蛋白等。 （ passive protein） 對生物體起支援和保護作用，主要指硬蛋白包括膠原蛋白、角蛋白、絲蛋白、彈性蛋白等。 五、蛋白質(zhì)的架構(gòu) 當多肽的分子量大到足夠具有一定的空間架構(gòu)時就稱為蛋白質(zhì)。 蛋白質(zhì)與多肽的主要 差別 ︰ 分子量，空間架構(gòu) 為了對蛋白質(zhì)架構(gòu)敘述的方便，人為地將蛋白質(zhì)的架構(gòu)分為一級架構(gòu)、二級架構(gòu)、三級架構(gòu)和四級架構(gòu)。 蛋白質(zhì)的一級架構(gòu)又稱初級架構(gòu)，二級架構(gòu)、三級架構(gòu)、四級架構(gòu)的三度空間排列稱蛋白質(zhì)的空間架構(gòu)、進階架構(gòu)、三維架構(gòu)或構(gòu)象。 隨著蛋白質(zhì)化學研究的進展，越來越多的人認為在二級架構(gòu)和三級架構(gòu)之間應加入超二級架構(gòu)和架構(gòu)域這兩個層次，所以蛋白質(zhì)的架構(gòu)層次為 ︰ 一級架構(gòu) 二級架構(gòu) 超二級架構(gòu) 架構(gòu)域 三級架構(gòu) 四級架構(gòu) （一）蛋白質(zhì)的一級架構(gòu)（ primary structure） 1．定義 ︰ 蛋白質(zhì)的一級架構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序（ sequence），一級架構(gòu)的主要連接鍵是肽鍵。 2．蛋白質(zhì)一級架構(gòu)的測定 概況 : 序列測定前的準備工作 ︰ 樣品的純度 相對分子質(zhì)量 鏈的數(shù)目 氨基酸組成 一級架構(gòu)的測定主要用 小片段重疊 的原理 序列測定方法 （ 1）末端分析 ︰ 包括 N端分析， C端分析 N端分析方法 二硝基氟苯法（ DNP法、 DNFB法或 FDNB法） 丹磺醯氯法（ DNS法） 氨肽酵素（ aminopeptidase, Apase） 法 Ala Val Gly 亮氨酸氨 肽 酵 素 （ Leucine amino peptidase, LAP） 專一性 : A=非極性氨基酸時 快 A=其它氨基酸時 慢 A B N端 A=Leu時 最快 C端分析 硼氫化鋰還原法 H N C H C O O HRL i B H 4H N C H C H 2 O HR水 解混 合 氨 基 酸 H 2 N C H C H 2 O HR+C 端 羧肽酵素（ carboxypeptidase, Cpase） 法 4種羧肽酵素的來源和專一性 羧 酵 來源 專一性 CpA 胰臟 能釋放除 pro、 Arg和 Lys以外的所有 C端氨基酸 CpB 胰臟 主要水解 C端為 Arg或 Lys的 鍵 CpC 植物或微生物 相當廣泛 ， 幾乎能釋放 C端的所有氨基酸 CpY 麵包酵母 可釋放 C端所有氨基酸 （ 2）肽鏈的拆開和分離 共價鍵 非共價鍵 （ 3）肽鏈的部分水解 化學方法 ︰ 溴化氰（ CNBr） 裂解法 : 酵 素分 解方法 （ 4） 短肽段的分離和氨基酸序列測定 （ 5）找重疊肽從而推斷整個肽鏈的氨基酸序列 （ 6）雙硫鍵位置的確定 對角線電泳 （ 7）醯胺基位置的確定 3．蛋白質(zhì)測序舉例 insulin 4．指紋圖譜（ finger print） 法 近年來由於 DNA序列的測定發(fā)展很快，可將相應於蛋白質(zhì)的 DNA序列測定出來後，推出蛋白質(zhì)的序列，為蛋白質(zhì)一級架構(gòu)的測定帶來了新的曙光。 一級架構(gòu)測定展望
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