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蛋白質(zhì)化學(xué)1-氨基酸-資料下載頁

2025-01-07 07:55本頁面
  

【正文】 羧基參加的反應(yīng): (1)與堿反應(yīng)成鹽 (2)與醇反應(yīng)成酯 (3)與酰化試劑反應(yīng)成酰氯 氨基與 α 羧基共同參加的反應(yīng) 與茚三酮的反應(yīng) : 除脯氨酸與羥脯氨酸外,可與其它氨基酸生成藍(lán)紫色化合物。脯氨酸與羥脯氨酸為黃色化合物。 ? 反應(yīng)要點 NH2與 COOH共同參與, ?氨基酸 特有 ,可在 570nm測定吸光值 D. 測定范圍: ~50181。 g/ml , 440nm測定(不釋放 NH3) ,谷氨酰胺和天門冬酰胺與茚三酮直接生成棕色物質(zhì)。 ? 應(yīng)用: (先用層析法分離) : 用陽離子交換樹脂,將樣品中的氨基酸分離,自動定性定量,記錄結(jié)果。 氨基與 α 羧基共同參加的反應(yīng) 與茚三酮的反應(yīng) 氨基與 α 羧基共同參加的反應(yīng) 成肽反應(yīng) (1) Millon反應(yīng): 檢測 Tyr或含 Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng) 。 Millon試劑: 汞的硝酸鹽與亞硝酸鹽溶液 。 產(chǎn)物: 紅色的化合物 。 (2) Folin反應(yīng): 檢測 Tyr或含 Tyr的蛋白質(zhì)的反應(yīng) 。 Folin試劑: 磷鉬酸 、 磷鎢酸混合溶液 。 產(chǎn)物: 藍(lán)色的鉬藍(lán) 、 鎢藍(lán) 。 (3) 坂口反應(yīng): 檢測 Arg或含 Arg的蛋白質(zhì)的反應(yīng) 。 坂口試劑: α — 萘酚的堿性次溴酸鈉溶液 。 產(chǎn)物: 磚紅色的沉淀 。 (顏色反應(yīng)): (4) Pauly反應(yīng): 檢測 His、 Tyr及含 His、 Tyr蛋白質(zhì)的反應(yīng)。 試劑: 對氨基苯磺酸鹽酸溶液、亞硝酸鈉、碳酸鈉混合溶液 產(chǎn)物: 橘紅色的化合物。 (5) 乙醛酸的反應(yīng): 檢測 Trp或含 Trp蛋白質(zhì)的反應(yīng)。 當(dāng) Trp與乙醛酸和濃硫酸在試管中疊加時,產(chǎn)生分層現(xiàn)象,界面出現(xiàn)紫色環(huán)。 (6) Cys的反應(yīng): Cys或含 Cys蛋白質(zhì)與亞硝基亞鐵氰酸鈉在稀氨的溶液中,產(chǎn)生一種紅色的化合物。 四 .氨基酸的分離測定 ( 一 ) 層析法 層析法是利用被分離樣品混合物中各組分的 化學(xué)性質(zhì) 的差異,使各組分以不同程度分布在兩個相中,這兩個相一個為 固定相 ,另一個為 流動相 。當(dāng)流動相流進(jìn)固定相時,由于各組分在兩相中的分配情況不同或電荷分布不同或離子親和力不同等,而以不同的速度前進(jìn),從而達(dá)到分離的目的。 常見的層析法有: 濾紙層析 、 薄層層析 、 離子交換層析 、 親和層析 ( 二 ) 電泳法 電泳是指帶電的顆粒在電場中向著以其顆粒所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象 。 【 目的與要求 】 167。 蛋白質(zhì)通論 167。 蛋白質(zhì)的分子組成 —— 氨基酸
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