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正文內(nèi)容

蛋白質(zhì)與氨基酸(文件)

 

【正文】 氨基酸組 成的蛋白質(zhì)。 (3) 谷蛋白( glutelin) ︰ 不溶於水、醇及中性鹽溶液,但溶於稀酸、 稀鹼,如米谷蛋白。 (7) 硬蛋白( scleroprotein) ︰ 不溶於水、鹽、稀酸、稀鹼溶液。 (2) 脂蛋白( lipoprotein) ︰ 含脂類,如血漿脂蛋白。 (6) 血紅素蛋白( hemoprotein) ︰ 輔基為血紅素,如血紅蛋白。 五、蛋白質(zhì)的架構(gòu) 當(dāng)多肽的分子量大到足夠具有一定的空間架構(gòu)時(shí)就稱為蛋白質(zhì)。 2.蛋白質(zhì)一級(jí)架構(gòu)的測(cè)定 概況 : 序列測(cè)定前的準(zhǔn)備工作 ︰ 樣品的純度 相對(duì)分子質(zhì)量 鏈的數(shù)目 氨基酸組成 一級(jí)架構(gòu)的測(cè)定主要用 小片段重疊 的原理 序列測(cè)定方法 ( 1)末端分析 ︰ 包括 N端分析, C端分析 N端分析方法 二硝基氟苯法( DNP法、 DNFB法或 FDNB法) 丹磺醯氯法( DNS法) 氨肽酵素( aminopeptidase, Apase) 法 Ala Val Gly 亮氨酸氨 肽 酵 素 ( Leucine amino peptidase, LAP) 專一性 : A=非極性氨基酸時(shí) 快 A=其它氨基酸時(shí) 慢 A B N端 A=Leu時(shí) 最快 C端分析 硼氫化鋰還原法 H N C H C O O HRL i B H 4H N C H C H 2 O HR水 解混 合 氨 基 酸 H 2 N C H C H 2 O HR+C 端 羧肽酵素( carboxypeptidase, Cpase) 法 4種羧肽酵素的來(lái)源和專一性 羧 酵 來(lái)源 專一性 CpA 胰臟 能釋放除 pro、 Arg和 Lys以外的所有 C端氨基酸 CpB 胰臟 主要水解 C端為 Arg或 Lys的 鍵 CpC 植物或微生物 相當(dāng)廣泛 , 幾乎能釋放 C端的所有氨基酸 CpY 麵包酵母 可釋放 C端所有氨基酸 ( 2)肽鏈的拆開(kāi)和分離 共價(jià)鍵 非共價(jià)鍵 ( 3)肽鏈的部分水解 化學(xué)方法 ︰ 溴化氰( CNBr) 裂解法 : 酵 素分 解方法 ( 4) 短肽段的分離和氨基酸序列測(cè)定 ( 5)找重疊肽從而推斷整個(gè)肽鏈的氨基酸序列 ( 6)雙硫鍵位置的確定 對(duì)角線電泳 ( 7)醯胺基位置的確定 3.蛋白質(zhì)測(cè)序舉例 insulin 4.指紋圖譜( finger print) 法 近年來(lái)由於 DNA序列的測(cè)定發(fā)展很快,可將相應(yīng)於蛋白質(zhì)的 DNA序列測(cè)定出來(lái)後,推出蛋白質(zhì)的序列,為蛋白質(zhì)一級(jí)架構(gòu)的測(cè)定帶來(lái)了新的曙光。 蛋白質(zhì)的一級(jí)架構(gòu)又稱初級(jí)架構(gòu),二級(jí)架構(gòu)、三級(jí)架構(gòu)、四級(jí)架構(gòu)的三度空間排列稱蛋白質(zhì)的空間架構(gòu)、進(jìn)階架構(gòu)、三維架構(gòu)或構(gòu)象。 (三)根據(jù)功能 ( active protein) 包括生命活動(dòng)過(guò)程中一切有活性的蛋白質(zhì)以及它們的前體分子,絕大多數(shù)蛋白質(zhì)屬於活性蛋白質(zhì),包括酵素、激素蛋白、運(yùn)輸?shù)鞍祝ㄞD(zhuǎn)運(yùn)蛋白)、貯存蛋白、運(yùn)動(dòng)蛋白、保護(hù)或防禦蛋白、受體蛋白、控制生長(zhǎng)和分化蛋白、毒蛋白、膜蛋白等。 (4) 磷蛋白( phosphoprotein) ︰ 含磷酸,如酪蛋白。 2.複合蛋白質(zhì)( conjugated protein) ︰ 也稱結(jié)合
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