基因工程的基本操作程序新(1)-資料下載頁(yè)
2025-09-11 20:48本頁(yè)面
【正文】 知識(shí)延伸 —— DNA分子雜交技術(shù) 該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，把互補(bǔ)的雙鏈DNA解開，把單股的 DNA小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光催化劑等進(jìn)行標(biāo)記，之后同被檢測(cè)的 DNA中的同源互補(bǔ)序列雜交，從而檢出所要查明的 DNA或基因。 2 、方法、技巧、規(guī)律總結(jié)：轉(zhuǎn)基因植物、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物都是將目的基因以基因工程的方法導(dǎo)入相應(yīng)生物體內(nèi)，利用目的基因的表達(dá)得到人們所需要的產(chǎn)品或生物本身。所以有關(guān)這方面的考題一定會(huì)與基因工程的四個(gè)步驟相聯(lián)系，主要考察基因工程的基本操作。3 、思維誤區(qū)提示：不管目的基因?qū)胫参锛?xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞還是微生物細(xì)胞，都必須事先將目的基因與載體結(jié)合，這樣才能保證導(dǎo)入的目的基因穩(wěn)定地保存并復(fù)制和表達(dá)。目的基因?qū)胧欠癯晒?，還有一個(gè)檢測(cè)和鑒定的過程，就是看導(dǎo)入了目的基因的生物是否具有了相應(yīng)的遺傳特性。思考與探究： ,你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎 ?若將一個(gè)抗病基因?qū)胄←溨?,理論上講你應(yīng)該怎樣做 ? ① 要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；②要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌的 Vir區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使 TDNA轉(zhuǎn)移并插入到染色體 DNA上。 ，聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功能的知識(shí)，結(jié)合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生產(chǎn)人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？ 有些蛋白質(zhì)肽鏈上有共價(jià)結(jié)合的糖鏈，這些糖鏈?zhǔn)窃趦?nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體上加工完成的，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體存在于真核細(xì)胞中，大腸桿菌不存在這兩種細(xì)胞器，因此，在大腸桿菌中生產(chǎn)這種糖蛋白是不可能的。 珠蛋白是動(dòng)物血紅蛋白的重要組成成分。當(dāng)它的成分異常時(shí)，動(dòng)物有可能患某種疾病，如鐮刀形細(xì)胞貧血癥。假如讓你用基因工程的方法，使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的 β 珠蛋白，想一想，應(yīng)如何進(jìn)行設(shè)計(jì)？ （ 1）從小鼠中克隆出 β 珠蛋白基因的編碼序列（ cDNA)。 （ 2）將 cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構(gòu)建成一個(gè)表達(dá)載體。 （ 3）將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中，大腸桿菌會(huì)不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果培養(yǎng)基上長(zhǎng)出大腸桿菌菌落，則表明 β 珠蛋白基因已進(jìn)入其中。 （ 4）培養(yǎng)進(jìn)入了 β 珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破碎后從中提取 β 珠蛋白。
范文總結(jié)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1