基因工程的基本操作程序新(1)-資料下載頁
2024-09-20 20:48本頁面
【正文】 知識延伸 —— DNA分子雜交技術 該方法是根據(jù)堿基互補配對原則，把互補的雙鏈DNA解開，把單股的 DNA小片段用同位素、熒光分子或化學發(fā)光催化劑等進行標記，之后同被檢測的 DNA中的同源互補序列雜交，從而檢出所要查明的 DNA或基因。 2 、方法、技巧、規(guī)律總結：轉基因植物、轉基因動物都是將目的基因以基因工程的方法導入相應生物體內，利用目的基因的表達得到人們所需要的產品或生物本身。所以有關這方面的考題一定會與基因工程的四個步驟相聯(lián)系，主要考察基因工程的基本操作。3 、思維誤區(qū)提示：不管目的基因導入植物細胞、動物細胞還是微生物細胞，都必須事先將目的基因與載體結合，這樣才能保證導入的目的基因穩(wěn)定地保存并復制和表達。目的基因導入是否成功，還有一個檢測和鑒定的過程，就是看導入了目的基因的生物是否具有了相應的遺傳特性。思考與探究： ,你能分析出不能導入單子葉植物的原因嗎 ?若將一個抗病基因導入小麥中 ,理論上講你應該怎樣做 ? ① 要選擇合適的農桿菌菌株，因為不是所有的農桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；②要加趨化和誘導的物質，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農桿菌的 Vir區(qū)（誘導）的基因，使 TDNA轉移并插入到染色體 DNA上。 ，聯(lián)系前面有關細胞器功能的知識，結合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生產人的糖蛋白，可以用大腸桿菌嗎？ 有些蛋白質肽鏈上有共價結合的糖鏈，這些糖鏈是在內質網和高爾基復合體上加工完成的，內質網和高爾基復合體存在于真核細胞中，大腸桿菌不存在這兩種細胞器，因此，在大腸桿菌中生產這種糖蛋白是不可能的。 珠蛋白是動物血紅蛋白的重要組成成分。當它的成分異常時，動物有可能患某種疾病，如鐮刀形細胞貧血癥。假如讓你用基因工程的方法，使大腸桿菌生產出鼠的 β 珠蛋白，想一想，應如何進行設計？ （ 1）從小鼠中克隆出 β 珠蛋白基因的編碼序列（ cDNA)。 （ 2）將 cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動子，另外加上抗四環(huán)素的基因，構建成一個表達載體。 （ 3）將表達載體導入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中，然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)大腸桿菌。如果表達載體未進入大腸桿菌中，大腸桿菌會不含有抗四環(huán)素基因而死掉；如果培養(yǎng)基上長出大腸桿菌菌落，則表明 β 珠蛋白基因已進入其中。 （ 4）培養(yǎng)進入了 β 珠蛋白基因的大腸桿菌，收集菌體，破碎后從中提取 β 珠蛋白。
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