基因工程的基本操作程序(ppt55頁)-資料下載頁
2025-01-07 17:38本頁面
【正文】 交帶，說明插入成功 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 分子雜交 含目的基因的 DNA探針與轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交 若有雜交帶，說明轉(zhuǎn)錄成功 類型 步驟 目的 原理 過 程 結 果 分子水平檢測 第三步 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗原 —抗體雜交 提取蛋白質(zhì) ,與已知的相應抗體雜交 若有雜交帶，表明翻譯成功 個體水平鑒定 做抗蟲、抗病的接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程產(chǎn)品與天然產(chǎn)品的功能進行活性比較，以確定功能是否相同 (2023高考海南卷 )回答有關基因工程的問題： (1)構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制酶切割 DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生 ________末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產(chǎn)生 ________(相同、不同 )黏性末端的限制酶。 例 4 (2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，構建的表達載體含有人胰島素基因及其啟動子等，其中啟動子的作用是 ________。在用表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，常用 ________處理大腸桿菌，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與 mRNA雜交，該雜交技術稱為 ________。為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA是否翻譯成 ________，常用抗原 — 抗體雜交技術。 (3)如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入植物細胞 ， 先要將目的基因插入農(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的 ________中 ， 然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞 ， 通過 DNA重組將目的基因插入植物細胞的 ________上 。 【 解析 】 (1)限制酶切割產(chǎn)生兩種末端：黏性末端和平末端；若用 DNA連接酶連接兩個末端，兩個末端必須是相同的。 (2)基因工程檢測的方法：檢測目的基因是否導入 ， 使用 DNA分子雜交技術；檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄 ， 使用分子雜交技術；檢測是否形成蛋白質(zhì) ， 使用抗原 — 抗體雜交技術 。 (3)基因工程的目的是獲得穩(wěn)定遺傳的新品種 ,因此要把目的基因插入到染色體的 DNA分子中。 【 答案 】 (1)平 相同 (2)RNA聚合酶識別和結合的部位 Ca2＋ DNA分子雜交技術 蛋白質(zhì) (3)T DNA 染色體 DNA 變式訓練 (2023廣州六中高二檢測 )利用外源基因在受體細胞中表達 ， 可生產(chǎn)人類所需的產(chǎn)品 。 下列選項中能說明目的基因完成表達的是 ( ) A． 棉花細胞中檢測到載體上的標記基因 B． 山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素的基因 C． 大腸桿菌中檢測到人胰島素基因的 mRNA D．酵母菌細胞中提取到人的干擾素 解析：選 D?；虻谋磉_即控制蛋白質(zhì)的合成，包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，僅僅轉(zhuǎn)錄出 mRNA還不能叫表達，只有合成了相應的蛋白質(zhì)才能證明目的基因完成了在受體細胞中的表達。 【 易誤警示 】 (1)目的基因檢測與鑒定的三個步驟 ， 都是在體外進行的 。 (2)在 DNA分子、 mRNA分子上檢測目的基因是否插入、目的基因是否轉(zhuǎn)錄時，用的探針都是用放射性同位素等標記含有目的基因的 DNA片段。 知能演練輕巧奪冠 本部分內(nèi)容講解結束 按 ESC鍵退出全屏播放
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