專題1基因工程12基因工程的基本操作程序修改-資料下載頁
2024-09-20 20:28本頁面
【正文】 ① 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 上是否插入了目的基因 ② 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 方法 —— 方法 —— 方法 —— DNA分子雜交 分子雜交 （注意與上不同之處） 抗原抗體雜交 常用的受體細(xì)胞： 動(dòng)植物細(xì)胞、大腸桿菌、土壤農(nóng)桿菌、枯草桿菌等。 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理： 借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。 轉(zhuǎn)化 —— 目的基因進(jìn)入 _________內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持 _____和 _____的過程。 受體細(xì)胞 穩(wěn)定 表達(dá) 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 方法 導(dǎo)入植物細(xì)胞 導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注射法 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 (檢查是否成功 ) 分子水平檢測 個(gè)體水平鑒定： ① 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因 ② 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 DNA分子雜交 DNA分子雜交 抗原 抗體雜交 目的基因的檢測與鑒定 易感染雙子葉植物和裸子植物。 Ti質(zhì)粒的TDNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上 農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ： 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 ： 繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少 處理細(xì)胞 → 細(xì)胞 → 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 → _______細(xì)胞吸收 DNA分子。 Ca2+ 感受態(tài) 感受態(tài) ： 大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌等。 顯微注射法 含目的基因的表達(dá)載體 動(dòng)物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動(dòng)物輸卵管或子宮 轉(zhuǎn)基因 動(dòng)物 為什么將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的受體細(xì)胞是受精卵？ 顯微 注射 分裂 分化 移 植 發(fā)育 該方法是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，把互補(bǔ)的雙鏈 DNA解開，把單鏈的 DNA小片段用同位素、熒光分子或化學(xué)發(fā)光劑等進(jìn)行標(biāo)記，之后同被檢測的 DNA中的同源互補(bǔ)序列雜交，從而檢出所要查明的 DNA或基因。 分子雜交技術(shù) 1. 檢測轉(zhuǎn)基因生物的 DNA上是否插入了目的基因 提取受體生 物全部 DNA 適當(dāng)限制 酶切割 DNA片段 用同位素標(biāo)記的 目的基因片段雜交 （表明目的基因已插入） 分子雜交技術(shù) 顯出雜交帶 2. 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 用同位素標(biāo)記的 目的基因片段雜交 顯出雜交帶 （表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了 mRNA） 檢測 DNA利用的是 DNA與 DNA雜交，檢測 mRNA利用的是 DNA與 mRNA雜交。 提取受體生物的 mRNA 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 — 抗體雜交 提取受體生物的蛋白質(zhì) 與相應(yīng)抗體雜交 顯出雜交帶 （表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品）
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