基因工程的基本工具和基本操作程序-資料下載頁(yè)
2025-01-07 17:53本頁(yè)面
【正文】 物與模板末端結(jié)合 ,在 DNA聚 合酶的作用下 ,引物沿模板鏈延伸 ,最終合成兩條 DNA分子 ,此過(guò)程中的原料是 , 遵循的原則是 。 (4)目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞常用 技術(shù) 。 (5)B→D 為抗蟲棉的培育過(guò)程 ,其中 ④ 過(guò)程常用的 方法是 , 要確定目的基因 (抗蟲基因 )導(dǎo)入受體細(xì)胞后是否 能穩(wěn)定遺傳并表達(dá) ,需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作 ,請(qǐng)寫 出在個(gè)體生物學(xué)水平上的鑒定過(guò)程： 。 解析 (1)A→B 為體外 DNA復(fù)制即 PCR技術(shù) ,與體內(nèi) DNA復(fù)制原理相同 ,解旋方式不同 ,PCR技術(shù)是用高 溫變性使其解旋。 (2)94℃ 時(shí) DNA雙鏈解旋 ,破壞的是兩條鏈之間的氫 鍵 ,而在細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù) 制解旋時(shí)解旋酶 起相同作用。(3)PCR技術(shù)與 DNA復(fù)制過(guò)程原理是相同的 ,即堿基 互補(bǔ)配對(duì) ,原料均為 4 (4)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物培育中目的基因的導(dǎo)入常用顯微注 射技術(shù)。 (5)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法為農(nóng)桿菌 轉(zhuǎn)化法 ,其優(yōu)點(diǎn)是能將外源基因?qū)氲绞荏w細(xì)胞的 染色體 DNA分子上 。在個(gè)體水平上鑒定 ,即通過(guò)生物 體所體現(xiàn)的性狀來(lái)判斷 ,抗蟲棉應(yīng)具有的性狀為害 蟲吞食后使其死亡。 答案 (1)PCR DNA復(fù)制 DNA解旋 (2)氫 解旋酶 (3)4種脫氧核苷酸 堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 (4)顯微注射 (5)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉子 , 觀察害蟲的存活情況 ,以確定性狀 a表示基因工程中經(jīng)常選用的載體 —— pBR322 質(zhì)粒 ,Ampr表示氨芐青霉素抗性基因 ,Tetr表示四環(huán) 素抗性基因 。 目的基因如果插入某抗性基因中 ,將 使該基因失活 ,而不再具有相應(yīng)的抗性 。 為了檢查 載體是否導(dǎo)入原本沒(méi)有 Ampr和 Tetr的大腸桿菌 ,將 大腸桿菌培養(yǎng)在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上 。 得到 如圖 b的結(jié)果 (黑點(diǎn)表示菌落 )。 再次滅菌的絨布按 到圖 b的培養(yǎng)基上 ,使絨布面沾上菌落 ,然后將絨布 平移按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ,得到如圖 c的 結(jié)果 (空圈表示與 b對(duì)照無(wú)菌落的位置 )。 據(jù)此分析 并回答： (1)pBR322質(zhì)粒的基本組成單位是 。 該基因工程中 ,質(zhì)粒上的 Ampr、 Tetr稱為 基因。 (2)與圖 c空圈相對(duì)應(yīng)的圖 b中的菌落表現(xiàn)型是 ,由此說(shuō)明目的基因插入 了 中。 (3)質(zhì)粒作為基因表達(dá)載體除了具有 Ampr或 Tetr及 目的基因外 ,還必須具有 。 (4)若用 pBR322質(zhì)粒作為載體 ,通過(guò)基因工程生產(chǎn) 的食品 ,存在著食品安全性問(wèn)題 ,試說(shuō)明理由。 。 解析 質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌擬核 DNA之外 ,一種裸露 的 、 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單并能自我復(fù)制的雙鏈環(huán)狀 DNA分子 , 其基本組成單位是 4種脫氧核苷酸 。 在基因工程中 , 質(zhì)粒上特殊的遺傳基因如 Ampr和 Tetr可以作標(biāo)記基 因 ,用于檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 。 圖 b培養(yǎng)基上的大腸桿菌能抗氨芐青霉素 ,平移到圖 c 培養(yǎng)基上 ,能長(zhǎng)出菌落 ,說(shuō)明還能抗四環(huán)素 ,長(zhǎng)不出 菌落 ,說(shuō)明不能抗四環(huán)素 ,即 Tetr基因被破壞?；? 表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記 基因。 答案 (1)脫氧核苷核 標(biāo)記 (2)能抗氨芐青霉 素 ,但不能抗四環(huán)素 Tetr (3)啟動(dòng)子和終止子 (4)Ampr、 Tetr控制合成的物質(zhì)在人體內(nèi)發(fā)揮作用 , 使人體內(nèi)的細(xì)菌抗藥性增強(qiáng) ,服用的藥物藥效減弱 7.(2023 上海卷 ,37)人體細(xì)胞內(nèi)含有抑制癌癥發(fā)生 的 p53基因 ,生物技術(shù)可對(duì)此類基因的變化進(jìn)行 檢測(cè)。 (1)目的基因的獲取方法通常包括 和 。 (2)上圖表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的 p53基因 的部分區(qū)域 。 與正常人相比 ,患者在該區(qū)域的堿基 發(fā)生了改變 ,在上圖中用方框圈出發(fā)生改變的堿基 對(duì) 。 這種變異被稱為 。 (3)已知限制酶 E的識(shí)別序列為 CCGG,若用限制酶 E 分別完全切割正常人和患者的 p53基因部分區(qū)域 (見上圖 ),那么正常人的會(huì)被切成 個(gè) 片段 。而患者的則被切割成長(zhǎng)度為 對(duì) 堿基和 對(duì)堿基的兩種片段 。 (4)如果某人的 p53基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶 E完全切 割后 ,共出現(xiàn) 170、 2 290和 460對(duì)堿基的四種片 段 ,那么該人的基因型是 (P+表示正?；? 因 ,P表示異?；?)。 解析 (1)目的基因既可以從供體細(xì)胞中直接提取 , 也可人工合成。 (2)基因內(nèi)部個(gè)別堿基對(duì)的替換為 基因突變。 (3)據(jù)圖分析可知 ,正常人會(huì)被切成三 個(gè)片段。 (4)由正常人被限制酶 E切出來(lái)的具體片 段可知 ,該人的基因型是 P+P。 答案 (1)從基因文庫(kù)中獲取 通過(guò)化學(xué)方法人工 合成 (2)見下圖 基因堿基對(duì)的替換 (基因突變 ) (3)3 460 220 (4)P+P 返回
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