【正文】 用器皿用2N鹽酸浸泡過(guò)夜，試劑純度為分析純以上，所用蒸餾水為雙蒸水或去離子水。 緩沖液pH對(duì)結(jié)果影響較大，－。 嚴(yán)格限制波長(zhǎng)的選擇（需經(jīng)校下），血清樣品在607－609nm之間有一個(gè)雜質(zhì)吸收峰。 原子吸收光譜法 用原子吸收光譜法測(cè)定生物樣品中微量元素的含量具有操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度較高的優(yōu)點(diǎn)，故被廣泛應(yīng)用。： 4份硝酸，1份高氯酸混合即成。 鐵標(biāo)貯備液：，用鹽酸或硝酸溶解后，移入聚乙烯塑料瓶?jī)?nèi)，存放在4℃冰箱，1mL含1mg鐵。：取10mL貯備液，lmL=l00181。g鐵。 操作 樣品收集及處理 取靜脈血2mL于盛有l(wèi)0mg草酸鉀的5mL試管中（％草酸鉀，置烘箱中烤干即成），離心（3000轉(zhuǎn)／分）15分鐘。將分離出的血漿吸入另一帶蓋小試管中，備用。 消化 ，于100mL高型燒杯中，約加3mL混合酸消化液，上蓋表皿，放置數(shù)小時(shí)或過(guò)夜，在沙浴電熱板上徐徐加熱煮沸，在冒白色濃煙激烈作用后溶液呈無(wú)色或淡黃色。反應(yīng)終了，取下燒杯（若酸用量不夠，最后可出現(xiàn)溶液變黑現(xiàn)象，此時(shí)可再加2 mL混合酸消化液繼續(xù)消化直至五色）。冷卻后用10－20mL去離子水沖洗表皿和杯壁，除去表皿繼續(xù)加熱，直到再度冒白色濃煙，待溶液體積接近蒸干，殘留酸量不超過(guò)l mL，取下冷卻，用蒸餾水稀釋至3mL。 測(cè)定 ，，，，混合，各容量瓶中每mL分別相當(dāng)于0181。g，1181。g，2181。g，3181。g，5181。g鐵。 將處理后的樣液，試劑空白，鐵標(biāo)系列溶液分別導(dǎo)入火焰進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定條件（PekinElener403型原子吸收分光光度計(jì)）：；空心陰極燈電流：30mA，／min，乙炔流量：／分。以鐵含量對(duì)應(yīng)濃度吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得樣品鐵含量。 計(jì)算 （A1－A2）V X＝ 100 m 式中：X─ 血漿中鐵的含量（181。g／100mL血清）。 A1─測(cè)定用樣品液中鐵的含量（mg／L）。 A2─測(cè)定空白液中鐵的含量（mg／L）。 V─樣品處理液定容總體積（mL）。m─ 血漿取樣量（mL） 鐵標(biāo)準(zhǔn)液 鉻天青B銨鹽法：（3mmol/L）（6分子結(jié)晶水）置蒸餾水中，加50mL濃硝酸混勻反應(yīng)10分鐘，用蒸餾水定容至1000mL。 工作液：（30181。mol/L）取10mL貯備液，用蒸餾水定容至1000mL。 原子吸收分光光度法：，用鹽酸或硝酸溶解后，移入聚乙烯塑料瓶?jī)?nèi)，存放4oC冰箱，1mL含1mg鐵。 工作液：取10mL貯備液，1mL=100181。g鐵。 輕質(zhì)碳酸鎂（AR）（或堿式碳酸鎂）其質(zhì)量應(yīng)符合要求。 應(yīng)用鉻天青B銨鹽方法測(cè)總鐵結(jié)合量 ，加60181。mol/，室溫放置15分鐘。再加4－5mg輕質(zhì)碳酸鎂，放置15分鐘，混合3－4次。然后以3000轉(zhuǎn)/分離心5－8分鐘，計(jì)算。 原子吸收分光光度法測(cè)總鐵結(jié)合量 ，加鐵標(biāo)準(zhǔn)液（20181。g/mL），充分混合，放置15分鐘。加150mg輕質(zhì)碳酸鎂，充分混勻1分鐘以上，放置30分鐘，混合3－4次。離心10分鐘，取上清液1mL按原子吸收分光光度法測(cè)血清鐵的操作步驟進(jìn)行消化，測(cè)定，計(jì)算。 計(jì)算 血清總鐵結(jié)合量可用（mg/100L）表示。 未飽和鐵量 = 血清總鐵結(jié)合量－血清鐵。血清鐵血清蛋白運(yùn)鐵蛋白飽和度（％）= ────────── 100 血清總鐵結(jié)合量 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值 ，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無(wú)顯著性；F值≥，P≤，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉：。 結(jié)果判定受試樣品組與對(duì)照組比較，血紅蛋白升高且平均升高幅度≥10g/L，血清鐵蛋白增加，血清運(yùn)鐵蛋白飽和度升高，紅細(xì)胞游離原卟啉降低，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理差異有顯著性，即可分別判定該指標(biāo)結(jié)果陽(yáng)性。 數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定：試驗(yàn)數(shù)據(jù)為計(jì)量資料，可用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t＇檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)；但變異系數(shù)太大（如CV50％）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。結(jié)果判定：改善兒童缺鐵性貧血：試驗(yàn)前后自身比較和試驗(yàn)后組間比較，血紅蛋白、紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉二項(xiàng)指標(biāo)差異有顯著性；同時(shí)，試食組自身前后比較，血紅蛋白平均升高幅度≥10g/L，可判定受試樣品具有改善缺鐵性貧血功能的作用。改善成人缺鐵性貧血：試驗(yàn)前后自身比較和試驗(yàn)后組間比較，血紅蛋白指標(biāo)差異有顯著性；同時(shí)，試食組自身前后比較，血紅蛋白平均升高幅度≥10g/L，血清鐵蛋白、紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉/血清運(yùn)鐵蛋白飽和度二項(xiàng)指標(biāo)中一項(xiàng)指標(biāo)陽(yáng)性，可判定該受試樣品具有改善缺鐵性貧血功能。59