高二生物血紅蛋白的提取和分離-資料下載頁(yè)
2024-11-12 18:16本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】物大分子的基本原理。④它們?cè)谘t蛋白的提取中分別起到什么作用。②色譜柱填料的處理和色譜柱的裝填。白含量豐富，便于提取血紅蛋白。理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。瓊脂糖）構(gòu)成的多孔小球體，內(nèi)部有許多貫穿的通道。小，利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠，來(lái)進(jìn)行分離。子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以。③依據(jù)的特性是：蛋白質(zhì)分子量的大小。能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液PH值的影響，維持PH基本不變。同PH范圍內(nèi)使用的緩沖液。核酸等都具有可解離的基團(tuán)，在一定的PH下，SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。因此測(cè)定的結(jié)果只是單條肽鏈的分子量。的量大大超過(guò)了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量。動(dòng)物的血液來(lái)分離血紅蛋白。分離純化，洗滌次數(shù)不可過(guò)少。鐘,細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。磷酸緩沖液中（pH為），透析12小時(shí)。蓋尼龍網(wǎng)，再用100目尼龍紗包好，插到玻璃管的一端。
【正文】 。 ： ：（略） 觀察你處理的血液樣品離心后 是否分層 （見(jiàn)教科書(shū)圖 518）， 如果分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。 此外，離心速度過(guò)高和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。 三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 你是否完成了對(duì)血液樣品的處理？你能描述處理后的樣品發(fā)生了哪些變化嗎？ 你裝填的凝膠色譜柱是否有氣泡產(chǎn)生？你的色譜柱裝填得成功嗎？你是如何判斷的？ 由于凝膠是一種半透明的介質(zhì)，因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈，檢查凝膠是否裝填得均勻。此外，還可以加入大分子的有色物質(zhì)， 例如藍(lán)色葡聚糖 — 2020或紅色葡聚糖，觀察色帶移動(dòng)的情況。如果色帶均勻、狹窄、平整，說(shuō)明凝膠色譜柱的性能良好。 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。 如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出； 如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說(shuō)明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。 你能觀察到蛋白質(zhì)的分離過(guò)程中紅色區(qū)帶的移動(dòng)嗎？請(qǐng)描述紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況，并據(jù)此判斷分離效果？ 教學(xué)反饋 1．凝膠色譜法是根據(jù)（ ）分離蛋白質(zhì)的有效方法。 A分子的大小 B相對(duì)分子質(zhì)量的大小 C帶電荷的多少 D溶解度 2．緩沖液的作用是：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的影響來(lái)維持（ ）基本不變。 A溫度 B pH C滲透壓 D氧氣濃度 3．電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下向著與其所帶電荷（ ）的電極移動(dòng)。 A相同 B相反 C相對(duì) D相向 4. 哺乳動(dòng)物和人的成熟的紅細(xì)胞中的（ ）與氧氣的運(yùn)輸有關(guān)。 A血紅蛋白 B肌紅蛋白 C肌動(dòng)蛋白 D肌球蛋白 B B B A 5．血液由血漿和各種血細(xì)胞組成，其中（ ）的含量最多。 A白細(xì)胞 B血小板 C紅細(xì)胞 D淋巴細(xì)胞 6．為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)? ）。 A. NaCl 7．將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為 4層， 其中第 3層是（ ） A無(wú)色透明的甲苯層 B脂溶性物質(zhì)的沉淀層 C血紅蛋白的水溶液 D其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物 CDC
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