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高二生物血紅蛋白的提取和分離-資料下載頁

2024-11-12 18:16本頁面

【導(dǎo)讀】物大分子的基本原理。④它們在血紅蛋白的提取中分別起到什么作用。②色譜柱填料的處理和色譜柱的裝填。白含量豐富,便于提取血紅蛋白。理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。瓊脂糖)構(gòu)成的多孔小球體,內(nèi)部有許多貫穿的通道。小,利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠,來進(jìn)行分離。子量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以。③依據(jù)的特性是:蛋白質(zhì)分子量的大小。能夠抵制外界的酸和堿對溶液PH值的影響,維持PH基本不變。同PH范圍內(nèi)使用的緩沖液。核酸等都具有可解離的基團(tuán),在一定的PH下,SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。因此測定的結(jié)果只是單條肽鏈的分子量。的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量。動物的血液來分離血紅蛋白。分離純化,洗滌次數(shù)不可過少。鐘,細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。磷酸緩沖液中(pH為),透析12小時。蓋尼龍網(wǎng),再用100目尼龍紗包好,插到玻璃管的一端。

  

【正文】 。 : :(略) 觀察你處理的血液樣品離心后 是否分層 (見教科書圖 518), 如果分層不明顯,可能是洗滌次數(shù)少、未能除去血漿蛋白的原因。 此外,離心速度過高和時間過長,會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀,也得不到純凈的紅細(xì)胞,影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。 三、實驗結(jié)果分析與評價 你是否完成了對血液樣品的處理?你能描述處理后的樣品發(fā)生了哪些變化嗎? 你裝填的凝膠色譜柱是否有氣泡產(chǎn)生?你的色譜柱裝填得成功嗎?你是如何判斷的? 由于凝膠是一種半透明的介質(zhì),因此可以在凝膠柱旁放一支與凝膠柱垂直的日光燈,檢查凝膠是否裝填得均勻。此外,還可以加入大分子的有色物質(zhì), 例如藍(lán)色葡聚糖 — 2020或紅色葡聚糖,觀察色帶移動的情況。如果色帶均勻、狹窄、平整,說明凝膠色譜柱的性能良好。 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡,輕輕敲打柱體以消除氣泡,消除不了時要重新裝柱。 如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確的話,能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整,隨著洗脫液緩慢流出; 如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬,說明分離的效果不好,這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。 你能觀察到蛋白質(zhì)的分離過程中紅色區(qū)帶的移動嗎?請描述紅色區(qū)帶的移動情況,并據(jù)此判斷分離效果? 教學(xué)反饋 1.凝膠色譜法是根據(jù)( )分離蛋白質(zhì)的有效方法。 A分子的大小 B相對分子質(zhì)量的大小 C帶電荷的多少 D溶解度 2.緩沖液的作用是:在一定范圍內(nèi),抵制外界的影響來維持( )基本不變。 A溫度 B pH C滲透壓 D氧氣濃度 3.電泳是指帶電粒子在電場的作用下向著與其所帶電荷( )的電極移動。 A相同 B相反 C相對 D相向 4. 哺乳動物和人的成熟的紅細(xì)胞中的( )與氧氣的運(yùn)輸有關(guān)。 A血紅蛋白 B肌紅蛋白 C肌動蛋白 D肌球蛋白 B B B A 5.血液由血漿和各種血細(xì)胞組成,其中( )的含量最多。 A白細(xì)胞 B血小板 C紅細(xì)胞 D淋巴細(xì)胞 6.為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血劑( )。 A. NaCl 7.將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中,離心后,可以明顯看到試管中的溶液分為 4層, 其中第 3層是( ) A無色透明的甲苯層 B脂溶性物質(zhì)的沉淀層 C血紅蛋白的水溶液 D其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物 CDC
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