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高二生物血紅蛋白的提取和分離(專業(yè)版)

2025-01-07 18:16上一頁面

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【正文】 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡,輕輕敲打柱體以消除氣泡,消除不了時(shí)要重新裝柱。 貼壁加樣。 B、代表意義: “ G” 表示凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分離范圍 。 低速短時(shí)間離心(速度越高和時(shí)間越長(zhǎng),會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果) 吸取血漿:上層透明的黃色血漿。 ②在電場(chǎng)的作用下,這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。 血液 血漿 水 分 固體物質(zhì): 血漿蛋白、 無機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 (最多) 血紅蛋白 ( 90%) 兩個(gè) α -肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) : 血液有哪些成分? : 用雞的紅細(xì)胞提取 DNA,用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么? 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核,含有 DNA,便于進(jìn)行 DNA的提??;人的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。③ 依據(jù)的特性是: 蛋白質(zhì)分子量的大小。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成 蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物 , SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子 原有的電荷量 。 透析過程動(dòng)畫演示 : ( 1)凝膠色譜柱的制作: ① 取長(zhǎng) 40厘米,內(nèi)徑 , 兩端需用砂紙磨平。 不能發(fā)生洗脫液流干,露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。首先通過洗滌紅細(xì)胞、血紅蛋白的釋放、離心等操作收集到 血紅蛋白溶液 ,即 :樣品的處理;再經(jīng)過透析去除分子量較小的雜質(zhì),即樣品的粗分離;然后 通過凝膠色譜法 將相對(duì)分子質(zhì)量較大的 雜質(zhì)蛋白除去 ,即 :樣品的純化;最后經(jīng) 聚丙烯酰胺凝膠電泳 進(jìn)行純度鑒定。 A白細(xì)胞 B血小板 C紅細(xì)胞 D淋巴細(xì)胞 6.為防止血液凝固,在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)? )。這使血紅蛋白的分離過程非常直觀,大大簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。 ④ 洗滌平衡: 裝填完畢后,立即用緩沖液洗脫瓶,在50cm高的操作壓下,用 300ml的 20mmol/l的 磷酸緩沖液( pH為 ) 充分洗滌平衡 12小時(shí) 。 甲苯層 ( 無色透明 ) 白色薄層固體 紅色透明液體 雜質(zhì)沉淀層 ( 暗紅色 ) 試管中溶液層次 (4)透 析: ① 過程: 取 1ml的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有 300ml的物質(zhì)的量濃度為 20mmol/l的磷酸緩沖液 中( pH為 ),透析 12小時(shí)。 : SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性 。② 而相對(duì)分子量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動(dòng),路程較短,移動(dòng)速度較快。 血紅蛋白的特點(diǎn): : 選用一定的 物理或化學(xué) 的方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的 生物大分子 。 : 瓊脂糖 凝膠電泳、 聚丙
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