高二生物血紅蛋白的提取和分離-全文預(yù)覽
【正文】 圍內(nèi)，維持結(jié)構(gòu)和功能正常。 使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。 ④洗脫： 小心加入 pH= 的 20mmol/l的磷酸緩沖液到適當(dāng)高度，連接緩沖液洗脫瓶，打開下端出口進(jìn)行洗脫。 不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 注意： 凝膠裝填時(shí)盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。④組裝： 將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個(gè)整體 。 透析過程動(dòng)畫演示 : （ 1）凝膠色譜柱的制作： ① 取長 40厘米，內(nèi)徑 ， 兩端需用砂紙磨平。 ②試管中溶液層次： 第 1層（最上層）：甲苯層（ 無色透明 ）；第 2層（中上層）：脂溶性物質(zhì)沉淀層（ 白色薄層固體 ）；第 3層（中下層）：血紅蛋白的水溶液層（ 紅色透明液體 ）；第4層（最下層）：雜質(zhì)沉淀層（ 暗紅色 ）。 鹽水洗滌：用五倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為％的氯化鈉溶液洗滌。 二、實(shí)驗(yàn)操作 樣品處理 → 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 ： （一）蛋白質(zhì)提取和分離步驟 （二）操作過程 本課題可選用豬、牛、羊或其他脊椎 動(dòng)物的血液來分離血紅蛋白。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成 蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物 ， SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子 原有的電荷量 。 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺（形成交聯(lián)） 丙烯酰胺和交聯(lián)劑 N,N’亞甲基雙丙烯酰胺的交聯(lián)共聚反應(yīng) 蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的 遷移率 取決 于它所帶 凈電荷 的多少以及 分子的大小 等因素。 ③電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小，形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離 。調(diào)節(jié)緩沖劑的 使用比例 就可以制得在 不同 PH范圍內(nèi) 使用的緩沖液。③ 依據(jù)的特性是： 蛋白質(zhì)分子量的大小。 根據(jù)被分離物質(zhì)的蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大 小，利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠，來進(jìn)行分離。 血 紅 蛋白 血紅蛋白 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵 血 紅素基團(tuán) 每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè) 亞鐵血紅素基團(tuán)， 此基團(tuán)可攜帶 一分子氧或一分子二 氧化碳， 血紅蛋白因含有 血紅素 而 呈 紅色。 本課題學(xué)習(xí)目標(biāo) 體驗(yàn)從復(fù)雜體系中提取生物大分子的基本過程和方法，并了解色譜法、電泳法等分離生物大分子的基本原理。 血液 血漿 水 分 固體物質(zhì)： 血漿蛋白、 無機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 （最多） 血紅蛋白 （ 90％） 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) ： 血液有哪些成分？ ： 用雞的紅細(xì)胞提取 DNA，用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么？
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