高二生物血紅蛋白的提取和分離(更新版)
【正文】 沿管壁環(huán)繞移動(dòng)。 不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象 。 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水 。 透析過程動(dòng)畫演示 : （ 1）凝膠色譜柱的制作： ① 取長 40厘米，內(nèi)徑 ， 兩端需用砂紙磨平。 鹽水洗滌：用五倍體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為％的氯化鈉溶液洗滌。 SDS能與各種蛋白質(zhì)形成 蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物 ， SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子 原有的電荷量 。 ③電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小，形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離 。③ 依據(jù)的特性是： 蛋白質(zhì)分子量的大小。 血 紅 蛋白 血紅蛋白 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵 血 紅素基團(tuán) 每個(gè)肽鏈環(huán)繞一個(gè) 亞鐵血紅素基團(tuán)， 此基團(tuán)可攜帶 一分子氧或一分子二 氧化碳， 血紅蛋白因含有 血紅素 而 呈 紅色。 血液 血漿 水 分 固體物質(zhì)： 血漿蛋白、 無機(jī)鹽、磷脂、葡萄糖等 血細(xì) 胞 白細(xì)胞 血小板 紅細(xì)胞 （最多） 血紅蛋白 （ 90％） 兩個(gè) α －肽鏈 兩個(gè) β 一肽鏈 四個(gè)亞鐵紅素基團(tuán) ： 血液有哪些成分？ ： 用雞的紅細(xì)胞提取 DNA，用豬、牛、羊的紅細(xì)胞提取血紅蛋白的原因是什么？ 雞的紅細(xì)胞具有細(xì)胞核，含有 DNA，便于進(jìn)行 DNA的提??；人的紅細(xì)胞無細(xì)胞核，結(jié)構(gòu)簡單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以分離。 ②在電場的作用下，這些帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。由幾條肽鏈組成的 蛋白質(zhì)復(fù)合體 在 SDS的作用下會(huì) 解聚成單條肽鏈 ，因此測定的結(jié)果只是 單條肽鏈的分子量 。 低速短時(shí)間離心（速度越高和時(shí)間越長，會(huì)使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果） 吸取血漿：上層透明的黃色血漿。 ②透析目的： 除去樣品中分子量較小的雜質(zhì)。 B、代表意義： “ G” 表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍 。 注意： 液面不要低于凝膠表面，否則可能有氣泡混入，影響液體在柱內(nèi)的流動(dòng)與最終生物大分子物質(zhì)的分離效果。 貼壁加樣。 血紅蛋白提取和分離的程序可分為四大步，包括： 樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定 。 如果色譜柱出現(xiàn)紋路或是氣泡，輕輕敲打柱體以消除氣泡，消除不了時(shí)要重新裝柱。 A. NaCl 7．將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為 4層， 其中第 3層是（ ） A無色透明的甲苯層 B脂溶性物質(zhì)的沉淀層 C血紅蛋白的水溶液 D其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物 CDC
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