定量生物蛋白質(zhì)組學(xué)之silac技術(shù)-資料下載頁
2025-08-17 10:16本頁面
【正文】 。 SILAC的流程（圖片來自賽默飛世爾）SILAC方法有很多優(yōu)勢。細(xì)胞在傳代68代之后，蛋白標(biāo)記效率可達(dá)90%以上。標(biāo)記是在樣品處理前引入，隨后進(jìn)行蛋白質(zhì)分離、酶切和鑒定，后續(xù)實驗對樣品的影響一致，故樣品處理所帶來的定量誤差（bias）會很低。在檢測極低水平的蛋白變化或翻譯后修飾時，這一點特別有用。此外，SILAC靈敏度高，樣本量要求少，通常每個樣品只需要幾十微克的蛋白量。當(dāng)然，這種方法也有限制。一些細(xì)胞會將高濃度的精氨酸轉(zhuǎn)化成脯氨酸，這樣在精氨酸標(biāo)記的情況下會產(chǎn)生兩個不同的重型峰，代表了精氨酸或脯氨酸標(biāo)記的肽段。研究人員也開發(fā)出一些方法，來避免這種轉(zhuǎn)化。對于那些很難培養(yǎng)，或?qū)ε囵B(yǎng)基成分變化極其敏感的細(xì)胞系而言，這種代謝標(biāo)記的方法也不大奏效。此外，這種技術(shù)也有可能影響生物體發(fā)揮功能，因為培養(yǎng)條件已改變., 生物科技新聞
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