10核酸合成-資料下載頁
2025-08-16 01:53本頁面
【正文】 模板鏈！ C T C A A G T A G C A T C T G C 5′ 3′ A G C T A G C T A G T A G C T 3′ 5′ G CH3 CH3 親代 DNA 復(fù)制 如果有錯(cuò)配的堿基 那么是哪條鏈出錯(cuò)？ 修復(fù)的應(yīng)該是哪條？ 未甲基化的是新合成鏈！ 堿基錯(cuò)配 堿基錯(cuò)配 錯(cuò)配修復(fù)的一定是新合成的子鏈！而且錯(cuò)配堿基哪怕在甲基化 A的 1000個(gè) b以外！ 交感順序 中 被甲基化中3 3 復(fù)制復(fù)制堿基錯(cuò)配 堿基錯(cuò)配 堿基錯(cuò)配 堿基錯(cuò)配 甲基化的是模板鏈！錯(cuò)配修復(fù)的一定是新合成的子鏈！而且錯(cuò)配堿基哪怕在甲基化 的 個(gè)錯(cuò)配修復(fù)的一定是新合成的子鏈！而且錯(cuò)配堿基哪怕在甲基化 的 個(gè)應(yīng)該修復(fù) 應(yīng)該修復(fù) 應(yīng)該修復(fù) CH3 CH3 3′ 5′ 5′ 3′ Muts MutL MutH ATP ADP+Pi CH3 CH3 3′ 5′ 5′ 3′ CH3 CH3 3′ 5′ 5′ 3′ CH3 CH3 3′ 5′ 5′ 3′ ATP ADP+Pi MutLMuts， DNA解旋酶，外切酶 Ⅶ DNA聚合酶 Ⅲ ， SSB CH3 CH3 3′ 5′ 5′ 3′ DNA連接酶 打開缺口 打開缺口 打開缺口切除錯(cuò)配堿基 二、堿基切割修復(fù) ※ p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p 5′ 3′ 3′ 5′ p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p 3′ 5′ 5′ 3′ 堿基脫氨基造成損傷（無嘌呤或無嘧啶， AP） ※ p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p 3′ 5′ 5′ 3′ p p AP核酸內(nèi)切酶 ※ ※ 切口 p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p 5′ 3′ 3′ 5′ p p DNA聚合酶 Ⅰ dNMPS p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p p 5′ 3′ 3′ 5′ p p DNA鏈接酶 切口切口切口 希望同學(xué)們自習(xí)了解 三、核苷酸切割修復(fù) 四、直接修復(fù) 五、重組修復(fù) 紫外線 光復(fù)活酶 P C C C C O O N N H H CH3 R = C C C C O O N N H H CH3 R = C C C C O O N N H H CH3 R = C C C C O O N N H H CH3 R = 5 ′ 3 ′ 5′ 3′ 3′ 5′ 大腸桿菌 ()在含有 3HdTTP的培養(yǎng)液中，定期取樣小心分離并觀察 DNA變化情況，結(jié)果如下： 2min 2min θ形結(jié)構(gòu) 額外的 放射性環(huán) 額外的放射性環(huán) 動(dòng)態(tài)的變化情況： 復(fù)制泡出現(xiàn)； 復(fù)制泡增大； 新生鏈定向延長(zhǎng)； 四、 DNA半不連續(xù)合成佐證 形結(jié)構(gòu)形結(jié)構(gòu)大腸桿菌 DNA聚合酶 Ⅲ 的亞基與功能 亞基 亞基數(shù) Mr(kd) 基 因 亞 基 功 能 α ε θ τ γ δ δ′ χ ψ β 2 2 2 2 2 1 1 1 1 4 132 27 10 71 52 35 33 15 12 37 polC(dnaE) dnaQ(mut D) holE dna X dna X* hol A hol B hol C hol D dna E 外切酶活性 3′ →5 ′ 外切酶 活性（校正） 穩(wěn)定模塊結(jié)合；核心酶二聚體 “鉗” 安置復(fù)合物 (Clamploading plex) 增加復(fù)制連續(xù)性的 DNA “鉗” DNA復(fù)制起始必須精確受到調(diào)控，因?yàn)槊總€(gè)生命周期復(fù)制只發(fā)生一次。現(xiàn)已知，復(fù)制起始的時(shí)序受到 DNA甲基化和細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜相互作用的影響。 的 oriC DNA是由 Dam甲基化酶甲基化的，而甲基化發(fā)生在回文順序(5‘)GATC的腺嘌呤 N6 (m6A)，大腸桿菌的 oriC區(qū)密布 GATC順序 (在 245bp的 DNA鏈中含有 11個(gè) GATC)而在整個(gè) DNA256bp中只可能出現(xiàn)一個(gè) G m6ATC。復(fù)制之后， DNA是半甲基化的，即 oriC區(qū)的母鏈?zhǔn)羌谆?，而新合成的鏈沒有甲基化。在下次結(jié)合 DnaA蛋白復(fù)制起始前該區(qū)的該位點(diǎn)必須被 Dam甲基化酶重新甲基化。
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