可重復(fù)使用醫(yī)用織物洗滌消毒技術(shù)規(guī)范-資料下載頁(yè)
2025-08-05 21:07本頁(yè)面
【正文】 物體表面及手表面菌落總數(shù)計(jì)算方法見(jiàn)式() : 物體表面/手表面菌落總數(shù)( CFU/cm2 )= 平均每皿菌落數(shù)(CFU)*稀釋倍數(shù)/ 采樣面積(cm2) ......() 大腸菌群 檢測(cè)方法:參照GB 15979執(zhí)行。 檢測(cè)步驟:取樣液5 mL，加入50 mL的雙倍乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，置36℃177。1℃培 養(yǎng)24 h，若乳糖膽鹽發(fā)酵管不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，則可報(bào)告大腸菌群陰性。若乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則從該管中轉(zhuǎn)種伊紅美藍(lán)瓊脂平板，36℃177。1℃培養(yǎng)24 h，觀察菌落形態(tài)，菌落呈黑 紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤(rùn)，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深。挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管37℃培養(yǎng)24 h。 結(jié)果與報(bào)告:凡乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，革蘭氏染色為陰性無(wú)芽孢桿菌，即可報(bào) 告被檢樣品檢出大腸菌群。 金黃色葡萄球菌 檢測(cè)方法與步驟:取樣液10mL，加入90 mL %氯化鈉肉湯或10%氯化鈉胰 酪胨大豆肉湯的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)可預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中，振蕩混勻。于36℃177。 1℃培養(yǎng)24 h。 分離鑒定及結(jié)果判定:按GB 。 乙型溶血性鏈球菌 檢測(cè)方法:參照GB 。 檢測(cè)步驟按下列順序進(jìn)行: a) 增菌培養(yǎng):取樣液5 mL 接種到50 mL 1%葡萄糖肉湯，置36℃177。1℃培養(yǎng)24h。 b) 分離培養(yǎng):從培養(yǎng)液的薄膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種在血平板上，置36℃177。1℃培 養(yǎng)18h~24h。乙型溶血性鏈球菌在血平板上菌落形態(tài)為灰白色、半透明或不透明、針尖狀突起、表面光滑、 邊緣整齊、周圍有β溶血圈。 c) 染色鏡檢:挑取可疑的菌落，涂片，革蘭染色，鏡下為革蘭陽(yáng)性、呈鏈狀排列的球菌。 d) 鏈激酶試驗(yàn): mL( g 草酸鉀加5mL 人血漿混勻，經(jīng)離心 沉淀，吸取上清)， mL 滅菌生理鹽水混勻后再加入待檢菌24 h 肉湯培養(yǎng) mL % mL，混勻，放入36℃177。1℃水浴中，每2 min 觀察一次(一般10 min 內(nèi)可凝固)，待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄溶化的時(shí)間，如2 h內(nèi)不溶化，移入孵箱觀察24 h 的結(jié)果，如全部溶化為陽(yáng)性。24 h仍不溶解者為陰性。 e) 桿菌肽敏感試驗(yàn):將被檢菌濃菌液涂于血平板上， 單位桿菌肽紙片放在平板表面上。同時(shí)以已知陽(yáng)性菌株作對(duì)照，于36℃177。1℃培養(yǎng)18 h~24 h，有抑菌帶者為陽(yáng)性。 結(jié)果與報(bào)告:被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，經(jīng)證實(shí)為革蘭氏染色陽(yáng)性、呈鏈狀排列的球菌，鏈激酶試驗(yàn)陽(yáng)性、對(duì)桿菌肽敏感者，即可報(bào)告為被檢樣品檢出乙型溶血性鏈球菌。 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn) 檢測(cè)方法與步驟:將采樣的棉拭子在無(wú)菌操作下直接投入10 mL緩沖蛋白胨水(B PW)中，振蕩混勻。于36℃177。1℃培養(yǎng)8 h~18 h。 分離鑒定及結(jié)果判定:按GB 。 銅綠假單胞菌 檢測(cè)方法:參照GB 。 檢測(cè)步驟按下列順序進(jìn)行: a) 增菌培養(yǎng):取樣液10 mL，接種于90 mL SCDLP 液體培養(yǎng)基中，置于37℃培養(yǎng)18 h~ 24 h。如有銅綠假單胞菌生長(zhǎng)，培養(yǎng)液表面多有一層薄菌膜，培養(yǎng)液呈黃綠色或藍(lán)綠色。 b) 分離平板:從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種在十六烷三甲基溴化銨瓊脂 平板上，置于37℃培養(yǎng)18 h~24 h。銅綠假單胞菌在該培養(yǎng)基上，菌落扁平無(wú)定 型，向周邊擴(kuò)散或略有蔓延，表面濕潤(rùn)，菌落呈灰白色，菌落周圍培養(yǎng)基常擴(kuò)散有 水溶性色素，該培養(yǎng)基選擇性強(qiáng)，大腸艾希氏菌不能生長(zhǎng)，革蘭氏陽(yáng)性菌生長(zhǎng)較差。 c) 染色鏡檢:挑取可疑菌落，涂片，革蘭氏染色，鏡檢為革蘭氏陽(yáng)性者應(yīng)進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)。 d) 氧化酶試驗(yàn):取一小塊清潔的白色濾紙片放在滅菌平皿內(nèi)，用無(wú)菌玻璃棒挑取銅綠 假單胞菌可疑菌落涂在濾紙片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對(duì)苯二 胺試液，在15 s~30 s 之內(nèi)，出現(xiàn)粉紅色或紫紅色時(shí)，為氧化酶試驗(yàn)試驗(yàn)陽(yáng)性。 若培養(yǎng)物不變色，氧化酶試驗(yàn)試驗(yàn)陰性。 結(jié)果與報(bào)告:被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實(shí)為革蘭氏陰性桿菌，氧化酶及 銅綠假單胞菌綠膿菌素試驗(yàn)均為陽(yáng)性者，即可報(bào)告被檢樣品檢出銅綠假單胞菌。如綠膿菌素 試驗(yàn)陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)三者皆為陽(yáng)性時(shí)，仍可報(bào)告被檢樣品 檢出銅綠假單胞菌。 室內(nèi)空氣的采樣及菌落總數(shù)檢測(cè) 采樣與檢測(cè)原則 室內(nèi)空氣樣品的采集應(yīng)在作業(yè)場(chǎng)所工作區(qū)域內(nèi)的環(huán)境空氣消毒后與從事工作前進(jìn)行。 樣品采集時(shí)應(yīng)首選平板暴露法并宜及時(shí)送檢，如不能在4 h內(nèi)送檢的樣品，應(yīng)保存于0℃~4℃環(huán)境下，在24 h內(nèi)完成檢測(cè)。 采樣與檢測(cè)方法 采樣方法:根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)面積大小，選擇有代表性的位置設(shè)置采樣點(diǎn)，采樣高度120cm~150cm(或工作臺(tái)面高度)，采樣點(diǎn)應(yīng)距墻壁100 cm以上，關(guān)閉門(mén)窗及其他機(jī)械通風(fēng)設(shè)施。將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板(Φ90 mm)置于采樣點(diǎn)，打開(kāi)平板蓋，使平板在空氣中暴露5 min，蓋上平板蓋。 檢測(cè)方法:按GB 15982執(zhí)行。 結(jié)果計(jì)算:室內(nèi)空氣菌落總數(shù)計(jì)算方法見(jiàn)式(): 空氣平均菌落總數(shù)（CFU/皿）= 各采樣點(diǎn)平板上平均菌落數(shù)（CFU）/ 皿5min ......() 結(jié)果報(bào)告:空氣菌落總數(shù)以平均每皿的菌落總數(shù)(CFU/平皿5 min)報(bào)告。 洗滌(消毒)后漂洗水pH值測(cè)定 采樣與測(cè)定方法 測(cè)定頻次:根據(jù)工作需要進(jìn)行pH值測(cè)定。 采樣方法:取洗滌(消毒)醫(yī)用織物最后一次漂洗時(shí)的中和后水500 mL，供直接測(cè) 定pH值。 測(cè)定方法:按《中華人民共和國(guó)藥典》執(zhí)行。 結(jié)果判定: 規(guī)定。
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