【正文】 化反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)。（大題）1酶在有機(jī)介質(zhì)中由于水分子減少，相對(duì)來(lái)說(shuō)酶分子的構(gòu)象表現(xiàn)出比水溶液中更具有“剛性”特點(diǎn)。因而使通過(guò)選擇不同性質(zhì)的溶劑來(lái)調(diào)控酶的某些特性成為可能。 2由于引起沒(méi)變形的許多因素都與水的存在有關(guān)，因此在有機(jī)介質(zhì)中酶的穩(wěn)定性得到顯著提高。 3由于有機(jī)溶劑的存在，水量減少，大大降低了許多需要水參與的副反應(yīng)，如酸酐的水解，酰基轉(zhuǎn)移等。 4在有機(jī)介質(zhì)中進(jìn)行的酶促反應(yīng)，可以省略產(chǎn)物的萃取分離過(guò)程，提高收率。5. 舉例說(shuō)明有機(jī)介質(zhì)中酶催化反應(yīng)的具體應(yīng)用。第10章 酶抑制劑1. 什么是酶失活作用？什么是酶抑制作用？什么是酶去激活作用？失活作用是指由于一些物理因素或化學(xué)試劑部分或全部破壞了酶的三維結(jié)構(gòu)，即引起酶蛋白變性，導(dǎo)致部分或全部喪失活性。抑制作用指一些化合物能夠與酶的必需基團(tuán)結(jié)合，改變必需基團(tuán)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，酶未發(fā)生變性，從而引起酶活性的下降，甚至使酶的活性完全喪失。去激活作用：某些酶只有在金屬離子存在下才有活性，去除金屬離子也會(huì)引起這些酶活性的降低或喪失，去激活作用通過(guò)去除金屬離子而間接地影響酶的活性。當(dāng)金屬離子去除后，底物與酶的結(jié)合減少，實(shí)際上是降低了底物的有效濃度。2. 什么是不可逆抑制劑？什么是可逆抑制劑？如何區(qū)分這兩種抑制類(lèi)型？不可逆抑制劑:抑制劑與酶的必需基團(tuán)以共價(jià)形式結(jié)合，引起酶活性喪失。不能用透析、超濾等物理方法解除抑制而使酶恢復(fù)活性?？赡嬉种苿阂种苿┡c酶蛋白以非共價(jià)方式結(jié)合，引起酶活性暫時(shí)性喪失。抑制劑可以通過(guò)透析等方法被除去，并且能部分或全部恢復(fù)酶的活性。區(qū)分：1物理方法：用透析、超濾和凝膠過(guò)濾等方法是否能除去抑制劑來(lái)鑒別可逆抑制作用和不可逆抑制作用。 2動(dòng)力學(xué)方法：在測(cè)定酶活力系統(tǒng)中加入一定量的抑制劑，測(cè)定酶反應(yīng)的初速度，以初速度和酶濃度作圖區(qū)別。3. 什么是競(jìng)爭(zhēng)性抑制、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制？各自的特點(diǎn)？競(jìng)爭(zhēng)性抑制：某些抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)與底物相似，因而能與底物競(jìng)爭(zhēng)與酶活性中心結(jié)合，當(dāng)抑制劑與活性中心結(jié)合后，底物被排斥在反應(yīng)中心之外，其結(jié)果是酶促反應(yīng)被抑制。特點(diǎn)：1競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑多是酶的底物類(lèi)似物或反應(yīng)產(chǎn)物；2抑制劑與底物競(jìng)爭(zhēng)與酶結(jié)合，多于酶的活性中心同底物結(jié)合的基團(tuán)結(jié)合；3底物濃度增加時(shí)，抑制作用減弱，取決于底物濃度與抑制劑濃度的比例及其與酶的親和力的大小，可通過(guò)增加底物濃度的方法消除抑制作用；4動(dòng)力學(xué)參數(shù)：Km值增大，Vm值不變。非競(jìng)爭(zhēng)性抑制：酶可同時(shí)與底物及抑制劑結(jié)合，引起酶分子構(gòu)象變化，并導(dǎo)致酶活性下降。由于這類(lèi)物質(zhì)并不是與底物競(jìng)爭(zhēng)與活性中心的結(jié)合，所以稱(chēng)為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。（名詞解釋?zhuān)┨攸c(diǎn)：1非競(jìng)爭(zhēng)抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)不一定與底物分子結(jié)構(gòu)類(lèi)似；2底物和抑制劑分別獨(dú)立的與酶的不同部位相結(jié)合；抑制劑是與酶的活性中心以外的必需基團(tuán)結(jié)合而起作用的；3抑制劑對(duì)酶和底物的結(jié)合無(wú)影響，故底物濃度的改變對(duì)抑制程度無(wú)影響；抑制作用只取決于酶濃度、抑制劑濃度和Ki的大小；4動(dòng)力學(xué)參數(shù)：Km值不變。Vm值降低反競(jìng)爭(zhēng)性抑制：酶與底物結(jié)合后抑制劑才能和酶結(jié)合，反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用常見(jiàn)于多底物反應(yīng)。特點(diǎn)：1反競(jìng)爭(zhēng)抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)不一定與底物的分子結(jié)構(gòu)類(lèi)似；2抑制劑與底物可同時(shí)與酶的不同部位結(jié)合；3必須有底物存在，抑制劑才能對(duì)酶產(chǎn)生抑制作用；抑制程度隨底物濃度的增加而增加；4動(dòng)力學(xué)參數(shù)：Km減小，Vm降低4. 微生物來(lái)源的酶抑制劑篩選的一般步驟？微生物的分離；篩選模型的建立；發(fā)酵條件的確定；抑制劑的分離、鑒定第11章 現(xiàn)代酶學(xué)1. 請(qǐng)描述Ribozyme的發(fā)現(xiàn)以及意義。核酶的分類(lèi)？什么是脫氧核酶？發(fā)現(xiàn)：核酶是美國(guó)科學(xué)家Cech和Altman發(fā)現(xiàn)的具有酶的特異性催化功能的一類(lèi)RNA。20世紀(jì)80年代，美國(guó)科學(xué)家Cech等人在研究四膜蟲(chóng)RNA時(shí)，首次發(fā)現(xiàn)rRNA中I型內(nèi)含子具有自我剪接功能，隨后，Altman和Pace以及Cech幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了真正的RNA催化劑，其中L19RNA和核糖核酸酶P的RNA組分是兩個(gè)最具有說(shuō)服力的例子。意義：（1）打破了生物催化劑只有蛋白質(zhì)一家的傳統(tǒng)觀念，給今后生命的人工合成提供了一個(gè)重要的信息；（2）給生命起源和演變提供一個(gè)新的線索；（3）將酶的概念拓展為：酶是具有生物催化功能的一類(lèi)大分子，包括蛋白質(zhì)或RNA。分類(lèi)：（1）剪接型核酶：I型內(nèi)含子、II型內(nèi)含子（2）剪切型核酶：自體催化的有錘頭核酶、發(fā)夾核酶、丁型肝炎病毒核酶；異體催化的有RNaseP。脫氧核酶：具有酶活性的DNA分子稱(chēng)為脫氧核酶。2. 什么是抗體酶？有什么特點(diǎn)？抗體酶制備的方法及其原理？抗體酶：具有催化能力的免疫球蛋白稱(chēng)為催化抗體，即抗體酶。特點(diǎn)：（1）與配體結(jié)合的專(zhuān)一性；（2）具有高效催化性；（3）具有與天然酶相近的米氏方程動(dòng)力學(xué)及pH依賴(lài)性等；（4）一種對(duì)酶促反應(yīng)過(guò)渡態(tài)特異的抗體——既可以起酶促催化作用，又可以起抗體的選擇性和專(zhuān)一性結(jié)合抗原的作用；（5）能催化一些天然酶不能催化的反應(yīng)；（6）有更強(qiáng)的專(zhuān)一性和穩(wěn)定性。制備方法：（1）誘導(dǎo)法：利用反應(yīng)過(guò)渡態(tài)類(lèi)似物為半抗原制作單克隆抗體，篩選出具高催化活性的單抗即抗體酶。原理：用設(shè)計(jì)好的半抗原，通過(guò)與載體蛋白偶聯(lián)制成抗原。然后對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫，取免疫動(dòng)物的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞雜交，雜交細(xì)胞則分泌單克隆抗體，經(jīng)篩選和純化，得抗體酶。（2）拷貝法：主要根據(jù)抗體生成過(guò)程中抗原抗體互補(bǔ)性來(lái)設(shè)計(jì)的。原理：用酶作為抗原免疫動(dòng)物得到抗酶的抗體，再將此抗體免疫動(dòng)物進(jìn)行單克隆化，獲得單克隆的抗抗體。對(duì)抗抗體進(jìn)行篩選，獲得具有原來(lái)酶活性的抗體酶。（3）引入法：借助基因工程和蛋白質(zhì)工程將催化基因引入到特異抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)上，使其獲得催化功能。原理：將催化基因或輔助因子引入到抗體的抗原結(jié)合部位，可采用選擇性化學(xué)修飾方法，亦可利用蛋白質(zhì)工程和基因工程技術(shù)。（4）化學(xué)修飾法：對(duì)抗體進(jìn)行化學(xué)修飾，使抗體與催化基因相連。3. 什么是模擬酶，其酶學(xué)基礎(chǔ)是什么？根據(jù)Kirby分類(lèi)方法，模擬酶的分類(lèi)？（大題）模擬酶：又稱(chēng)人工合成酶，是一類(lèi)利用有機(jī)化學(xué)方法合成的，比天然酶簡(jiǎn)單的非蛋白質(zhì)分子或蛋白質(zhì)分子，以這些分子作為模型來(lái)模擬酶對(duì)其作用底物的結(jié)合和催化過(guò)程。酶學(xué)基礎(chǔ)：具有兩個(gè)特殊部位：底物結(jié)合位點(diǎn)和催化位點(diǎn)。分類(lèi)：?jiǎn)渭兠改Ｐ停夯瘜W(xué)方法通過(guò)天然酶活性的模擬來(lái)重建和改造酶活性。機(jī)理酶模型：通過(guò)對(duì)酶作用機(jī)制諸如識(shí)別、結(jié)合和過(guò)渡態(tài)穩(wěn)定化的認(rèn)識(shí)，來(lái)指導(dǎo)酶模型的設(shè)計(jì)和合成。單純合成的酶樣化合物：化學(xué)合成的具有酶樣催化活性的簡(jiǎn)單分子。4. 什么是分子印跡酶？分子印跡酶：通過(guò)分子印跡技術(shù)產(chǎn)生的類(lèi)似于酶的活性中心的空腔，對(duì)第五產(chǎn)生有效的結(jié)合作用，可以再結(jié)合部位的空腔內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生催化基團(tuán)，并與底物定向排列，這樣產(chǎn)生的為分子印跡酶。5. 極端微生物的定義？什么是極端酶？極端微生物：又稱(chēng)嗜極菌，是在超常生態(tài)環(huán)境條件下生存的微生物。極端酶：極端微生物合成的與其所處環(huán)境相適應(yīng)的酶。（名詞解釋?zhuān)?0