光譜分析技術(shù)(好資料)-資料下載頁
2025-08-05 03:01本頁面
【正文】 計(jì)有何異同點(diǎn) ？ 紫外 可見分光光度計(jì) : 光源 樣品池 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 熒光 (磷光 )分光光度計(jì) : 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 熒光分光光度計(jì) 樣品池 ：與紫外 可見分光光度計(jì)的吸收池一樣 2. 吸收池的形狀： 紫外 可見分光光度計(jì)的吸收池兩面透光 熒光分光光度計(jì)的樣品池四面透光 問題： 紫外 可見分光光度計(jì)的吸收池與熒光分光光度計(jì)的樣品池有什么區(qū)別？ 熒光分光光度計(jì) 紫外 可見分光光度計(jì) 測量池 (吸收池 ) 熒光分光光度計(jì) 樣品池 I0 It I0 It IF,p 熒光分光光度計(jì) 熒光光譜的應(yīng)用 芳香族化合物存在共軛的不飽和體系 ， 是有機(jī)化合物熒光測定的主要類型 。 1. 有機(jī)化合物的鑒定 待測物 試劑 λ exmax λemmax 測定范圍 ppm 丙三醇 苯胺 紫外 藍(lán)色 ~2 糠 醛 蒽酮 465 505 ~15 氨基酸 氧化酶 315 425 ~50 維生素 A 無水乙醇 345 490 0~20 蛋白質(zhì) 曙紅丫 紫外 540 ~6 腎上腺素 乙二胺 420 525 ~ 青霉素 α甲氧基 ６ 氯 ９ (β氨乙基 )氨基氮雜蒽 420 500 ~ 玻璃酸梅 3乙酰氧基吲哚 395 470 ~ 胍基丁胺 鄰苯二醛 365 470 ~5 四氧嘧啶 苯二胺 365 485 104 熒光光譜的應(yīng)用 2. 分子標(biāo)記與追蹤 在生物學(xué)研究中，科學(xué)家們利用能發(fā)光的熒光分子對生物體進(jìn)行標(biāo)記。將熒光分子通過化學(xué)方法“掛在”其他“不可見”的分子上，原來不可見的部分就變得可見了。生物學(xué)家利用這種標(biāo)記方法，把原本透明的細(xì)胞、細(xì)胞器或生物分子從黑暗的顯微鏡視場中“揪出來”。 量子點(diǎn) （無機(jī)納米粒子） 熒光染料 （有機(jī)小分子） 熒光蛋白 （蛋白質(zhì)） 熒光光譜的應(yīng)用 —— 電泳 Midori Green Ethidiumbromide 熒光光譜的應(yīng)用 SYBR Green I 實(shí)時(shí)定量熒光 PCR（ RTqPCR） — 分子信標(biāo) 熒光光譜的應(yīng)用 TaqMan 熒光光譜的應(yīng)用 幾種含苯基側(cè)鏈的氨基酸可以發(fā)出熒光，且受微環(huán)境變化的影響，因此可用于作為內(nèi)源熒光探針來研究蛋白質(zhì)構(gòu)象。 熒光光譜的應(yīng)用 ELISA中的“熒光” 熒光光譜的應(yīng)用 下村修等人于 1962年在一種學(xué)名為Aequorea victoria的水母中發(fā)現(xiàn)能發(fā)光的蛋白 —— 綠色熒光蛋白（ green fluorescent protein, GFP）。分子質(zhì)量為 26kDa，由 238個(gè)氨基酸構(gòu)成。 2022年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了下村修以及另外兩位科學(xué)家（美國科學(xué)家馬丁 沙爾菲和美籍華裔科學(xué)家錢永?。?，以表彰他們發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了綠色熒光蛋白質(zhì)技術(shù)。 細(xì) 胞 標(biāo) 記 熒光光譜的應(yīng)用 活 體 標(biāo) 記 熒光光譜的應(yīng)用 ，會(huì)產(chǎn)生具有毒性的氧自由基，導(dǎo)致被觀察的細(xì)胞死亡，這叫做“光毒性”，因此，在綠色熒光蛋白發(fā)現(xiàn)以前，科學(xué)家們只能通過熒光標(biāo)記來研究死亡細(xì)胞靜態(tài)結(jié)構(gòu)，而綠色熒光蛋白的光毒性非常弱，非常適合用于標(biāo)記活細(xì)胞，在 GFP出現(xiàn)之前這完全不可想象。 融合，轉(zhuǎn)導(dǎo)至宿主細(xì)胞，在宿主細(xì)胞中翻譯表達(dá)出靶蛋白與熒光蛋白的復(fù)合體。 綠色熒光蛋白 熒光光譜的應(yīng)用 可以發(fā)出各種顏色熒光的熒光蛋白 熒光光譜的應(yīng)用 熒光光譜的應(yīng)用 量子點(diǎn) (quatum dots) Cd/Pb/ZnS/Se/Te 。 ，有機(jī)熒光材料會(huì)遭遇 光漂白 ，長時(shí)間激發(fā)后造成熒光效率的不斷降低；量子點(diǎn)則可承受長時(shí)間高強(qiáng)度的激發(fā)。 ，而發(fā)射光范圍窄。 （這意味著什么？） 量子點(diǎn) 熒光光譜的應(yīng)用 當(dāng)需要同時(shí)熒光標(biāo)記幾個(gè)不同靶標(biāo)時(shí)，量子點(diǎn)較廣的激發(fā)范圍意味著可以在同一激發(fā)光波長下同時(shí)激發(fā)不同的量子點(diǎn)。 而窄范圍的發(fā)射光范圍則使得不同量子點(diǎn)發(fā)出的不同顏色的熒光更易鑒別和測量，減少了干擾。
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