光譜分析技術(shù)(好資料)-全文預(yù)覽
【正文】 棕色 蘭色 藍(lán)綠色 492 460 449 425 642 堿性磷酸酯酶 4硝基酚磷酸鹽 (PNP) 萘酚 ASMx磷酸鹽 +重氮鹽 黃色 紅色 400 500 葡萄糖氧化酶 ABTS+HRP+葡萄糖 葡萄糖 +甲硫酚嗪 +噻唑蘭 黃色 深藍(lán)色 405 420 βＤ－半乳糖苷酶 甲基傘酮基半乳糖苷(4MuG) 硝基酚半乳糖苷 (ONPG) 熒光 黃色 360,450 420 分子熒光光譜 什么是熒光光譜 某些物質(zhì)經(jīng)紫外 可見光照射后，能立即放出能量較低（亦即波長較長）的光 —— 光致發(fā)光 。 ○ 生物分子的紫外 可見吸收光譜 脂 脂 肪 ○ ○ 230~240 nm, 于有機(jī)溶劑中（如乙醇、正己烷等） 類 脂 維生素 A 326 nm于乙醇 C H 3CH 3 C H 3 C H 3C H 3CH 3C H 3C H3C H 3CH 3番茄紅素 番茄紅素在溶劑正己烷中的譜圖 番茄紅素在溶劑石油醚中的譜圖 生物分子的紫外 可見吸收光譜 生物分子的紫外 可見吸收光譜 蛋白質(zhì) Proteins in solution absorb ultraviolet light with absorbance maxima at 280 and 200 nm. Amino acids with aromatic rings are the primary reason for the absorbance peak at 280 nm. Peptide bonds are primarily responsible for the peak at 200 nm. 酪氨酸 H 2 N C H CC H 2O HO H 2 N C H CC H 2O HOO HH 2 N C H CC H 2O HOH N色氨酸 苯丙氨酸 生物分子的紫外 可見吸收光譜 核酸 嘌呤和嘧啶在 250～ 280 nm有強(qiáng)的吸收作用，綜合起來在 260 nm吸收值最大。cm1 摩爾吸光系數(shù)： 當(dāng)溶液濃度 c的單位為 mol/L，液層厚度 b的單位為 cm時(shí)， K叫“ 摩爾吸光系數(shù) ”，用 ε表示，其單位為 L 吸光度 —— 透光率的倒數(shù)的對數(shù)叫吸光度 。與已知化合物紫外光譜作對照時(shí)也應(yīng)注明所用的溶劑是否相同。s 1J = 1018 eV Ｅ = hγ= hc/λ 當(dāng)物質(zhì)所吸收的電磁輻射能量能夠滿足 該物質(zhì)由低能態(tài) (基態(tài) )躍遷至高能態(tài) (激發(fā)態(tài) )， 將產(chǎn)生吸收光譜 當(dāng)物質(zhì)通過電、熱或光等激發(fā)至激發(fā)態(tài)， 再從激發(fā)態(tài)過渡到低能態(tài)或基態(tài)時(shí)， 將產(chǎn)生發(fā)射光譜 吸收光譜 發(fā)射光譜 光學(xué)導(dǎo)論 某分子的外層價(jià)電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài) 需要 20 eV，請問該分子吸收光的波長？ 解： 1 eV = 1019 J 根據(jù)公式Ｅ = hc/λ 則 λ= hc/Ｅ = （ 1034 3 108 ） / （ 20 1019 ） = 107 m = 62 nm 紫外 可見分光光度法 什么是紫外 可見光譜 遠(yuǎn)紫外光區(qū)： 10~200 nm 近紫外光區(qū)： 200~400 nm UVC： 200~280 nm UVB： 280~320 nm UVA： 320~400 nm 可見光區(qū)： 400~780 nm 紅外光區(qū)： 780 nm~1 mm 什么是紫外 可見分光光度法 基于 分子 外層價(jià)電子 躍遷 產(chǎn)生的 在紫外 可見光譜區(qū) 的 吸收光譜 進(jìn)行分析的一種常用的光譜分析方法。s1 波長 λ：相鄰兩個(gè)波峰或波谷間的直線距離 單位可以是 nm、 μm、 cm、 m 頻率 γ：在 1秒時(shí)間內(nèi)經(jīng)過某點(diǎn)的波數(shù)
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