本規(guī)范規(guī)定了化妝品微生物學(xué)檢驗總則-資料下載頁
2025-08-04 17:04本頁面
【正文】 脫纖維羊血(或兔血) 10mL 制法：將營養(yǎng)瓊脂加熱融化，待冷至50℃左右無菌操作加入脫纖維羊血，搖勻，制成平板，置冰箱內(nèi)備用。 甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基 成分： 蛋白胨 10g 氯化鈉 5g 甘露醇 10g 牛肉膏 5g %麝香草酚藍(lán)溶液 12mL 蒸餾水 1000mL 制法： 將蛋白胨、氯化鈉、牛肉膏加到蒸餾水中，加熱溶解，加入甘露醇和指示劑，混勻后分裝試管中，(10 lb) 20min滅菌備用。 兔(人)血漿制備 取 % 檸檬酸鈉溶液，(15 lb) 30min高壓滅菌，1份加兔(人)全血4份，混勻靜置；2000rpm～3000 rpm離心3min～5min。血球下沉，取上面血漿。 無菌液體石蠟。5 操作步驟 增菌：取1:10 稀釋的樣品10mL接種到90mL SCDLP 液體培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24h。 分離：自上述增菌培養(yǎng)液中，取1～2接種環(huán)，劃線接種在Baird Parker平板，如無此培養(yǎng)基也可劃線接種到血瓊脂平板，置37℃培養(yǎng)24h～48h。在血瓊脂平板上菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。在Baird Parker 平板上為圓形，光滑，凸起，濕潤，直徑為2mm～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明帶。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶。挑取單個菌落分純在血瓊脂平板上，置37℃培養(yǎng)24h。 染色鏡檢：挑取分純菌落，涂片，進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢。金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性菌，排列成葡萄狀，無芽胞，無夾膜，致病性葡萄球菌，菌體較小，～1μm。 甘露醇發(fā)酵試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)基液面上加入2mm～3mm 的滅菌液體石蠟，置37℃培養(yǎng)24h，金黃色葡萄球菌應(yīng)能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。 血漿凝固酶試驗：吸取1:，放入滅菌小試管中?；靹?，放37℃恒溫箱或恒溫水浴中，每半小時觀察一次，6h之內(nèi)如呈現(xiàn)凝塊即為陽性。，分別加入滅菌1:4 ，混勻，作為對照。6 檢驗結(jié)果報告 經(jīng)增菌培養(yǎng)后，在分離平板上有典型或可疑菌落生長，經(jīng)染色鏡檢，證明為革蘭氏陽性葡萄球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。六、霉菌和酵母菌 Molds and Yeast Count1 范圍 本規(guī)范規(guī)定了化妝品中霉菌和酵母菌數(shù)的檢測方法?！ ”疽?guī)范適用于各種化妝品中霉菌和酵母菌的總數(shù)測定。2 定義 本規(guī)范采用下列定義。 霉菌和酵母菌總數(shù)是指化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落總數(shù)，藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。 本方法根據(jù)霉菌和酵母菌特有的形態(tài)和培養(yǎng)特性，在虎紅培養(yǎng)基上，置28℃培養(yǎng)72h，計算所生長的霉菌和酵母菌數(shù)。3 儀器和設(shè)備 恒溫霉菌培養(yǎng)箱：28℃。 振蕩器。 天平。 三角瓶。 試管。 試管架。 平皿：直徑90mm。 刻度吸管：1mL、2mL、10mL。 量筒。 酒精燈。 高壓滅菌器。4 培養(yǎng)基和試劑 生理鹽水 。 虎紅(孟加拉紅)培養(yǎng)基 成分： 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 磷酸二氫鉀 1g 硫酸鎂(含7H2O) 瓊脂 20g 1/3000虎紅溶液 100mL (四氯四碘熒光素) 蒸餾水 1000mL 氯霉素 100mg 制法： 將上述前5種成分加入蒸餾水中溶解后，再加入虎紅溶液。分裝后，(15 lb)20min高壓滅菌。另用少量乙醇溶解氯霉素，過濾除菌后，加入培養(yǎng)基中，若無氯霉素，可用鏈霉素代替，每1000mL培養(yǎng)基加鏈霉素30mg。5 操作步驟 樣品稀釋 。 取1:10的檢液2mL分別注入2個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL（若菌量較多時可順序再做10倍稀釋），另取1個滅菌空平皿（作空白對照），每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL，充分搖勻。凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置28℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)72h，計數(shù)平板內(nèi)生長的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長，為避免影響其它霉菌和酵母菌的計數(shù)時，于48h應(yīng)及時將此平板取出計數(shù)。 計算方法：先點數(shù)每個平板上生長的霉菌和酵母菌菌落數(shù)，求出每個稀釋度的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時，應(yīng)選取菌落數(shù)在5～50個范圍之內(nèi)的平皿計數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后，即為每g(或每mL)檢樣中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。其它范圍內(nèi)的菌落數(shù)報告應(yīng)參照菌落總數(shù)的報告方法報告之。 每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g(mL)表示。233
范文總結(jié)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1