本規(guī)范規(guī)定了化妝品微生物學檢驗總則(完整版)
【正文】 間僅需10s。 b. 稀石碳酸復紅液：稱取堿性復紅10g，研細，加95%乙醇100mL，放置過夜，濾紙過濾?！媾囵B(yǎng)24h。再以蒸餾水補足至1000mL。 小倒管?！?。為了縮短數(shù)字后面零的個數(shù)，可用10的指數(shù)來表示(見表1報告方式欄)。7 菌落計數(shù)及報告方法 首先選取平均菌落數(shù)在30～300個之間的平皿，作為菌落總數(shù)測定的范圍。如樣品含菌量高，還可再稀釋成1:1000，1:10000，……等，每種稀釋度應換1支吸管。 放大鏡。 量筒。 固體樣品，稱取10g，加到90mL滅菌生理鹽水中，充分振蕩混勻，使其分散混懸，靜置后，取上清液作為1:10的檢液。如不能及時檢驗，樣品應放在室溫陰涼干燥處，不要冷藏或冷凍。 滅菌液體石蠟。 研缽?！ ”疽?guī)范適用于化妝品樣品的采集、保存、供檢樣品制備。 玻璃珠。 SCDLP液體培養(yǎng)基 成分： 酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化鈉 5g 磷酸氫二鉀 葡萄糖 卵磷脂 1g 吐溫80 7g 蒸餾水 1000mL 制法：先將卵磷脂在少量蒸餾水中加溫溶解后，再與其它成分混合，加熱溶解，～，分裝，(15lb)20min高壓滅菌。 供檢驗樣品，應嚴格保持原有的包裝狀態(tài)，進口產(chǎn)品應為市售包裝。 膏、霜、乳劑半固體狀樣品 親水性的樣品，稱取10g，加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振蕩混勻，靜置15min。所得結果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。 刻度吸管： 10mL、2mL、1mL。 5 操作步驟 用滅菌吸管吸取1:10稀釋的檢液2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300個之間，其中一個稀釋度大于300個，而相鄰的另一稀釋度小于30個時，則以接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之(見表1中例6)。2 定義 本規(guī)范采用下列定義 糞大腸菌群(Fecal coliforms)系一群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌，℃培養(yǎng)24h～48h能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。 電爐。4 培養(yǎng)基和試劑 雙倍乳糖膽鹽培養(yǎng)基 成分： 蛋白胨 40g 豬膽鹽 10g 乳糖 10g %溴甲酚紫水溶液 5mL 蒸餾水 1000mL 制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶解于蒸餾水中，%溴甲酚紫水溶液5mL，混勻，分裝試管(每支試管中加一個小倒管)。 蛋白胨水(作靛基質試驗用) 成分： 蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g 氯化鈉 5g 蒸餾水 1000mL 制法：將上述成分加熱融化，～，分裝小試管，(15 lb)15min高壓滅菌。 革蘭氏碘液： 碘 1g 碘化鉀 2g 蒸餾水加至 300mL 將碘與碘化鉀先進行混合，加入蒸餾水少許，充分振搖，待完全溶解后，再加蒸餾水至300mL。 滴加95%乙醇脫色，約30s，或將乙醇滴滿整個涂片，立即傾去，再用乙醇滴滿整個涂片，脫色10s，水洗?！媾囵B(yǎng)24h。 四、綠膿桿菌Pseudomonas Aeruginosa1 范圍 本規(guī)范規(guī)定了化妝品中綠膿桿菌的檢驗方法。 試管。4 培養(yǎng)基和試劑 SCDLP液體培養(yǎng)基 。5 操作步驟 增菌培養(yǎng)：取1:10樣品稀釋液10mL加到90mL SCDLP液體培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)18h～24h。如上層鹽酸液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時為陽性，表示被檢物中有綠膿菌素存在。 2 定義 本規(guī)范采用下列定義 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄狀排列，無芽胞，無莢膜，能分解甘露醇，血漿凝固酶陽性。 酒精燈。培養(yǎng)基應是致密不透明的。 分離：自上述增菌培養(yǎng)液中，取1～2接種環(huán)，劃線接種在Baird Parker平板，如無此培養(yǎng)基也可劃線接種到血瓊脂平板，置37℃培養(yǎng)24h～48h。 甘露醇發(fā)酵試驗：取上述分純菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)基液面上加入2mm～3mm 的滅菌液體石蠟，置37℃培養(yǎng)24h，金黃色葡萄球菌應能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。 霉菌和酵母菌總數(shù)是指化妝品檢樣在一定條件下培養(yǎng)后，1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落總數(shù)，藉以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛(wèi)生狀況。 平皿：直徑90mm。另用少量乙醇溶解氯霉素，過濾除菌后，加入培養(yǎng)基中，若無氯霉素，可用鏈霉素代替，每1000mL培養(yǎng)基加鏈霉素30mg。 每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g(mL)表示。 取1:10的檢液2mL分別注入2個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL（若菌量較多時可順序再做10倍稀釋），另取1個滅菌空平皿（作空白對照），每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL，充分搖勻。 量筒。3 儀器和設備 恒溫霉菌培養(yǎng)箱：28℃?；靹?，放37℃恒溫箱或恒溫水浴中，每半小時觀察一次，6h之內(nèi)如呈現(xiàn)凝塊即為陽性。在Baird Parker 平板上為圓形，光滑，凸起，濕潤，直徑為2mm～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明帶
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