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本規(guī)范規(guī)定了化妝品微生物學檢驗總則(留存版)

2025-09-18 17:04上一頁面

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【正文】 酚紅 (%溶液1mL) 瓊脂 20g 蒸餾水 1000mL 制法:除瓊脂和酚紅外,將其它成分加到蒸餾水中,加熱溶解,加入瓊脂、酚紅,(15 lb)20min高壓滅菌后,制成平板備用。 明膠液化試驗,取綠膿桿菌可疑菌落的純培養(yǎng)物,穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內,置37℃培養(yǎng)24h,取出放冰箱10min~30min,如仍呈溶解狀時即為明膠液化試驗陽性;如凝固不溶者為陰性。6H2O) 5g 瓊脂 20g 蒸餾水 950mL pH 177。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。 振蕩器。凝固后,翻轉平板,置28℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)72h,計數平板內生長的霉菌和酵母菌數。分裝后,(15 lb)20min高壓滅菌。2 定義  本規(guī)范采用下列定義。5 操作步驟 增菌:取1:10 稀釋的樣品10mL接種到90mL SCDLP 液體培養(yǎng)基中,置37℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24h。 載玻片。 綠膿菌素試驗:取可疑菌落2~3個,分別接種在綠膿菌素測定培養(yǎng)基上,置37℃培養(yǎng)24h,加入氯仿3mL~5mL,充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于氯仿液內,待氯仿提取液呈藍色時,用吸管將氯仿移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1mL左右,振蕩后,靜置片刻。 高壓滅茵器。6 檢驗結果報告根據發(fā)酵乳糖產酸產氣,平板上有典型菌落,并經證實為革蘭氏陰性短桿菌,靛基質試驗陽性,則可報告被檢樣品中檢出糞大腸菌群。 滴加革蘭氏碘液,作用1min,水洗。傾注平皿備用。 接種環(huán)。 若所有稀釋度的平均菌落數均小于30個,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1例5)。 %氯化三苯四氮唑(2,3,5triphenyl terazolium chloride,TTC) 成分: TTC 蒸餾水 100mL 溶解后過濾,(15 lb)20min高壓滅菌,裝于棕色試劑瓶,置4℃冰箱備用。2 定義 本規(guī)范采用下列定義  菌落總數(aerobic bacterial count)是指化妝品檢樣經過處理,在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH值、需氧性質等),1g(1mL)檢樣中所含菌落的總數。包裝量小于20g的樣品,采樣量應適量增加,其總量應大于16g。 三角瓶。 均質器。 若只有一份樣品而同時需做多種分析,如微生物、毒理、化學等,應先做微生物檢驗,再將剩余樣品做其它分析。 pH計或精密pH試紙。 將融化并冷至45℃~50℃的卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內,每皿約15mL,隨即轉動平皿,使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻,待瓊脂凝固后,翻轉平皿,置37℃培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48h。在報告菌落數為“不可計”時,應注明樣品的稀釋度。 pH計或pH試紙。 ~,輕搖試管。5 操作步驟 取10mL 1:10稀釋的檢液,加到10mL雙倍濃度的乳糖膽鹽培養(yǎng)基中,置44℃177。此外還能液化明膠,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,在42℃條件下能生長。 綠膿菌素測定用培養(yǎng)基 成分: 蛋白胨 20g 氯化鎂 硫酸鉀 10g 瓊脂 18g 甘油(化學純) 10g 蒸餾水 1000mL 制法:將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中,加溫使其溶解,加入瓊脂和甘油,加熱溶解,分裝于試管內,(10 lb)20min高壓滅菌后,制成斜面?zhèn)溆谩? 42℃生長試驗:挑取可疑的綠膿桿菌純培養(yǎng)物,接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上,放在41~42℃培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)24h~48h,綠膿桿菌能生長,為陽性,而近似的熒光假單胞菌則不能生長。 增菌劑的配制:30%卵黃鹽水50mL與除菌過濾的1%亞碲酸鉀溶液10mL混合,保存于冰箱內。偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落,但無混濁帶及透明帶。 天平。若有霉菌蔓延生長,為避免影響其它霉菌和酵母菌的計數時,于48h應及時將此平板取出計數。 虎紅(孟加拉紅)培養(yǎng)基 成分: 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 磷酸二氫鉀 1g 硫酸鎂(含7H2O) 瓊脂 20g 1/3000虎紅溶液 100mL (四氯四碘熒光素) 蒸餾水 1000mL 氯霉素 100mg 制法: 將上述前5種成分加入蒸餾水中溶解后,再加入虎紅溶液。  本規(guī)范適用于各種化妝品中霉菌和酵母菌的總數測定。 無菌液體石蠟。 試管。 氧化酶試驗:取一小塊潔凈的白色濾紙片放在滅菌平皿內,用無菌玻璃棒挑取綠膿桿菌可疑菌落涂在濾紙片上,然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基對苯二胺試液,在15s~30s之內,出現粉紅色或紫紅色時,為氧化酶試驗陽性;若培養(yǎng)物不變色,為氧化酶試驗陰性。 電爐。陽性者液面呈玫瑰紅色;陰性反應液面
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