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正文內(nèi)容

如何得到染料法熒光pcr的可靠數(shù)據(jù)-資料下載頁

2025-08-04 15:27本頁面
  

【正文】 的時(shí)候,第二峰的tm可能有一定差異;而這是兩個(gè)相同樣本的結(jié)果。而熔解曲線結(jié)果比較好的時(shí)候,復(fù)孔的結(jié)果也是不錯(cuò)的。 好的熔解曲線和差的熔解曲線放在一起分析 pcr上圖中有一對復(fù)孔熔解曲線比較好,基本可以認(rèn)為是單峰;一對復(fù)孔熔解曲線出現(xiàn)了雙峰;其實(shí)仔細(xì)看,好的熔解曲線前面也有一個(gè)很小很小的峰,位置和不好的雙峰是相同的。那么可以認(rèn)為,差的熔解曲線也出現(xiàn)了特異性產(chǎn)物,雖然前面有一個(gè)非特異的峰。 好的熔解曲線和差的熔解曲線放在一起分析,轉(zhuǎn)過來看擴(kuò)增曲線 pcr經(jīng)常要對應(yīng)二者來看的。 再看陰性對照的熔解曲線 是正常的,未被污染。 再來看熔解曲線pcr基本上分成兩種;好的和不好的;而不好的與好的,在熔解曲線的峰上就分析而言,是吻合的;需要調(diào)整程序,降低非特異性擴(kuò)增;具體表現(xiàn)在程序上,就是提高退火溫度,縮短延伸時(shí)間。 結(jié)論:基本得到目的產(chǎn)物,下一步工作是優(yōu)化反應(yīng)程序,提示:提高退火溫度,縮短延伸時(shí)間
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