熒光定量pcr技術(shù)在臨床檢測中的應(yīng)用-資料下載頁
2025-01-08 06:52本頁面
【正文】 確診病例：從呼吸道標(biāo)本或血清中分離到特定病毒； RTPCR對上述標(biāo)本檢測，有甲型 H1N1病毒 RNA存在，經(jīng)過測序證實，或兩次血清抗體滴度 4倍升高，可確診為人感染甲型 H1N1流感。 四 TORCH感染特點與檢測 TOX : Toxoplasma gondii RV: Rubella virus CMV: Human cytomegalovirus HSV: Herpes simplex virus TORCH TORCH感染特點 1. 母 胎傳播的主要病原體 2. 引起胎兒畸形新生兒缺陷的重要原因 3. 自然狀態(tài)下呈隱性感染 4. 懷孕、多次輸血、 AIDS等易發(fā)生顯性感染 5. 可致多發(fā)性、全身性感染 6. 只有風(fēng)疹可獲得長久的免疫力，可用疫苗預(yù)防 TORCH (一 ) 弓形蟲感染與致病 ? 滋養(yǎng)體如弓形 ，廣泛分布，人獸共患。 ? 寄生在有核細(xì)胞中，貓和貓科動物是終宿主 ? 易感者多，免疫者少 ? 我國智力低下兒的弓形蟲感染率 28％ 畸形兒的弓形蟲抗體 IgM陽性率 ％ ? 艾滋病患者約有 20％～ 80％合并弓形蟲感染 ，造成艾滋病死亡的一個重要并發(fā)病 TORCH –TOX ? 人群自然感染率達(dá)到 6090%，多為隱性感染 ? 免疫功能低下 (懷孕、多次輸血、器官移植、 AIDS)發(fā)生顯性感染 ? 可發(fā)生垂直傳播，是宮內(nèi)感染和胎兒畸形的主要病毒之一 ? 圍生期感染 ? 血、尿、乳汁、精液、分泌物中都可檢出病毒 (二 ) 人巨細(xì)胞病毒感染 與致病 TORCHCMV ? 風(fēng)疹是一種世界性的病毒傳染病， 是造成畸胎及先天性疾病的病毒之一 ? 出疹前 1周至出疹后 5天均有傳染性 ? 人是風(fēng)疹病毒的唯一宿主 ? 風(fēng)疹感染后可獲得持久的免疫力，臨床顯性再感染并不多見。 (三 ) 人風(fēng)疹病毒感染與致病 TORCHRV ? 先天性風(fēng)疹感染往往發(fā)生在母體初次感染之時，可致先天性風(fēng)疹綜合癥 (CRS) 三聯(lián)癥：白內(nèi)障、耳聾、心臟病。 ? 妊娠時體內(nèi)皮質(zhì)類固醇激素的增加以及細(xì)胞免疫功能的減弱，這種對正常人無害的再感染有可能造成病毒蔓延以至影響胎兒。 TORCHRV (三 ) 人風(fēng)疹病毒感染與致病 ? HSV原發(fā)感染多為隱性，大多無臨床癥狀或呈亞臨床表現(xiàn) ? HSV1主要引起 口唇皰疹 ，皰疹性結(jié)膜炎、腦炎，皮膚性皰疹 ? HSV2主要引起 原發(fā)性 生殖器皰疹 (80%) 。 ? HSV感染后大多數(shù)個體不能徹底消滅病毒，也不能阻止復(fù)發(fā)，病毒以潛伏狀態(tài)長期存在宿主體內(nèi)。 TORCHHSV (四 ) 人單純皰疹病毒感染與致病 ? 妊娠期婦女因 HSV1被激活，可通過胎盤感染胎兒，引起胎兒畸形、智力低下、流產(chǎn)等。 ? 圍產(chǎn)期感染可引發(fā)新生兒皰疹，死亡率高達(dá) 50%以上。 ? HSV常與 HIV1同時感染，并能促進(jìn)病情發(fā)展，引起嚴(yán)重的局部和播散性感染。目前認(rèn)為 HSV是一種調(diào)節(jié)因素，能激活 HIV復(fù)制 ? 與宮頸癌關(guān)系密切 。 TORCHHSV (四 ) 人單純皰疹病毒感染與致病 常規(guī) TORCH檢測方法與不足 ? 組織培養(yǎng)或病原體分離：慢，費力，陽性率低。 ? 血清學(xué)診斷： IgG： 人群自然感染率高達(dá) 6090%。 IgG(＋ )不能區(qū)別既住感染與現(xiàn)癥感染； 新生兒 IgG(＋ )不能說明有感染。 IgM： IgM(＋ )可能是原發(fā)性感染； IgM(－ )不能排除感染。 TORCH 局限性： 1. 不能定量分析 2. 抗體的產(chǎn)生受多種因素的影響 3. 交叉反應(yīng)，假陽性 熒光探針檢測 TORCH的優(yōu)勢 原理：直接檢測 TORCH病原體的核酸 優(yōu)點：靈敏、快速，特異 意義：早期診斷，婦幼保健、優(yōu)生優(yōu)育 1. 篩選 TORCH患者，提高出生人口素質(zhì)。 2. 有利于預(yù)測胎兒宮內(nèi)感染狀況及妊娠結(jié)局。 3. TORCH感染孕婦的治療效果觀察。 4. 器官移植、免疫系統(tǒng)疾病等病人監(jiān)控。 5. 建立 TORCH的分子診斷標(biāo)準(zhǔn) TORCH TORCH TOX CMV RV HSV 核測核酸 DNA DNA RNA DNA 檢測標(biāo)本 血液、羊水、絨毛膜 血液、尿液、乳汁、唾液、精液、分泌物 咽拭子、血液、尿液 、羊水、胎盤、妊娠物 皰疹液、患處刮片、粘膜、血液 TORCH檢測核酸與檢測標(biāo)本的比較 檢驗報告單結(jié)果讀取 ? +06 檢測下限 : 1000拷貝 /毫升 ? 106 +03 copy/ml 如果是標(biāo)本量是可以定量的，如血液、腦脊液等，則檢測結(jié)果報告為： copy/ml 如果是標(biāo)本量不能定量，如分泌物等，則結(jié)果只能報告為： copy 法醫(yī)鑒定 ? 免疫學(xué)診斷主要是抗原抗體反應(yīng)，應(yīng)用于臨床通常在體內(nèi)產(chǎn)生抗體以后，而許多病原體的免疫學(xué)檢測存在較長的 “ 窗口期 ” ，不利于對疾病的早期診斷； PCR方法直接檢測病原體的 DNA/RNA，能大大縮短 “ 窗口期 ” ，其高靈敏度的檢測顯然也有利于疾病的早期診斷 。 疾病的早期診斷 ? 1 乙型肝炎 病毒 （ HBV） 。 2. 丙型肝炎 病毒（ HCV） ? 3 淋球菌 (NGH)。 4 人類免疫缺陷病毒（ HIV） ? 5 解脲脲原體 (UU) 6 肺炎支原體 (MP) ? 7 單純皰疹 II型 8 人巨細(xì)胞病毒 （ HCMV） ? 9 人乳頭瘤病毒 （ HPV） 11 ? 10 高危型人乳頭瘤病毒 （ HPV 8個型） ? 11 沙眼衣原體 (CT) 12 a地中海貧血 ? 13 結(jié)核分支桿菌 (TB) 14 新型冠狀病毒 (SARS) 已獲證書 ? 熒光定量 PCR技術(shù)中國專利 ? 國家重點新產(chǎn)品 ? 多種熒光 PCR試劑盒新藥證書 ?多項國家、省部級等科技進(jìn)步獎 ? 三十余項國家、省部級重點科研項目 ? 業(yè)務(wù)遍布全國 1026家醫(yī)療衛(wèi)生單位 達(dá)安烙印
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