4第三章-玻片標(biāo)本的制作技術(shù)-資料下載頁
2025-08-04 08:15本頁面
【正文】 圍轉(zhuǎn)幾圈，主要是為了趕出樣品周圍的氣泡。這時即可用雙手持包埋盒的兩耳放入冷水表面，等包埋盒內(nèi)的石蠟?zāi)毯笤偎砷_手，使石蠟達到完全凝固即可取出備用。 包埋時的注意事項： 1）、所用石蠟一定要純，如從外觀看有顆粒狀雜質(zhì)時，需熔化過濾后再使用。 2）、新石蠟要經(jīng)過多次的熔化凝固再使用，這樣可趕出石蠟中的氣體和水分。 3）、包埋的樣品一定要在包埋盒的兩耳上做好標(biāo)記，避免樣品的混淆。 4）、包埋過程中不要將液體石蠟弄得到處都是，因為石蠟不好擦洗。 5）、如果用電爐子熔化石臘，一定要有人看守，而且溫度不能太高，否則會引起石蠟的燃燒發(fā)生火災(zāi)。 6）、包埋用的液體石蠟溫度不能太高，一般高于熔點的 2～ 3度，溫度太高會損傷樣品。 八、切片、貼片和片展 切片機： 樣品包埋結(jié)束就要進行切片，所使用的儀器叫切片機，進行石蠟切片的叫石蠟切片機（有的書上也叫手搖切片機或輪轉(zhuǎn)式切片機）。 石蠟切片機的基本結(jié)構(gòu)是由 樣品臂、樣品推進器、切片厚度 調(diào)節(jié)器、切片刀座、手搖輪和切 片機底座構(gòu)成的。 切片刀：石蠟切片所使 用的刀是金屬材質(zhì)的，刀口十 分鋒利，根據(jù)切片刀的形狀可分 為平凹型 、雙凹型和平楔型三種 類型（分別見右圖 A、 B、 C）。 切片刀的長度根據(jù)用途不同而異，一般情況下石蠟切片刀的長度是 12cm；滑行切片機用得到最長是 14～ 20 cm；冷凍器片機的刀是 8cm 。 切片刀不鋒利時需要磨，磨刀有兩種方法，一種是人工磨刀法；另一種是用磨刀機磨。人工磨刀法需要有一定的專業(yè)技術(shù)水平，否則會把 刀磨壞的。 其技術(shù)要點是： 刀在磨石上的運行速度、 方向和刀口接觸磨石的均 勻度及壓刀的用力（見右 圖所示）。磨石根據(jù)使用 的研磨介質(zhì)可分為兩種， 一種是以水作為研磨介質(zhì)的 叫水磨石；另一種是用甘油 作研磨介質(zhì)的叫油磨石。 切片刀的研磨很用時間，一把在顯微鏡低倍物鏡下觀察有鋸齒缺刻的刀，一個技術(shù)熟練的人磨，上班時間就磨刀大約需要一周時間。所以切片倒要好好保存使用，要由專人負(fù)責(zé)管理。 機械磨刀是用磨刀機，將要磨的刀夾到夾持器上，加上研磨膏，打開磨刀機電源，設(shè)定好刀的運行速度以及刀翻轉(zhuǎn)的時間后，讓其自己磨就可以了，到了時間取下刀就可以使用了。 切片的步驟和方法 1）、包埋塊的修正： 將包埋有樣品的石蠟塊用單面或雙面刀片進行修整。以準(zhǔn)備切片的面和準(zhǔn)備向臺木上沾的面作為兩個對應(yīng)平面，將四個側(cè)面修成相互對稱而平行的面，并將切片面樣品前端的石蠟在不損傷樣品的前提下盡量去干凈，樣品四周留 1～ 2毫米的石蠟。 2）、將修好的組織塊固定到準(zhǔn)備好的臺木上： 臺木是一塊 ～ 2cm見方的結(jié)構(gòu)致密的優(yōu)質(zhì)木材做成的， 新做的臺木要用液體石蠟浸泡 24小時，使其浸滿石蠟，這樣修好的組織塊沾上后才 牢固。臺木也可用金屬 的代替，有個別的石蠟 切片機上配備有，但它 不如木質(zhì)的好用（見右 圖）。 向臺木上沾修好的組 織塊的方法是，將已經(jīng)浸 石蠟的臺木放在桌子上，左手持修好的組織塊，使底面與臺木的上表面平行并盡量接觸臺木，右手拿一單面刀片，在酒精燈上燒熱，快速放入臺木與蠟塊接觸的之間，這時左手下壓蠟塊，右手迅速拉出熱刀片，蠟塊就沾到了臺木上，然后再取一些碎蠟放到臺木和蠟塊接觸的周邊，用熱刀片使之熔化，起到加固作用。 3）、 向切片機樣品夾持器上安裝固定好待切片的樣品 將沾有樣片的臺木安裝到樣品夾持器上，并用固定螺絲固定好。 4）、 把切片刀安裝到刀座上 在裝刀時一定注意，不能用任何硬物損傷刀口，同時也要防止傷了自己的手。 5）、調(diào)節(jié)刀的角度 刀的角度一般調(diào)至 10～ 15度，刀座上有刻度指示。 6）、調(diào)節(jié)切片厚度 根據(jù)切片厚度的要求不同，用切片機上的厚度調(diào)節(jié)器，選擇所需的厚度即可。一般情況下厚度在 2～ 3微米的叫薄切片； 12微米以上的為厚切片；常選厚度是 8～ 10微米，這一厚度動物和植物材料都適用。 注意： 雖然在切片機上選擇了厚度，切出的片子的厚度可能與選擇的不同，這是正常的， 因為切片厚度要受室內(nèi)溫度、包埋塊的性質(zhì)以及諸多因素的影響，這就需要根據(jù)經(jīng)驗采取一定的措施來補救。 7）、切片 切片的要領(lǐng)是：右手以均勻的速度搖切片機的手掄，搖的速度既不能太快也不能太慢；左手持一新的毛筆托住切出的切片，使之成為切片連 成的帶 ；當(dāng)切片帶到一定的長度時，右手停止搖輪；把切片帶放到瓷盤內(nèi)的硬紙上，使近切片刀的一面接觸紙（切記不能放反了）；切好的片子要防止污染。 貼片與展片 1）載玻片與蓋玻片的準(zhǔn)備：蓋玻片要清洗干凈烤干或擦干備用。 2）、粘片劑： A、 蛋白甘油粘片劑 新鮮雞蛋清 50ml 甘油 50ml 防腐劑（水楊酸鈉或石炭酸） 1g 配制方法： 將新鮮蛋清（不能混入蛋黃）放入小燒杯內(nèi)，用玻璃棒打成雪花狀泡沫，置片刻過濾到量筒內(nèi)，再加入等量甘油混勻；然后加入防腐劑，盛于小瓶中封好口， 40C保存可使用幾個月至半年。 B、明膠粘片劑 明膠 1g 蒸餾水 100ml 石炭酸（苯酚） 2g 甘油 15ml 配制時先將明膠溶解于 300C的蒸餾水中，然后加入石炭酸和甘油混合均勻，趁熱過濾后貯存于玻璃瓶中備用。 3）貼片與展片的方法： 取干凈載玻片，在上面加一點粘片劑于其中間，并用小手指涂均勻；然后在上面滴加 1～ 2滴蒸餾水，用單面刀片割取 2～ 3片切片，將靠紙的一面（近刀刃面）向下放在水上；然后放展片臺上，由于水受熱而使切片展平。如果沒有展片臺，可把帶有切片的載玻片在火焰上間斷的加熱，觀察到切片在水面上展平為止。然后用吸水紙吸去多余水分，置防塵處干燥 24小時以上。
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