核酸探針技術及應用-資料下載頁
2025-07-30 22:49本頁面
【正文】 細胞病毒、腺病毒、乙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒等50多種病毒的核酸探針以及致病性大腸桿菌、志賀氏菌、軍團菌、結(jié)核分枝桿菌和非典型分枝桿菌等細菌的核酸探針已開始應用于檢測。在獸醫(yī)上牛白血病、傳染性牛氣管炎病毒、皰疹病毒、牛羊藍舌病病毒、綿羊的梅迪／維斯納病毒、豬偽狂犬病毒、禽敗血支原體和滑膜支原體等動物病原微生物的核酸探針也開始用于臨床。2 在遺傳性疾病及點突變的直接分析方面DNA分子中某個堿基的替換或核苷酸的插入缺失及重排都可能引起遺傳性疾病。一般可以根據(jù)遺傳性基因產(chǎn)物的改變來分析遺傳疾病的發(fā)生，但對那些不能用蛋白產(chǎn)物進行分析的遺傳疾病可用DNA雜交技術進行分析。對于那些基因點突變引起的限制性內(nèi)切酶作用部位增加或消失、或因DNA順序的增加、缺失或重排、使各位點之間的DNA長度發(fā)生改變而引起的遺傳疾病可用DNA探針直接分析。用DNA雜交技術已直接分析了動脈粥樣硬化、糖尿病和生長激素缺陷等遺傳病。目前化學合成的核苷酸探針也能進行點突變的直接分析，其原理是根據(jù)寡核苷酸鏈和給定的等位基因之間的一個堿基對的錯配來鑒別基因型(這個等位基因在此條件下完全不能雜交)。這種方法已用于分析α1一抗胰蛋白酶缺陷、鐮狀細胞貧血。此外人的性別鑒定和法醫(yī)學上人的DNA指紋分析，也廣泛應用核酸探針診斷技術。3 在其他方面的應用 檢測抗生素耐藥性 核酸探針可直接從標本中測出細菌的耐藥基因 Perine等用DNA探針查出尿路滲出液中的大多數(shù)淋球菌含有TEM 型β一內(nèi)酰胺酶而對青霉素G耐藥。 流行病學調(diào)查 探針可用于研究醫(yī)源性感染中爆發(fā)流行時大量的流行菌株間的同源性，結(jié)果易于分析和解釋。 惡性腫瘤最引起人們注意的是用探針來診斷癌癥。最近發(fā)現(xiàn)，許多人體腫瘤細胞具有可辯認的致癌基因，Amgen公司和Abbott實驗室聯(lián)合已合成并試制了檢測致癌基因的探針。原發(fā)性肝癌的早期診斷指標甲胎蛋白，(AFP)應用互補于mRNA AFP的單鏈DNA探針進行雜交，診斷原發(fā)性肝癌。 法醫(yī)學物證鑒定罪犯的毛發(fā)、血斑或精斑等的鑒定可用DNA探針， 如果樣品中目的序列的含量太低，可用聚合酶鏈式反應方法擴增而取得滿意效果。5．食品衛(wèi)生加工食品如乳、蛋及肉類制品要在制作過程中多次進行沙門氏菌試驗，需要5— 7天時間并花費大量人力物力，如果用探針只要2—3天完成，不但優(yōu)于培養(yǎng)的方法而且避免交叉反應。綜上所述，目前用于臨床診斷的核酸探針分析技術正在朝著靈敏、快速及簡便的方向發(fā)展。發(fā)展新型的探針形式，在檢測前擴增樣品中的目的序列以提高靈敏度。均相沉淀體系是目前最簡單的雜交程序。探針標記的總趨勢是非放射性標志物越來越多的代替放射性同位素。核酸探針技術在進一步簡化操作，提高靈敏性及自動化程度的前提下，將成為臨床診斷的重要工具
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