懷化醫(yī)專微生物學(xué)檢驗(yàn)教案doc-資料下載頁(yè)
2025-07-18 17:38本頁(yè)面
【正文】 40um，故原稱T株（tiny strain）。 支原體在雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)中極易生長(zhǎng)。支原體的繁殖方式多樣，以二分裂繁殖為主，也有出芽、分支或球體延伸，分節(jié)段裂成許多球狀與短桿狀的顆粒。生化反應(yīng) 支原體可根據(jù)是否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素來進(jìn)行鑒別?？乖瓨?gòu)造 支原體細(xì)胞膜上的抗原結(jié)構(gòu)由蛋白質(zhì)和糖脂組成。細(xì)胞膜外層蛋白質(zhì)是支原體的主要型特異性抗原，具有免疫原性，在鑒定支原體時(shí)有重要意義。支原體的抗原常用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（GIT）與代謝制試驗(yàn)（MIT）鑒定，這兩種方法可將支原體分成若干血清型，如溶脲脲原體可分為16型。 抵抗力 抵抗力略比一般細(xì)菌弱，55℃5～15min即死亡。耐冷，70℃或液氮可長(zhǎng)期存活。對(duì)一般消毒劑比細(xì)菌敏感。因缺乏細(xì)胞壁，對(duì)青霉素、頭孢霉等等作用于細(xì)胞壁的抗生素不敏感，常用于檢材以抑制雜菌生長(zhǎng)有利于支原體的分離。對(duì)阻礙蛋白質(zhì)合成的強(qiáng)力霉素、氯霉素、紅霉素及螺旋霉素等敏感。二、致病性 大多不致病，少數(shù)主要通過其頂端結(jié)構(gòu)與宿主細(xì)胞上的受體結(jié)合而粘附于細(xì)胞，從細(xì)胞獲得脂質(zhì)和膽固醇作為養(yǎng)料，并產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。第二節(jié) 主要病原性支原體一、肺炎支原體 肺炎支原體（）主要引起人的原發(fā)性非典型性肺炎(Primary atypical pneumonia)。 形態(tài)培養(yǎng)多呈球形或絲狀，,革蘭陰性， Giemsa染色呈淡紫色，初次分離，培養(yǎng)基中須加入足量的血清、新鮮酵母液，培養(yǎng)10天，長(zhǎng)出油煎蛋樣菌落。 發(fā)酵葡萄糖，還原美蘭，有氧情況下可使無色的氯化三笨四氮唑（TTC）還原為紅色，從而使菌落呈粉紅色或深紅色；不分解尿素和精氨酸，由此可做鑒定依據(jù)。致病性一般認(rèn)為是外源性感染，傳染源是病人或帶菌者。常發(fā)生于夏末秋初，青少年多見。主要通過咳嗽，飛沫經(jīng)呼吸道感染。臨床表現(xiàn) 頭痛、發(fā)熱、咳嗽、胸痛、淋巴結(jié)腫大等，X線胸部透視見肺部明顯浸潤(rùn)。此外，還可引起咽喉炎、鼻炎、中耳炎、氣管炎和支氣管炎。感染支原體后呼吸道粘膜產(chǎn)生的SigA對(duì)再感染有一定防御作用，但免疫力不強(qiáng)，可重復(fù)感染。二、泌尿生殖道感染的支原體 主要有溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原體。被列為性傳播疾病的病原體。：在培養(yǎng)基上形成的菌落極小，直徑15～40μm，故又稱T株（tiny strain），可分解尿素。 與沙眼衣原體一起同是人類非淋菌性尿道炎的病原體（約占 90% ），主要經(jīng)性接觸傳播，潛伏期為13周。典型癥狀為尿道內(nèi)癢，伴尿急、排尿不暢，輕微尿痛，少數(shù)病人有膿性分泌物；也可引起不育癥，睪丸附睪丸炎、慢性前列腺炎；女性可引起陰道炎、盆腔炎、輸卵管炎、宮頸炎、流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和低體重胎兒及新生兒呼吸道感染，不孕癥。：除引起人非淋菌性尿道炎外，還可慢性前列腺炎、宮頸炎和盆腔炎3 .生殖支原體：形態(tài)多呈燒瓶樣，有一明顯的頸部。致病性與前相同。第三節(jié) 微生物學(xué)檢驗(yàn)一、標(biāo)本采集：肺炎可采咽部分泌物、痰或胸水 泌尿生殖道感染：采尿道分泌物、前列腺液、陰道或?qū)m頸分泌物等。二、檢驗(yàn)方法及鑒定 因其無固定形態(tài)，染色結(jié)果難與其他雜物區(qū)別，故支原體的診斷主要依靠分離培養(yǎng)、生化反應(yīng)和血清學(xué)試驗(yàn)。（一）肺炎衣原體分離培養(yǎng)： 常用（Hayflick）培養(yǎng)基：以牛心浸液為基礎(chǔ)，另加小牛血清、酵母浸液、蛋白胨、NaCl、葡萄糖、指示劑、抑制劑等。 液體固體二步培養(yǎng)法：①將標(biāo)本種于液體（Hayflick）培養(yǎng)基，每日、觀察培基指示劑顏色的變化（因分解葡萄糖產(chǎn)酸），初次分離約須21天才使指示劑變色；②，二氧化碳培養(yǎng)，從接種第一周之后，每隔一日取出觀察一次，（初次分離約需2~4周），兩周后用高倍鏡檢查有無油滴狀菌落，可初步診斷。鑒定：溶血試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)、氯化三笨四氮唑（TTC）試驗(yàn)、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)。 特異性抗原、抗體的檢測(cè)（少用） 非特異性血清學(xué)試驗(yàn)： 冷凝集實(shí)驗(yàn)：人感染肺炎支原體后，血清中可產(chǎn)生一種冷凝集素（即IgM型的自身抗體）,可與自身紅細(xì)胞或型人紅細(xì)胞在4℃條件下結(jié)合，效價(jià)大于1：64為陽性反應(yīng)，可考慮肺炎支原體感染。 MG鏈球菌凝集試驗(yàn)：感染者血清中可產(chǎn)生能凝集甲型鏈球菌MG株的抗體。而病毒性肺炎則無此抗體，故可鑒別3. PCR（二）溶脲脲原體：培養(yǎng)法，將標(biāo)本接種于含尿素和酚紅指示劑的培養(yǎng)基中，8~12小時(shí)可發(fā)生顏色改變，72小時(shí)不變色者為陰性。人型支原體較慢，2~3天才可變色，5天不變?yōu)殛幮浴Ｐ〗Y(jié)：本次課學(xué)習(xí)了衣原體、支原體、立克次體的概念及其特征，并介紹了衣原體、支原體、立克次體的生物學(xué)性狀、主要病原性衣原體、支原體、立克次體的致病性及其檢驗(yàn)方法，注意衣原體、支原體、立克次體與細(xì)菌的鑒別，它們同為原核細(xì)胞型微生物，有許多相似之處，但衣原體、立克次體為專性細(xì)胞內(nèi)寄生，衣原體有獨(dú)特的發(fā)育周期，支原體無細(xì)胞壁。15 / 15
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