微生物學實驗教案-資料下載頁
2025-04-27 13:20本頁面
【正文】 100時，用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)字，以四舍五入方法修約。為了縮短數(shù)字后面的0的個數(shù)，可用10的指數(shù)來表示，如表1“報告方式”一欄所示。(3)大腸菌群的測定(多管發(fā)酵法)： (一)自來水檢查： 初(步)發(fā)酵實驗 在2個含有50ml三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵瓶中，各加入100ml水樣；在10支含有5ml三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，各加入10ml水樣(見圖)。搖勻后，37℃下培養(yǎng)24小時，24小時未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng)至48小時。 平板分離 經(jīng)24小時培養(yǎng)后，產(chǎn)酸產(chǎn)氣及48小時產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管(瓶)，分別劃線接種于尹紅美藍瓊脂平板上，再于37℃下培養(yǎng)1824小時，將符合下列特征的菌落的一小部分，進行涂片，革蘭氏染色，鏡檢。⑴深紫黑色、有金屬光澤。⑵紫黑色、不帶或略帶金屬光澤；⑶淡紫紅色、中心顏色較深。 復(fù)發(fā)酵實驗 經(jīng)涂片、染色、鏡檢，如為革蘭氏染色陰性無芽孢桿菌，則挑取該菌落的另一部分，重新接種于普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中，每管可接種來自同一初發(fā)酵管的同類型菌落13個，37℃下培養(yǎng)24小時，結(jié)果若產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，即證實有大腸菌群存在。 證實有大腸菌群存在后，再根據(jù)初發(fā)酵的陽性管(瓶)數(shù)查表，即得大腸菌群數(shù)(見表一)。 表一 接種水樣總量300ml(100ml2份、10ml10份) 100ml水量陽性管數(shù)10ml水量陽性管數(shù) 0 1 2每升水樣中大腸菌群數(shù)每升水樣中大腸菌群數(shù)每升水樣中大腸菌群數(shù)03411138182713273111838414245251830706223692727431208315116193660230104069230 （二）、池水、河水或湖水等的檢查： 將水樣稀釋成101與102。 分別吸取1ml10101的稀釋水樣和1ml原水樣，各注入裝有10ml普通濃度的乳糖蛋白胨發(fā)酵管中。另取10ml和100ml原水樣，分別注入裝有5ml和50ml三倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管(瓶)中。 以下步驟同自來水的平板分離和復(fù)發(fā)酵實驗。 將100、(101)ml水樣的發(fā)酵管結(jié)果查表見表二：將(101)、(102) ml水樣的發(fā)酵管結(jié)果查表見表三：即得每升水樣中大腸菌群數(shù) 表二 (100、)接種水樣量(ml)每升水樣中大腸菌群數(shù)1001019+9+9+++18++19++22+23+++28++92++94+++180++230+++960+++2380++++2380 表三 ()接種水樣量(ml)每升水樣中大腸菌群數(shù)10190+90+90+95++180++190++220+230+++280++920++940+++1800++2300+++9600+++23800++++23800“+”發(fā)酵陽性、“”發(fā)酵陰性表 1 稀釋度的選擇及細菌數(shù)報告方式稀釋度及菌落數(shù)兩稀釋度之比菌落總數(shù)/（cfu/g或cfu/mL）報告方式（菌落總數(shù)）/（cfu/mL或cfu/g）1011021031多不可計16420164001042多不可計29546377501043多不可計27160271001044多不可計多不可計313313000105527115270270或6000＜10＜107多不可計30512305001041)生活飲用水或食品生產(chǎn)用水的檢驗： 五、實驗報告： 結(jié)果： (1)自來水 100ml水樣的陽性管數(shù)是多少？ 10ml水樣的陽性管數(shù)是多少？ 查表一得每升水樣中大腸菌群是多少？ (2)池水、河水或湖水 陽性結(jié)果記“+”；陰性結(jié)果記“”。 查表二得每升水樣中大腸菌群是多少？ 查表三得每升水樣中大腸菌群是多少？ 思考題： p188(13)六、教學反饋
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