生物化學(xué)周愛儒第六版第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能-資料下載頁
2025-07-17 20:51本頁面
【正文】 乎可以完全水解，DNA在同樣條件下則不受影響。（ 這種水解性能上的差別，與 RNA核糖基上 2′ OH的鄰基參與作用有關(guān)。在 RNA水解時， 2′ OH首先進攻磷酸基，在斷開磷酯鍵的同時形成環(huán)狀磷酸二酯，再在堿的作用形成水解產(chǎn)物。） （ 2）酶水解 ? 生物體內(nèi)存在多種核酸水解酶。 ? DNA水解酶（ DNases）、 RNA水解酶（ RNases）。 ? 核酸外切酶和核酸內(nèi)切酶。 ? 限制性核酸內(nèi)切酶：水解核酸中某些特定堿基順序的部位。 四 . 核酸的變性、復(fù)性和雜交 1. 核酸的變性 ： 指核酸雙螺旋區(qū)的多聚核苷酸鏈間的氫鍵斷裂，變成單鏈結(jié)構(gòu)的過程。 ? 核酸的變性并不涉及磷酸二酯鍵的斷裂， 所以它的一級結(jié)構(gòu) (堿基順序 )保持不變。 ? 變性核酸： OD260增高，粘度下降，浮力密度升高， 失去其部分或全部的 生物活性。 ? 增色效應(yīng) —— 核酸變性后，其在 260 nm處的紫外吸收值將增加。 DNA約增加 25－ 40%； RNA約增加 %。 ? 核酸變性的因素 ：溫度升高、酸堿度改變、甲醛和尿素等的存在均可引起核酸的變性。 DNA的熱變性 ? DNA的變性過程是突變性的，在很窄的溫度區(qū)間內(nèi)完成。因此，通常將引起 DNA變性的溫度稱為融點（解鏈溫度、融解溫度、 Tm ）。 ? Tm： DNA熱變性達到一半時候的溫度。 G和 C的含量高， Tm值高： （ G+C)%=() A260 Tm T 解鏈曲線 2. 復(fù)性 —— 變性 DNA在適當?shù)臈l件下，兩條彼此分開的單鏈可以重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)，這一過程稱為復(fù)性。 ? DNA復(fù)性后，一系列性質(zhì)將得到恢復(fù)，但是生物活性一般只能得到部分的恢復(fù)。 ? DNA復(fù)性的程度 、 速率與復(fù)性過程的條件有關(guān) 。 將熱變性的 DNA驟然冷卻至低溫時 ， DNA不可能復(fù)性 。 但是將變性的 DNA緩慢冷卻時 ， 可以復(fù)性 。 分子量越大復(fù)性越難 。 濃度越大 ， 復(fù)性越容易 。此外 ， DNA的復(fù)性也與它本身的組成和結(jié)構(gòu)有關(guān) 。 粘度 3. 核酸的分子雜交 —— 熱變性的 DNA單鏈，在復(fù)性時并不一定與同源DNA互補鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，它也可以與在某些區(qū)域有互補序列的異源 DNA單鏈形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。這樣形成的新分子稱為雜交 DNA分子。 DNA單鏈與互補的 RNA鏈之間也可以發(fā)生雜交。 ? 核酸的雜交在分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的研究中具有重要意義。 加 溫 緩慢 降溫 加 溫 緩慢 降溫 （ 變 性 ） （ 復(fù) 性 ） （ 分 子 雜 交 ） 核酸分子雜交的應(yīng)用： 研究 DNA分子中某一種基因的位置 定兩種核酸分子間的序列相似性 檢測某些專一序列在待檢樣品中存在與否 是基因芯片技術(shù)的基礎(chǔ) 核酶 riboeyme—— 具有催化作用的 RNA。 進一步深化了人們過去對酶的本質(zhì)的認識； 在腫瘤和病毒性疾病的治療中起作用。
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