db333974-20xx無(wú)公害羅氏沼蝦第4部分：苗種-資料下載頁(yè)
2025-06-29 06:29本頁(yè)面
【正文】 本試劑采用固相載體(酶標(biāo)板)用羅氏沼蝦特異性性抗體吸附，使之獲得對(duì)羅氏沼蝦肌肉白濁病病毒(羅氏沼蝦諾達(dá)病毒)的高度親合力，可有效結(jié)合樣品中的微量病毒。再加入能與病毒結(jié)合的小鼠抗體和用酶標(biāo)記的抗小鼠抗體，如樣品中有病毒存在，則可最終使酶能特異性地結(jié)合于固相載體表面，最后加入酶的底物鄰苯二胺，在酶存在下底物可被催化生成黃色的產(chǎn)物，表明測(cè)定樣品有病毒存在。無(wú)病毒樣品則不能使酶標(biāo)抗體結(jié)合到固相表面上，表現(xiàn)為無(wú)色。(示意圖如下) EP管中，加入PBS(磷酸鹽緩沖溶液) ，充分研磨，再加PBS ，搖勻，9000rpm,離心5min。 離心上清，加入已包被好的酶標(biāo)板中(固相載體)，37℃孵育60min，用沖洗液PBST沖洗三次，每次拍干。，37℃孵育60min，用沖洗液PBST沖洗(同上)。，37℃孵育60min，沖洗(同上)。(鄰苯二胺OPD)，使用前加入過氧化氫(10ml+15ul)，黑暗中顯色15min 硫酸 12滴，中止反應(yīng)。觀察結(jié)果：樣品中有病毒者可顯示黃色至黃棕色?！?7℃進(jìn)行，溫度過低會(huì)影響反應(yīng)靈敏度，每次孵育時(shí)間應(yīng)不短于45分鐘，否則也會(huì)降低靈敏度。最后顯色應(yīng)在暗處進(jìn)行。(致癌作用)，操作后應(yīng)充分洗手，反應(yīng)結(jié)束后的酶標(biāo)板應(yīng)及時(shí)清洗，以免對(duì)他人造成危害。，采樣后可冰凍保存，測(cè)定前取出。 ______5
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