【導(dǎo)讀】血袋車間及取樣間空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn)方案方案編號(hào)：PSV-DHVACPQ-P1501版本號(hào):01-2020. 避免污染及交叉污染。負(fù)責(zé)對(duì)確認(rèn)系統(tǒng)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果進(jìn)行審核和批準(zhǔn)。負(fù)責(zé)對(duì)確認(rèn)中出現(xiàn)的偏差和確認(rèn)結(jié)果進(jìn)行分析討論，并作出評(píng)價(jià)，決定再確認(rèn)周期。組織協(xié)調(diào)確認(rèn)活動(dòng)，提供確認(rèn)所需資源，確保確認(rèn)進(jìn)度。負(fù)責(zé)確認(rèn)方案的制訂、實(shí)施與協(xié)調(diào)，組織確認(rèn)的相關(guān)培訓(xùn)。上報(bào)驗(yàn)證委員會(huì)。負(fù)責(zé)收集各項(xiàng)確認(rèn)、試驗(yàn)記錄并歸入確認(rèn)文件中。準(zhǔn)備和起草確認(rèn)報(bào)告。

　　

【正文】 D521 中檢 PB C級(jí) 編號(hào) 1 同“靜態(tài)” 2 2 1/5 1/5 D081 負(fù)壓稱量室 A 級(jí)送風(fēng) 編號(hào) 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D101 負(fù)壓稱量室 編號(hào) 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D131 FFU 編號(hào) 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D141 FFU 編號(hào) 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 B、質(zhì)量控制取樣室： 測(cè)試區(qū)域 潔凈 級(jí)別 房間面積 （ m2） 采樣點(diǎn)布置 采樣點(diǎn) 數(shù)目 最少采樣次數(shù) (每點(diǎn) /總 ) 最小 采樣量 /次 L 門牌號(hào) 房間 靜 動(dòng) 靜 動(dòng) 靜 動(dòng) 靜 動(dòng) G21 緩沖室 C 編號(hào) 1 +取樣間門口 2 3 1/5 1/5 G22 取樣室 C 編號(hào) 取樣位置附近 4 4 1/5 1/5 G23 手消毒室 C 編號(hào) 1 +手消毒附近 2 3 1/5 1/5 G24 更潔服室 C 編號(hào) 1 +潔凈服附近 2 3 1/5 1/5 G25 更外衣室 D 編號(hào) 1 +水池附近 2 3 1/5 1/5 G221 凈化 工作臺(tái) A 編號(hào) 1 同“靜 態(tài)” 2 2 1/5 1/5 1000 記錄 **********有 限公司 第 30 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 見附件 5：“ 潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測(cè)記錄 ” 沉降菌 目的 為確保 生產(chǎn) 潔凈區(qū) 及實(shí)驗(yàn)室取樣潔凈區(qū) 沉降菌的監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 符合法規(guī) 及操作 環(huán)境 的要求。 程序 【器具及裝置】 高壓蒸汽滅菌鍋、干熱滅菌器、塑料筐、取樣袋（塑料袋）、φ 90mm15mm 規(guī)格的培養(yǎng)皿。 培養(yǎng)基： 大豆胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（ TSA） 恒溫培養(yǎng)箱：必須在校驗(yàn)期內(nèi)。 【測(cè)試步驟】 (1)測(cè)試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。 培養(yǎng)皿拿入凈化房間的流程： 自凈傳遞窗內(nèi)脫去外包裝→培養(yǎng)皿內(nèi)包裝表面用 75%酒精擦拭→自凈至少 12 分鐘→潔凈區(qū)。 (2)采樣者應(yīng) 穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在打開培養(yǎng)皿前，雙手用消毒液消毒或戴無菌手套操作。 (3)將已制備好的培養(yǎng)皿按 “懸浮粒子采樣點(diǎn) 布置圖 ” 逐一放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。 (4)靜態(tài)測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為 30min 以上； **********有 限公司 第 31 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于 4h，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)。 (5)全部采集結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (6)在 20℃～ 25℃培養(yǎng)，時(shí)間不少于 3d,后在 30℃～ 35℃培養(yǎng) 2d。 (7)每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢 驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定 3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。 【菌落計(jì)數(shù)】 (1)用肉眼對(duì)培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì) ，然后用 5～ 10 倍放大鏡檢查，有否遺漏。 (2)若平皿上有 2 個(gè)或 2 個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以 2 個(gè)或 2 個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。 【注意事項(xiàng)】 (1)測(cè)試用具要作滅菌處理，以確保測(cè)試的可靠性、正確性。 (2)采取一切措施防止認(rèn)為對(duì)樣本的污染。 (3)對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。 (4)由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察不要漏計(jì)培 養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。 (5)采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)，破損或污染的應(yīng)剔除。 【 測(cè)試規(guī)則】 **********有 限公司 第 32 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 (1)測(cè)試條件： 在測(cè)試之前，要對(duì)潔凈室（區(qū)）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測(cè)試，這類測(cè)試將會(huì)提供測(cè)試沉降菌的環(huán)境條件。例如：這種預(yù)先測(cè)試或可包括： a 溫度和相對(duì)濕度的測(cè)試。潔凈室（區(qū)）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝要求相適應(yīng)（無特殊要求時(shí)，溫度在 18℃～ 26℃、相對(duì)濕度：45％～ 65％為宜），同時(shí)應(yīng)滿足測(cè)試儀器的使用范圍。 b 室內(nèi)送風(fēng)量或風(fēng)速的測(cè)試，或壓 差的測(cè)試； c 高效過濾器的泄漏測(cè)試。 (2)測(cè)試狀態(tài) 靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試； 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于 2 人。 沉降菌測(cè)試前，需要預(yù)先消毒。 (3)測(cè)試時(shí)間 A、靜態(tài)測(cè)試時(shí)， C、 D 級(jí)潔凈室（區(qū)），測(cè)試在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間 30min 后開始。 B、動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間及測(cè)試時(shí)間。 【 沉降菌菌落數(shù)計(jì)算】 (1)采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置 最少采樣點(diǎn)數(shù)目：參照懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目。 采樣點(diǎn)位置：參照 “懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目布置圖”位置。 a 工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地 ～ 左右。 **********有 限公司 第 33 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 b 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn) 。 (2) 靜態(tài)最少培養(yǎng)皿數(shù) 在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)： 見表 1 最少培養(yǎng)皿數(shù) 潔凈度級(jí)別 最少培養(yǎng)皿數(shù)（φ 90mm） A 14 C 2 (3)采樣次數(shù) 每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次 (4)采樣注意事項(xiàng) a 采樣口宜向上。 b 布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。 c 采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng)。 d 應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。 e 培養(yǎng)皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬動(dòng)過程造成的 影響，宜同時(shí)進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，每次或每個(gè)區(qū)域取 1 個(gè)對(duì)照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)無菌落生長。 【結(jié)果計(jì)算】 (1)用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 (2)每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)的計(jì)算，見式（ 1） **********有 限公司 第 34 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 M= ?????（ 1） 式中： M—— 平均菌落數(shù) M1—— 1 號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) M2—— 2 號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) Mn—— n 號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù) n —— 培養(yǎng)皿總數(shù) 【結(jié)果評(píng)定】 靜態(tài) a 每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。 b 在靜態(tài)測(cè)試時(shí)，若某測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重新采樣兩次，兩次測(cè)試結(jié)果均合格才能判定為符合。 動(dòng)態(tài)： 每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。 可接受標(biāo)準(zhǔn) 凈化級(jí)別 A 級(jí) C 級(jí) D 級(jí) 平均菌落數(shù) ?1CFU/4 小時(shí) ?50CFU/4 小時(shí) ?100CFU/4 小時(shí) 備注： 單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于 4 小時(shí)，同一位置可使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)。 A 級(jí) （ 包括 A 級(jí)送風(fēng)） 區(qū)應(yīng)滿足最少 14 個(gè)平皿的數(shù)量要求 ； M1+M2+?? Mn n **********有 限公司 第 35 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 記錄 見附件 6：“ 潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測(cè)記錄 ” 浮游菌 目的 為確保 生產(chǎn) 潔凈區(qū) 及實(shí)驗(yàn)室取樣潔凈區(qū) 浮游菌的監(jiān)測(cè)項(xiàng)目 符合法規(guī) 及操作環(huán)境 的要求。 程序 【器具及裝置】 浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器 培養(yǎng)基： 大豆胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（ TSA） 恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對(duì)恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗(yàn) 高壓蒸汽滅菌器 【測(cè)試要點(diǎn)】 (1) 必須按照測(cè)試儀器檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定，使用檢驗(yàn)合格，且在使用有效期內(nèi)的儀器。 (2) 全部采集結(jié)束后，將培養(yǎng) 皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (3) 在 20℃～ 25℃培養(yǎng)，時(shí)間不少于 3d,后在 30℃～ 35℃培養(yǎng) 2d。 (4) 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定 3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。 【測(cè)試狀態(tài)】 **********有 限公司 第 36 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試。 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于 2 人。 浮游菌測(cè)試前，被測(cè)潔凈室（區(qū)）需要預(yù)先消毒。 測(cè)試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測(cè)試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內(nèi)測(cè)試人員數(shù)。 【測(cè)試時(shí)間】 (1)靜態(tài)測(cè)試時(shí)，對(duì) A 級(jí)送風(fēng)（區(qū)）而言，測(cè)試應(yīng)在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 10min 后開始。 (2)動(dòng)態(tài)測(cè) 試時(shí)，須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。 【浮游菌濃度計(jì)算】 (1)采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置 最少采樣點(diǎn)數(shù)目及位置：參照懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目。 a 工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地 ～ 左右。 b 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。 (2)最少采樣量 浮游菌每次最小采樣量見下表。 表 1 最小采樣量 潔凈度級(jí)別 采樣量（ L/次） A 1000 C 500 (3)采樣次數(shù) 每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。 **********有 限公司 第 37 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調(diào)凈化系統(tǒng)性能確認(rèn) 方案 方案編號(hào)： PSVDHVACPQP1501 版本號(hào) :012020 (4)采樣注意事項(xiàng) a 對(duì)于單相流潔凈室（區(qū)）或送風(fēng)口，采樣器采樣口應(yīng)正對(duì)氣流方向。 b 采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng) 在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng)。 c 應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。 d 培養(yǎng)皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬動(dòng)過程造成的影響，宜同時(shí)進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，每次或每個(gè)區(qū)域取 1 個(gè)對(duì)照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)無菌落生長。 【結(jié)果計(jì)算】 (1)用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 (2)每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降