【導讀】血袋車間及取樣間空調凈化系統(tǒng)性能確認方案方案編號：PSV-DHVACPQ-P1501版本號:01-2020. 避免污染及交叉污染。負責對確認系統(tǒng)的風險評估結果進行審核和批準。負責對確認中出現(xiàn)的偏差和確認結果進行分析討論，并作出評價，決定再確認周期。組織協(xié)調確認活動，提供確認所需資源，確保確認進度。負責確認方案的制訂、實施與協(xié)調，組織確認的相關培訓。上報驗證委員會。負責收集各項確認、試驗記錄并歸入確認文件中。準備和起草確認報告。

　　

【正文】 D521 中檢 PB C級 編號 1 同“靜態(tài)” 2 2 1/5 1/5 D081 負壓稱量室 A 級送風 編號 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D101 負壓稱量室 編號 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D131 FFU 編號 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 D141 FFU 編號 2 同“靜態(tài)” 2 3 1/5 1/5 B、質量控制取樣室： 測試區(qū)域 潔凈 級別 房間面積 （ m2） 采樣點布置 采樣點 數(shù)目 最少采樣次數(shù) (每點 /總 ) 最小 采樣量 /次 L 門牌號 房間 靜 動 靜 動 靜 動 靜 動 G21 緩沖室 C 編號 1 +取樣間門口 2 3 1/5 1/5 G22 取樣室 C 編號 取樣位置附近 4 4 1/5 1/5 G23 手消毒室 C 編號 1 +手消毒附近 2 3 1/5 1/5 G24 更潔服室 C 編號 1 +潔凈服附近 2 3 1/5 1/5 G25 更外衣室 D 編號 1 +水池附近 2 3 1/5 1/5 G221 凈化 工作臺 A 編號 1 同“靜 態(tài)” 2 2 1/5 1/5 1000 記錄 **********有 限公司 第 30 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 見附件 5：“ 潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄 ” 沉降菌 目的 為確保 生產 潔凈區(qū) 及實驗室取樣潔凈區(qū) 沉降菌的監(jiān)測項目 符合法規(guī) 及操作 環(huán)境 的要求。 程序 【器具及裝置】 高壓蒸汽滅菌鍋、干熱滅菌器、塑料筐、取樣袋（塑料袋）、φ 90mm15mm 規(guī)格的培養(yǎng)皿。 培養(yǎng)基： 大豆胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（ TSA） 恒溫培養(yǎng)箱：必須在校驗期內。 【測試步驟】 (1)測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒。 培養(yǎng)皿拿入凈化房間的流程： 自凈傳遞窗內脫去外包裝→培養(yǎng)皿內包裝表面用 75%酒精擦拭→自凈至少 12 分鐘→潔凈區(qū)。 (2)采樣者應 穿戴與被測潔凈區(qū)域相應的工作服，在打開培養(yǎng)皿前，雙手用消毒液消毒或戴無菌手套操作。 (3)將已制備好的培養(yǎng)皿按 “懸浮粒子采樣點 布置圖 ” 逐一放置，然后從里到外逐個打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。 (4)靜態(tài)測試時，培養(yǎng)皿暴露時間為 30min 以上； **********有 限公司 第 31 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 動態(tài)測試時，單個沉降碟的暴露時間可以少于 4h，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。 (5)全部采集結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (6)在 20℃～ 25℃培養(yǎng)，時間不少于 3d,后在 30℃～ 35℃培養(yǎng) 2d。 (7)每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢 驗培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定 3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 【菌落計數(shù)】 (1)用肉眼對培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計數(shù)，標記或在菌落計數(shù)器上點計 ，然后用 5～ 10 倍放大鏡檢查，有否遺漏。 (2)若平皿上有 2 個或 2 個以上的菌落重疊，可分辨時仍以 2 個或 2 個以上菌落計數(shù)。 【注意事項】 (1)測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。 (2)采取一切措施防止認為對樣本的污染。 (3)對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細的記錄。 (4)由于細菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察不要漏計培 養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。 (5)采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現(xiàn)變質，破損或污染的應剔除。 【 測試規(guī)則】 **********有 限公司 第 32 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 (1)測試條件： 在測試之前，要對潔凈室（區(qū)）相關參數(shù)進行預先測試，這類測試將會提供測試沉降菌的環(huán)境條件。例如：這種預先測試或可包括： a 溫度和相對濕度的測試。潔凈室（區(qū)）的溫度和相對濕度應與其生產及工藝要求相適應（無特殊要求時，溫度在 18℃～ 26℃、相對濕度：45％～ 65％為宜），同時應滿足測試儀器的使用范圍。 b 室內送風量或風速的測試，或壓 差的測試； c 高效過濾器的泄漏測試。 (2)測試狀態(tài) 靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進行測試； 靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于 2 人。 沉降菌測試前，需要預先消毒。 (3)測試時間 A、靜態(tài)測試時， C、 D 級潔凈室（區(qū)），測試在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間 30min 后開始。 B、動態(tài)測試時，則須記錄生產開始的時間及測試時間。 【 沉降菌菌落數(shù)計算】 (1)采樣點數(shù)量及其布置 最少采樣點數(shù)目：參照懸浮粒子采樣點數(shù)目。 采樣點位置：參照 “懸浮粒子采樣點數(shù)目布置圖”位置。 a 工作區(qū)采樣點位置離地 ～ 左右。 **********有 限公司 第 33 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 b 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點 。 (2) 靜態(tài)最少培養(yǎng)皿數(shù) 在滿足最少采樣點數(shù)目同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)： 見表 1 最少培養(yǎng)皿數(shù) 潔凈度級別 最少培養(yǎng)皿數(shù)（φ 90mm） A 14 C 2 (3)采樣次數(shù) 每個采樣點一般采樣一次 (4)采樣注意事項 a 采樣口宜向上。 b 布置采樣點時，至少應盡量避開塵粒較集中的回風口。 c 采樣時，測試人員應在采樣口的下風側，并盡量少走動。 d 應采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。 e 培養(yǎng)皿在用于檢測時，為避免培養(yǎng)皿運輸或搬動過程造成的 影響，宜同時進行對照試驗，每次或每個區(qū)域取 1 個對照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，結果應無菌落生長。 【結果計算】 (1)用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 (2)每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)的計算，見式（ 1） **********有 限公司 第 34 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 M= ?????（ 1） 式中： M—— 平均菌落數(shù) M1—— 1 號培養(yǎng)皿菌落數(shù) M2—— 2 號培養(yǎng)皿菌落數(shù) Mn—— n 號培養(yǎng)皿菌落數(shù) n —— 培養(yǎng)皿總數(shù) 【結果評定】 靜態(tài) a 每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評定標準中的界限。 b 在靜態(tài)測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數(shù)超過評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判定為符合。 動態(tài)： 每個測點的沉降菌平均菌落數(shù)必須低于所選定評定標準中的界限。 可接受標準 凈化級別 A 級 C 級 D 級 平均菌落數(shù) ?1CFU/4 小時 ?50CFU/4 小時 ?100CFU/4 小時 備注： 單個沉降碟的暴露時間可以少于 4 小時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。 A 級 （ 包括 A 級送風） 區(qū)應滿足最少 14 個平皿的數(shù)量要求 ； M1+M2+?? Mn n **********有 限公司 第 35 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 記錄 見附件 6：“ 潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄 ” 浮游菌 目的 為確保 生產 潔凈區(qū) 及實驗室取樣潔凈區(qū) 浮游菌的監(jiān)測項目 符合法規(guī) 及操作環(huán)境 的要求。 程序 【器具及裝置】 浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器 培養(yǎng)基： 大豆胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基（ TSA） 恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對恒溫培養(yǎng)箱進行校驗 高壓蒸汽滅菌器 【測試要點】 (1) 必須按照測試儀器檢定周期，定期對儀器作檢定，使用檢驗合格，且在使用有效期內的儀器。 (2) 全部采集結束后，將培養(yǎng) 皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (3) 在 20℃～ 25℃培養(yǎng)，時間不少于 3d,后在 30℃～ 35℃培養(yǎng) 2d。 (4) 每批培養(yǎng)基應有對照試驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定 3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。 【測試狀態(tài)】 **********有 限公司 第 36 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 靜態(tài)和動態(tài)兩種狀態(tài)均可進行測試。 靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于 2 人。 浮游菌測試前，被測潔凈室（區(qū)）需要預先消毒。 測試報告中應標明測試時所采用的狀態(tài)和室內測試人員數(shù)。 【測試時間】 (1)靜態(tài)測試時，對 A 級送風（區(qū)）而言，測試應在凈化空氣調節(jié)系統(tǒng)正常運行時間不少于 10min 后開始。 (2)動態(tài)測 試時，須記錄生產開始的時間以及測試時間。 【浮游菌濃度計算】 (1)采樣點數(shù)量及其布置 最少采樣點數(shù)目及位置：參照懸浮粒子采樣點數(shù)目。 a 工作區(qū)采樣點位置離地 ～ 左右。 b 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點。 (2)最少采樣量 浮游菌每次最小采樣量見下表。 表 1 最小采樣量 潔凈度級別 采樣量（ L/次） A 1000 C 500 (3)采樣次數(shù) 每個采樣點一般采樣一次。 **********有 限公司 第 37 頁 共 59 頁 血袋車間及取樣間 空調凈化系統(tǒng)性能確認 方案 方案編號： PSVDHVACPQP1501 版本號 :012020 (4)采樣注意事項 a 對于單相流潔凈室（區(qū)）或送風口，采樣器采樣口應正對氣流方向。 b 采樣時，測試人員應 在采樣口的下風側，并盡量少走動。 c 應采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對樣本的污染。 d 培養(yǎng)皿在用于檢測時，為避免培養(yǎng)皿運輸或搬動過程造成的影響，宜同時進行對照試驗，每次或每個區(qū)域取 1 個對照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，結果應無菌落生長。 【結果計算】 (1)用計數(shù)方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。 (2)每個測點的沉降