玉米淀粉雙酶法制取葡萄糖的工藝研究綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告畢業(yè)論文-資料下載頁(yè)
2025-06-24 18:09本頁(yè)面
【正文】 內(nèi)有同學(xué)提議使用DNS比色的方法，實(shí)驗(yàn)同樣可以測(cè)得還原糖的含量，而且在操作上更為可行而且簡(jiǎn)便，于是我們便事先嘗試了DNS比色法的可行性。實(shí)驗(yàn)的操作步驟是先用一定濃度梯度的葡萄糖溶液繪制DNS比色的標(biāo)準(zhǔn)曲線，而后用已知濃度的葡萄糖進(jìn)行DNS比色，分析數(shù)據(jù)的偏差，從而判斷實(shí)驗(yàn)方案的精確度。通過(guò)實(shí)驗(yàn)的比較，可以得出在葡萄糖溶液的比對(duì)上，DNS比色的實(shí)驗(yàn)方案數(shù)據(jù)較為可信。但是，在將這個(gè)方案應(yīng)用與實(shí)驗(yàn)樣品的時(shí)候，便遇到了困難。在文獻(xiàn)推薦的操作條件下，我組的DNS比色法測(cè)得的DE值數(shù)值非常小，這不禁使我懷疑這種方法在處理樣品時(shí)存在原理上的問(wèn)題。首先，實(shí)驗(yàn)處理得到的樣品為偏黃色的膠體，在DNS處理后，溶液渾濁。根據(jù)朗伯比爾（LambertBeer）定律：當(dāng)一束平行單色光通過(guò)均勻的非散射樣品時(shí)，樣品對(duì)光的吸光度與樣品的濃度及厚度成正比。試驗(yàn)樣品本身不符合均勻非散射的前提，分光光度法已不適用。其次，實(shí)驗(yàn)樣品中有許多還原端成分并不是以還原糖的形式存在，DNS比色分析的方法也不再適合。在DNS比色法的嘗試受挫之后，我組只能接受傳統(tǒng)經(jīng)典的費(fèi)林滴定。滴定的步驟由我操作?？梢哉f(shuō)，費(fèi)林滴定是我接觸到現(xiàn)在最難的一個(gè)滴定。首先，滴定在沸騰的溶液上進(jìn)行，高溫的蒸汽要求操作人員盡快進(jìn)行操作，否則會(huì)有燙傷之虞。其次，實(shí)驗(yàn)對(duì)各個(gè)時(shí)間段的把握十分嚴(yán)格。在費(fèi)林混合溶液預(yù)加樣品之后，要求在2min177。15s內(nèi)沸騰，沸騰兩分鐘后需馬上加入亞甲基藍(lán)指示劑，進(jìn)行滴定，滴定時(shí)間控制在1min內(nèi)，以避免空氣影響。這樣嚴(yán)格的規(guī)定要求操作人員對(duì)實(shí)驗(yàn)十分熟練，而且對(duì)電爐火候把握十分精準(zhǔn)，這無(wú)疑需要很多次的嘗試。最繁瑣的問(wèn)題是必須對(duì)樣品進(jìn)行稀釋度的預(yù)估。出于實(shí)驗(yàn)精確度的考慮，必須使樣品滴定的體積控制在1520mL的范圍內(nèi)，因此，需要對(duì)樣品以不同倍數(shù)稀釋反覆測(cè)定其滴定體積以確定最佳的稀釋度。滴定終點(diǎn)的判斷也需要比較敏銳的感官與直覺(jué)。經(jīng)過(guò)多次的實(shí)踐，我現(xiàn)在已經(jīng)基本掌握了費(fèi)林滴定的操作要領(lǐng)，也有了一些個(gè)人的切身體會(huì)。第一，盡量不要使滴定管一直處于三角瓶正上方，只在滴定時(shí)從蝴蝶夾上取下，用手移過(guò)去。這樣可以避免由于蒸汽在滴定管壁的傳熱引起溶液體積的改變以及塞子膨脹導(dǎo)致無(wú)法順暢轉(zhuǎn)動(dòng)。第二，隔夜的滴定管應(yīng)重新涂抹凡士林。不論怎樣的避免，塞子的膨脹都是在所難免的，涂抹凡士林可以有效地防止在滴定過(guò)程中塞子不能旋轉(zhuǎn)的問(wèn)題。第三，實(shí)驗(yàn)樣品中含有淀粉成分，在煮沸時(shí)容易產(chǎn)生液泡，液泡不及時(shí)的破裂將導(dǎo)致錐形瓶?jī)?nèi)充滿泡沫甚至溢出。這時(shí)除了要調(diào)整好火候之外，還可以在錐形瓶口豎直架設(shè)一把鑷子，可有效使泡沫破裂。第四，沸石數(shù)量的合理增加也可以避免以上情況的發(fā)生。在以前老師的授課內(nèi)容中，曾經(jīng)有談到結(jié)晶是一個(gè)十分難以把握的環(huán)節(jié)。于是我很擔(dān)心我組在結(jié)晶這個(gè)環(huán)節(jié)可能得不到理想的結(jié)果。組內(nèi)的同學(xué)也表示出同樣的擔(dān)心。于是我們研討出先用葡萄糖溶液模擬，而后再對(duì)樣品實(shí)施操作的方法。在初期的討論階段，我們一共提出了3種結(jié)晶方案。一是采用在過(guò)飽和溶液中添加葡萄糖晶種的方法，二是將葡萄糖與氯化鈉共結(jié)晶，三是階段降溫。在比對(duì)了各個(gè)方案之后，我們一致認(rèn)為采用階段降溫可以較好地實(shí)現(xiàn)晶體的析出，而不致使溶液太少。因此在正式實(shí)驗(yàn)中我們采取的便是階段降溫的方法。在實(shí)驗(yàn)中，我也經(jīng)由一次次的失敗，對(duì)實(shí)驗(yàn)的各個(gè)環(huán)節(jié)加深了理解。在一次失敗中，我組得到的淀粉液化漿液在滅活后底部出現(xiàn)了白色片狀沉淀。經(jīng)過(guò)反復(fù)核查，發(fā)現(xiàn)是調(diào)漿時(shí)未加入CaCl2。查閱文獻(xiàn)，CaCl2對(duì)酶有保護(hù)作用，從而使液化過(guò)程充分。便是在這樣的過(guò)程中，我更好地理解了實(shí)驗(yàn)中各個(gè)試劑與步驟的作用，鞏固了專(zhuān)業(yè)知識(shí)。雖然最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并不十分令人滿意，但我著實(shí)從中學(xué)到了許多課本之外更有價(jià)值的知識(shí)。感謝朱老師在實(shí)驗(yàn)中給予我們的指導(dǎo)，也感謝組內(nèi)一起合作的同學(xué)！參考文獻(xiàn)： 淀粉水解產(chǎn)品 還原力和葡萄糖當(dāng)量測(cè)定(GB/T :1981)，中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，200810； 張劍幸 田輝 周婷 王麗 張開(kāi)誠(chéng),Ca2+對(duì)雙酶法水解玉米淀粉的影響,中國(guó)釀造，2008年11期； 李平凡 邱玉美 吳海峰，雙酶法生產(chǎn)葡萄糖工藝優(yōu)化研究，現(xiàn)代食品科技，2008年24期； 張劍 易華鋒 張開(kāi)誠(chéng) 林庭龍，雙酶法水解玉米淀粉的工藝研究，釀酒科技，2009年3卷； 權(quán)伍榮 張健 李森，結(jié)晶葡萄糖的生產(chǎn)工藝、用途及其發(fā)展前景，延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)報(bào)，2004年26卷4期； 孫鵬，玉米制取葡萄糖的酶法工藝研究，現(xiàn)代食品科技，2006年22期。
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