玉米淀粉雙酶法制取葡萄糖的工藝研究綜合實驗報告畢業(yè)論文-資料下載頁
2025-06-24 18:09本頁面
【正文】 內(nèi)有同學提議使用DNS比色的方法，實驗同樣可以測得還原糖的含量，而且在操作上更為可行而且簡便，于是我們便事先嘗試了DNS比色法的可行性。實驗的操作步驟是先用一定濃度梯度的葡萄糖溶液繪制DNS比色的標準曲線，而后用已知濃度的葡萄糖進行DNS比色，分析數(shù)據(jù)的偏差，從而判斷實驗方案的精確度。通過實驗的比較，可以得出在葡萄糖溶液的比對上，DNS比色的實驗方案數(shù)據(jù)較為可信。但是，在將這個方案應(yīng)用與實驗樣品的時候，便遇到了困難。在文獻推薦的操作條件下，我組的DNS比色法測得的DE值數(shù)值非常小，這不禁使我懷疑這種方法在處理樣品時存在原理上的問題。首先，實驗處理得到的樣品為偏黃色的膠體，在DNS處理后，溶液渾濁。根據(jù)朗伯比爾（LambertBeer）定律：當一束平行單色光通過均勻的非散射樣品時，樣品對光的吸光度與樣品的濃度及厚度成正比。試驗樣品本身不符合均勻非散射的前提，分光光度法已不適用。其次，實驗樣品中有許多還原端成分并不是以還原糖的形式存在，DNS比色分析的方法也不再適合。在DNS比色法的嘗試受挫之后，我組只能接受傳統(tǒng)經(jīng)典的費林滴定。滴定的步驟由我操作。可以說，費林滴定是我接觸到現(xiàn)在最難的一個滴定。首先，滴定在沸騰的溶液上進行，高溫的蒸汽要求操作人員盡快進行操作，否則會有燙傷之虞。其次，實驗對各個時間段的把握十分嚴格。在費林混合溶液預(yù)加樣品之后，要求在2min177。15s內(nèi)沸騰，沸騰兩分鐘后需馬上加入亞甲基藍指示劑，進行滴定，滴定時間控制在1min內(nèi)，以避免空氣影響。這樣嚴格的規(guī)定要求操作人員對實驗十分熟練，而且對電爐火候把握十分精準，這無疑需要很多次的嘗試。最繁瑣的問題是必須對樣品進行稀釋度的預(yù)估。出于實驗精確度的考慮，必須使樣品滴定的體積控制在1520mL的范圍內(nèi)，因此，需要對樣品以不同倍數(shù)稀釋反覆測定其滴定體積以確定最佳的稀釋度。滴定終點的判斷也需要比較敏銳的感官與直覺。經(jīng)過多次的實踐，我現(xiàn)在已經(jīng)基本掌握了費林滴定的操作要領(lǐng)，也有了一些個人的切身體會。第一，盡量不要使滴定管一直處于三角瓶正上方，只在滴定時從蝴蝶夾上取下，用手移過去。這樣可以避免由于蒸汽在滴定管壁的傳熱引起溶液體積的改變以及塞子膨脹導(dǎo)致無法順暢轉(zhuǎn)動。第二，隔夜的滴定管應(yīng)重新涂抹凡士林。不論怎樣的避免，塞子的膨脹都是在所難免的，涂抹凡士林可以有效地防止在滴定過程中塞子不能旋轉(zhuǎn)的問題。第三，實驗樣品中含有淀粉成分，在煮沸時容易產(chǎn)生液泡，液泡不及時的破裂將導(dǎo)致錐形瓶內(nèi)充滿泡沫甚至溢出。這時除了要調(diào)整好火候之外，還可以在錐形瓶口豎直架設(shè)一把鑷子，可有效使泡沫破裂。第四，沸石數(shù)量的合理增加也可以避免以上情況的發(fā)生。在以前老師的授課內(nèi)容中，曾經(jīng)有談到結(jié)晶是一個十分難以把握的環(huán)節(jié)。于是我很擔心我組在結(jié)晶這個環(huán)節(jié)可能得不到理想的結(jié)果。組內(nèi)的同學也表示出同樣的擔心。于是我們研討出先用葡萄糖溶液模擬，而后再對樣品實施操作的方法。在初期的討論階段，我們一共提出了3種結(jié)晶方案。一是采用在過飽和溶液中添加葡萄糖晶種的方法，二是將葡萄糖與氯化鈉共結(jié)晶，三是階段降溫。在比對了各個方案之后，我們一致認為采用階段降溫可以較好地實現(xiàn)晶體的析出，而不致使溶液太少。因此在正式實驗中我們采取的便是階段降溫的方法。在實驗中，我也經(jīng)由一次次的失敗，對實驗的各個環(huán)節(jié)加深了理解。在一次失敗中，我組得到的淀粉液化漿液在滅活后底部出現(xiàn)了白色片狀沉淀。經(jīng)過反復(fù)核查，發(fā)現(xiàn)是調(diào)漿時未加入CaCl2。查閱文獻，CaCl2對酶有保護作用，從而使液化過程充分。便是在這樣的過程中，我更好地理解了實驗中各個試劑與步驟的作用，鞏固了專業(yè)知識。雖然最后的實驗結(jié)果并不十分令人滿意，但我著實從中學到了許多課本之外更有價值的知識。感謝朱老師在實驗中給予我們的指導(dǎo)，也感謝組內(nèi)一起合作的同學！參考文獻： 淀粉水解產(chǎn)品 還原力和葡萄糖當量測定(GB/T :1981)，中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局，200810； 張劍幸 田輝 周婷 王麗 張開誠,Ca2+對雙酶法水解玉米淀粉的影響,中國釀造，2008年11期； 李平凡 邱玉美 吳海峰，雙酶法生產(chǎn)葡萄糖工藝優(yōu)化研究，現(xiàn)代食品科技，2008年24期； 張劍 易華鋒 張開誠 林庭龍，雙酶法水解玉米淀粉的工藝研究，釀酒科技，2009年3卷； 權(quán)伍榮 張健 李森，結(jié)晶葡萄糖的生產(chǎn)工藝、用途及其發(fā)展前景，延邊大學農(nóng)學報，2004年26卷4期； 孫鵬，玉米制取葡萄糖的酶法工藝研究，現(xiàn)代食品科技，2006年22期。
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