【正文】 癌使腫瘤細胞凋亡率顯著增加，而正常細胞不受影響。比傳統(tǒng)的ONYX015或AdIL24治療有更好的療效，ZD55載體介導的IL24顯示出更強的抗腫瘤效應。J ALyons等[4]將VEGFR2基因利用塞姆利基森林病毒為載體轉(zhuǎn)染入CT26大腸癌細胞，體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)接種轉(zhuǎn)染細胞的裸鼠腫瘤血管密度顯著降低，腫瘤增長緩慢，其機制可能是轉(zhuǎn)染大腸癌細胞分泌的VEGFR2競爭抑制了VEGF與血管內(nèi)皮細胞的VEGFR結(jié)合。由此可見細胞因子基因治療大腸癌具有較好的療效，并且具有一定的靶向作用，毒副作用小等優(yōu)點，也可以為術后輔助治療提供更好的方法，顯示其優(yōu)越的臨床價值。 癌基因和抑癌基因的治療：癌基因是人體細胞固有的基因，其表達的產(chǎn)物為生理狀態(tài)下正常細胞增殖分化所必需的，在一定的條件下被激活，呈現(xiàn)在時間和空間上的差異表達，可導致細胞增殖分化過程失衡而引起細胞惡變，針對癌基因的過度活化可用反義寡核苷酸和（或）核酶抑制癌基因。Durai 等[5]將胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4（IGFBP4）導入大腸癌HT29荷瘤模型內(nèi)，IGFBP4治療組較對照組，Bax表達增加，Bcl2 表達下降，腫瘤細胞凋亡增加，血管密度降低，有效的抑制了裸鼠移植瘤的生長。Ras基因在大腸癌中約有50%的突變率，所以選擇性針對Ras基因突變的腫瘤治療有一定價值。Dvory等[6]構(gòu)建了三組Ras突變型的結(jié)腸癌模型，分別是R1，SW480和HCT116。然后將攜帶Bax,caspase8和PKG的基因?qū)氲缴鲜瞿[瘤細胞內(nèi)，有效地抑制了腫瘤的形成。選擇性的過表達前凋亡基因?qū)as基因突變的結(jié)腸癌有很好的抑制作用，而正常組織的細胞生長不受影響。因此，這種基因療法對Ras 突變的大腸癌臨床治療有一定的指導意義。Lledo S等[7]應用反義核算技術將antikras 和antitelomerase 寡核苷酸注入結(jié)腸癌細胞SW480內(nèi)，有效地抑制了腫瘤細胞的增殖，其抑制效果取決于寡核苷酸的類型，劑量和作用時間，在劑量為20mM作用48小時后，%。反義Kras 和端粒酶的結(jié)合協(xié)同增強了腫瘤的抑制效應，為臨床治療提供了一定的實驗依據(jù)。抑癌基因又叫隱性癌基因、抗癌基因、腫瘤易感基因。這類基因在控制細胞生長、增殖及分化過程中起著十分重要的負調(diào)節(jié)作用，并潛在抑制腫瘤生長。如果功能缺失、突變等異?？蓪е聬盒赞D(zhuǎn)化而發(fā)生腫瘤。因此我們可以通過恢復抑癌基因的功能來抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，一般將具有正常功能的野生型的抑癌基因（P5P1Rb等）利用各種途徑轉(zhuǎn)染至腫瘤細胞內(nèi)，重建失活得癌基因的功能，從而達到抑制腫瘤的細胞異常生長的目的。P53的突變可見于50%的結(jié)腸癌患者。因此改善P53的功能對結(jié)腸癌的治療顯得尤為重要。Rayburn等[8]發(fā)現(xiàn)TLR9（tolllike receptor 9）激動劑可促進結(jié)腸癌細胞的凋亡，提高癌細胞對放，化療的敏感性，這與其改善P53的功能相關，TLR9可作為未來結(jié)腸癌臨床治療的候選藥物。Aizu 等[9]發(fā)現(xiàn)p53的負性調(diào)節(jié)因子Mdm2的抑制劑Nutlin3可激活野生型的p53的表達，進而誘導了凋亡基因Bax和PERP的表達，促進了G2/M期阻滯，抑制腫瘤生長。Nutlin3 為臨床無P53突變的結(jié)腸癌的治療提供了一定的實驗依據(jù)。 自殺基因治療：：一些病毒或細菌的基因產(chǎn)物可將無毒或極低毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為毒性產(chǎn)物，導致細胞死亡，這類基因被稱為自殺基因。其治療原理將自殺基因?qū)肽骋患毎磉_并生成特定酶類，轉(zhuǎn)化無毒或極低毒藥物前體為毒性產(chǎn)物，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。WolfgangWalther[10]等在大腸癌細胞的裸鼠荷瘤模型（CoLo5734和SW480）體內(nèi)注射CD自殺基因，在治療五天后，瘤體內(nèi)注射自殺基因組較對照組腫瘤增長顯著降低，裸鼠體內(nèi)CD自殺基因mRNA和蛋白水平顯著升高，CD自殺基因快速注射有效抑制腫瘤生長，增強抗腫瘤效應。Hiraoka等 [11]報道攜帶CD自殺基因的RCR載體門脈注射大腸癌細胞CT26肝轉(zhuǎn)移荷瘤模型中，腫瘤細胞RCR表達量升高，腫瘤生長受到抑制。Li等[12]報道CD自殺基因偶聯(lián)放療能夠協(xié)同增強抗腫瘤療效，在大腸癌細胞株（HR8348）的荷瘤模型中，%，對局部復發(fā)性結(jié)腸癌有一定療效。由此可見CD自殺基因是一種有效的抗腫瘤自殺基因，為自殺基因治療治療大腸癌提供了理論依據(jù)，為臨床治療大腸癌提供了較好的方法。 抗腫瘤血管生成形成基因治療：1971年Folkman提出了腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移是血管依賴型的，阻滯血管生成是遏制腫瘤生長的有效策略這一學說?，F(xiàn)已針對腫瘤血管形成的分子機制所設計了各種抗血管生成治療策略，并已成為目前腫瘤治療的熱點領域。腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移有賴于血管點的形成，腫瘤的血管的形成取決于促血管生成分子和抗血管分子二者之間的平衡。促血管生成因子是腫瘤血管形成所必需的，其中最重要的血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），大腸癌患者中的VEGF表達水平與腫瘤病理分期及患者的預后密切相關。Yu HK等[13]將抗血管分子LK68導入大腸癌細胞CT26建立裸鼠皮下荷瘤模型，實驗發(fā)現(xiàn)較對照組，表達LK68的CT26細胞能夠顯著抑制腫瘤生長，微血管密度降低，腫瘤細胞凋亡增加，抑制癌細胞的腹腔播散，但對其增殖并沒有影響，其體內(nèi)抑制腫瘤生長的作用與其抑制血管生成相關，LK68基因在體內(nèi)可成功抑制結(jié)腸癌細胞增長和腫瘤的腹腔轉(zhuǎn)移，對結(jié)腸癌的臨床治療提供了一定實驗依據(jù)。Mikhail等[14]研究也得到了相似的結(jié)論，他采用基因重組技術阻滯了血管內(nèi)皮特意性受體Tie2作用后，發(fā)現(xiàn)接種大腸癌細胞SW1222的裸鼠腫瘤增長緩慢，其微血管密度較對照組降低了87%，腫瘤轉(zhuǎn)移率也大大降低，因此抗血管治療在腫瘤基因治療中具有良好的應用前景。 多藥耐藥基因治療大腸癌：多藥耐藥(MDR)是指腫瘤細胞接觸一種抗癌藥物產(chǎn)生耐藥同時也對其結(jié)構(gòu)和作用機制不同的藥物獲得耐藥。Walther等[15]發(fā)現(xiàn)采用熱激療法可使人多藥耐藥基因（MDR1）啟動子活性升高，進而刺激了腫瘤壞死因子（TNFα）的表達，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染mdrphTNF 的結(jié)腸癌細胞HCT116快速注射結(jié)腸癌荷瘤模型，在熱誘導下，聯(lián)合阿霉素（8mg/kg）的治療方案可顯著抑制移植瘤的生長，提高了阿霉素治療的敏感性，為臨床治療結(jié)腸癌提供新的思路。Chen[16]等應用反義多藥耐藥基因RNA聯(lián)合奧沙利鉑，5FU治療耐藥結(jié)腸癌細胞(8348R)，發(fā)現(xiàn)反義核酸和化療藥具有協(xié)同效應，反義核酸治療組腫瘤細胞的凋亡率較對照組顯著升高，達到75%，因此提高了耐藥癌細胞對化療的敏感性。Saikawa等[17]發(fā)現(xiàn)環(huán)氧化酶2（Cox2）的過表達可降低結(jié)腸癌細胞HCT15對順鉑的敏感性，,其機制可能是與Cox2的過表達誘導了多藥耐藥相關蛋白（MRPs）相關。應用Cox2的抑制劑JTE522 可恢復HCT15對順鉑的敏感性，因此靶向環(huán)氧化酶的治療為臨床腫瘤耐藥治療開辟一種新的思路。 大腸癌基因治療存在的問題和未來前景 存在的問題：基因治療的理論提出的近三十年內(nèi)，大腸癌的基因治療已有大量的深入研究，并已在臨床取得一定的療效，但要真正達到大規(guī)模運用于臨床治療，還需要解決一些問題。其主要的問題：，如對導入基因的控制問題，外緣基因以及基因載體的本身整合到宿主染色體帶來的一系列的問題等。、高效性、靶向性、大容量性和可控性等特點，目前還難以找到可以運用到理想的臨床要求載體。，所以單獨基因療效差，所以需進一步深入大腸癌的發(fā)病機制研究和聯(lián)合基因治療探索。 未來前景：雖然大腸癌基因治療還存在一些問題沒有解決，但隨著大腸癌發(fā)病機制的繼續(xù)深入研究，分子生物學、病毒學、組織細胞學等相關科學發(fā)展，將會很好的解決了大腸癌基因治療運用于臨床的障礙。相信在不遠的將來，大腸癌基因治療將會成為大腸癌治療的一種重要的常規(guī)的治療手段。 參考文獻： 致謝本課題是在我導師趙任副教授的精心策劃和總體負責下，歷時一年多時間順利完成的。趙老師在工作學習和日常生活中給予我的悉心教誨和真切勉力，使我倍受感動，并對我的科研和臨床工作產(chǎn)生深遠的影響，乃至為我今后的人生道路打下堅實的基礎。在論文完成之際，謹此向?qū)煴硎居芍缘母兄x。此課題的順利的完成離不開上海交通大學醫(yī)學院生化教研室錢關祥教授的統(tǒng)籌協(xié)調(diào)。此外，程砜、王克敏老師的悉心指導和大力支持，使我得以短期內(nèi)掌握了課題相關實驗技術，確保了課題如期完成。試驗期間還可到了生化實驗室張建軍博士、王麗博士等研究生的無私幫助，在此一并感謝。感謝瑞金醫(yī)院外科四病區(qū)全體醫(yī)護人員對我的臨床工作的指導和無私的幫助。最后，由衷感謝我父母和家人，多年來他們無私地給予我的理解和支持，激勵我順利完成學業(yè)，并給予我在工作中繼續(xù)研究和探索的動力。發(fā)表論文情況大腸癌基因治療的現(xiàn)狀及展望，外科理論與實踐，第一作者，已錄用。