【正文】
落→RNA pol開始Z、Y、A基因的轉(zhuǎn)錄,表達(dá)→乳糖被利用(3分) Please write out the enzymes and proteins required in prokaryotic DNA replication,and explain their functions.(7 points)拓?fù)洚悩?gòu)酶:消除DNA超螺旋產(chǎn)生的阻力;(1分)解鏈酶:解開DNA雙鏈,產(chǎn)生單鏈DNA;(1分)SSB:保護(hù)解開的DNA單鏈,避免復(fù)性;(1分)引物酶:合成RNA引物,為DNA聚合酶提供3’末端;(1分)DNA聚合酶III:延長(zhǎng)DNA片段,是真正起復(fù)制作用的酶;(1分)DNA聚合酶I:負(fù)責(zé)切除引物并填補(bǔ)引物所在的缺口;(1分)DNA連接酶:連接岡崎片段。(1分)What are the characters of expression vectors?(5 points)(1)能夠進(jìn)行獨(dú)立于基因組的自我復(fù)制 (1分)(2)容易從細(xì)胞中分離提取 (1分)(3)含有多克隆位點(diǎn),允許外源片段的插入 (1分)(4)含有至少一個(gè)選擇標(biāo)記 (1分)(5)具有啟動(dòng)子、終止子等表達(dá)元件 (1分)Please illuminate the function of the cap structure of mature mRNA in 5’emd.(5 points) (1) 對(duì)5’外切核酸酶形成屏障,保護(hù)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(2分) (2) 有助于前體mRNA的剪接和轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)(2分) (3) 提高翻譯的效率(1分)Please illuminate the difference between the initial tRNA molecule and the tRNAMet in elongation in . (5 points)(1)只有起始tRNA分子的蛋氨酸甲酰化,非甲?;膄mettRNA也能起始,但效率不高,因?yàn)榧柞;桥ctRNA分子結(jié)合的起始因IF2的識(shí)別標(biāo)志(2分)(2)tRNA分子氨基酸接受臂末端的配對(duì)堿基在起始tRNA分子中是不配對(duì),這阻止起始tRNA參與延伸,同時(shí)這種不配對(duì)特性也是甲酰化反應(yīng)中甲?;缸R(shí)別必需的(2分)(3)反密碼子環(huán)莖連續(xù)3個(gè)GC堿基對(duì)是起始tRNA分子所特有的,也是起始tRNA分子插入核糖體P位點(diǎn)必需的(1分)Please illuminate the difference between the genome library and cDNA library.(7 points)DNA文庫(kù):將某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段,并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合,即基因組文庫(kù),它包含了該生物的所有基因。(2分)cDNA文庫(kù):以mRNA為模板,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶催化,在體外反轉(zhuǎn)錄成cDNA,與適當(dāng)?shù)妮d體(常用噬菌體或質(zhì)粒載體)連接后轉(zhuǎn)化受體菌,則每個(gè)細(xì)菌含有一段cDNA,并能繁殖擴(kuò)增,這樣包含著細(xì)胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細(xì)胞的cDNA文庫(kù)。(2分)基因組含有的基因在特定的組織細(xì)胞中只有一部分表達(dá),而且處在不同環(huán)境條件、不同分化時(shí)期的細(xì)胞其基因表達(dá)的種類和強(qiáng)度也不盡相同,所以cDNA文庫(kù)具有組織細(xì)胞特異性。cDNA文庫(kù)顯然比基因組DNA文庫(kù)小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細(xì)胞特異表達(dá)的基因。但對(duì)真核細(xì)胞來說,從基因組DNA文庫(kù)獲得的基因與從cDNA文庫(kù)獲得的不同,基因組DNA文庫(kù)所含的是帶有內(nèi)含子和外顯子的基因組基因,而從cDNA文庫(kù)中獲得的是已經(jīng)過剪接、去除了內(nèi)含子的cDNA。(3分)8 / 8