牛欄山酒廠清香大曲及酒醅中地衣芽孢桿菌的分離鑒定-資料下載頁
2025-06-20 00:57本頁面
【正文】 透明的，說明水解酪素的能力最強(qiáng)。其余菌株對(duì)酪素水解能力各不相同。 在明膠液化實(shí)驗(yàn)中，1＃、2＃、3＃、4＃、7＃、8＃、9＃、11＃、12＃、16＃、17＃菌株液化明膠的能力最強(qiáng)，接種7d后就將明膠全部液化。說明這些菌株產(chǎn)生的類蛋白酶類豐富，使明膠水解迅速。在所有菌株中，6＃、19＃對(duì)明膠的液化能力最弱。 地衣芽孢桿菌是醬香大曲中的重要微生物，能夠產(chǎn)生醬香物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)的23個(gè)菌株均是從清香大曲和酒醅中分離得到的，因此我們對(duì)其是否產(chǎn)醬香進(jìn)行確認(rèn)。通過兩種液體培養(yǎng)基（甘氨酸培養(yǎng)基和營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基）和麩皮固體培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)，我們發(fā)現(xiàn)這些菌株雖然能夠產(chǎn)生醬香物質(zhì)，但醬香氣味不典型，不明顯，而且每個(gè)菌株產(chǎn)生的味道都各不相同。 對(duì)以上經(jīng)過生理生化實(shí)驗(yàn)篩選出來的地衣芽孢桿菌進(jìn)行分子鑒定。從地衣芽孢桿菌中提取16S rDNA片段，通過測(cè)序獲得16S rDNA序列信息，再與16S rDNA數(shù)據(jù)庫或其他數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比較，從而鑒定種類。本實(shí)驗(yàn)與中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院合作完成。 鑒定中用到的兩對(duì)細(xì)菌通用引物是WBAC1/WBAC2和341/534。DNA提取采用煮沸法和TIANGEN試劑公司的細(xì)菌基因組提取試劑盒兩種提取方法，DNA純化使用上海申能博彩瓊脂糖凝膠回收純化試劑盒。采用美國ABI 9700型PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增。 由上海生工生化公司測(cè)序，將測(cè)定的序列處理后提交到NCBI的Gene Bank進(jìn)行序列比對(duì)，與Bacillus licheniformis（地衣芽孢桿菌）的一致率達(dá)到100％。鑒定結(jié)果為地衣芽孢桿菌。 5. 總結(jié)與討論 ，60℃水浴30min可以排除酵母、霉菌等的干擾，而芽孢桿菌也不會(huì)死亡，所以該方法比較容易分離得到純芽孢桿菌菌株。 ，所以是否利用丙酸鹽可以作為鑒定地衣芽孢桿菌的一個(gè)重要依據(jù)，但是其他生理生化實(shí)驗(yàn)同樣是必不可少的。 在產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)中，所有菌株均產(chǎn)生過氧化氫酶，這與芽孢桿菌的性質(zhì)相符合，但是分離得到的所有芽孢桿菌均不產(chǎn)纖維素酶。產(chǎn)淀粉酶實(shí)驗(yàn)中，淀粉水解是逐步進(jìn)行的過程，與菌種產(chǎn)生淀粉酶的能力、培養(yǎng)時(shí)間，培養(yǎng)基淀粉含量和pH等均有一定關(guān)系。培養(yǎng)基必須為中性或微酸性。 地衣芽孢桿菌產(chǎn)醬香不典型，因?yàn)檫@些菌株都是從清香大曲和酒醅中分離的，所以在發(fā)酵過程中的所起的作用也各不相同，產(chǎn)醬香不典型的特征正好可 以應(yīng)用到二鍋頭酒的生產(chǎn)中，不會(huì)將酒的香型改變，而且還可以增加酒體的醇厚度。 ，結(jié)合丙酸鹽利用實(shí)驗(yàn)和一系列的生理生化實(shí)驗(yàn)可以基本鑒定地衣芽孢桿菌。本文為地衣芽孢桿菌的鑒定提供了簡便、易行的實(shí)驗(yàn)方法。 參考文獻(xiàn): ，伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè) (第八版).北京： ，蔡妙英等編著，：8 /
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