產(chǎn)枯草芽孢桿菌實(shí)訓(xùn)報告-資料下載頁
2025-06-17 18:15本頁面
【正文】 ? 滅菌后，關(guān)閉蒸汽進(jìn)氣閥，開大放氣閥，當(dāng)壓強(qiáng)下降到。使罐內(nèi)壓力保持在 右。 ? 開啟冷水閥門，對發(fā)酵罐進(jìn)行降溫。 五、接種 ? 當(dāng)罐溫降到 37攝氏度后，關(guān)閉冷水。用酒精將接種口處仔細(xì)擦洗，并放上接種火圈。 ? 減少進(jìn)氣，使罐壓保持在 ，點(diǎn)燃接種火圈。 ? 擰下進(jìn)料口螺蓋，放入酒精中 ,以免染菌。 ? 按接種瓶的瓶口在火焰上灼燒一下，并在火焰的保護(hù)下，迅速將菌種倒入發(fā)酵罐。 ? 蓋上進(jìn)料口螺蓋，熄滅火焰。并用酒精仔細(xì)清洗。 接種 在無菌環(huán)境下進(jìn)行 六、發(fā)酵 ? 發(fā)酵條件： 37攝氏度、壓強(qiáng) 、攪拌轉(zhuǎn)速 200r/min ? 取樣：取樣前用熱蒸汽將出料口處進(jìn)行滅菌 10min。 ? 發(fā)酵參數(shù)的測定 ? PH值的測定：用精確的 PH試紙測。 生長曲線：分光光度計波長 600nm測 od值（以相同稀釋倍數(shù)的培養(yǎng)基做空白）。以生長量為縱坐標(biāo)，培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)繪制生長曲線圖。 ? 淀粉酶活力的測定： ? 1)樣品液的制備： ? 發(fā)酵液離心處理： 8000rpm， 5min ? 1ml離心后的發(fā)酵液 +5ml 1%淀粉溶液與 37攝氏度水浴反應(yīng)，然后沸水浴 5min終止反應(yīng)。 ? 取上述溶液 1ml，加入 DNS試劑 2min進(jìn)行顯色，取出后用水迅速冷卻 ，加去 9ml蒸餾水，搖勻，在 540nm波長處測定吸光值。 ? 2）空白液的處理： ? 發(fā)酵液離心處理： 8000rpm， 5min ? 1ml離心后的發(fā)酵液 +5ml 1%淀粉溶液直接加熱煮沸 5min，取 1ml，加入 DNS試劑 2min進(jìn)行顯色，取出后用水迅速冷卻 ，加去 9ml蒸餾水，搖勻，在 540nm波長處測定吸光值。 七、發(fā)酵過程中參數(shù)檢測結(jié)果 時間 酶活 生長量 PH值 1 2 3 4 5 生長量 OD值012340 2 4 6培養(yǎng)時間OD值OD值012345670 2 4 6培養(yǎng)時間酶活系列1酶活 八、實(shí)訓(xùn)結(jié)果總結(jié)及分析 ? 經(jīng)指導(dǎo)老師后期提示才知實(shí)驗(yàn)過程中空白試劑成分錯誤，造成試驗(yàn)結(jié)果一定性的誤差。下次試驗(yàn)一定注意。 ? 通過本次實(shí)訓(xùn)對本專業(yè)的相關(guān)知識和操作有了更深層的理解和認(rèn)識。 九、實(shí)訓(xùn)的后期處理 ?打掃實(shí)訓(xùn)室、清理試驗(yàn)器具 ?整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、實(shí)訓(xùn)報告 ?繪制生長曲線及酶活曲線 ?進(jìn)行實(shí)訓(xùn)總結(jié)
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