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生物化學(xué)知識要點-資料下載頁

2025-06-10 01:28本頁面
  

【正文】 分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA 中發(fā)現(xiàn)的。( )7.DNA 的Tm 值和AT 含量有關(guān),AT 含量高則Tm 高。( )8.真核生物mRNA 的5`端有一個多聚A 的結(jié)構(gòu)。( )9.DNA 的Tm 值隨(A+T)/(G+C)比值的增加而減少。( )10.BDNA 代表細胞內(nèi)DNA 的基本構(gòu)象,在某些情況下,還會呈現(xiàn)A 型、Z 型和三股螺旋的局部構(gòu)象。( )11.DNA 復(fù)性(退火)一般在低于其Tm 值約20℃的溫度下進行的。( )12.用堿水解核酸時,可以得到2’和3’核苷酸的混合物。( )13.生物體內(nèi),天然存在的DNA 分子多為負超螺旋。( )14.mRNA 是細胞內(nèi)種類最多、含量最豐富的RNA。( )15.tRNA 的二級結(jié)構(gòu)中的額外環(huán)是tRNA 分類的重要指標(biāo)。( )16.對于提純的DNA 樣品,測得OD260/OD280,則說明樣品中含有RNA。( )17.基因表達的最終產(chǎn)物都是蛋白質(zhì)。( )18.兩個核酸樣品A 和B,如果A 的OD260/OD280 大于B 的OD260/OD280,那么A的純度大于B 的純度。( )19.毫無例外,從結(jié)構(gòu)基因中DNA 序列可以推出相應(yīng)的蛋白質(zhì)序列。( )20.真核生物成熟mRNA 的兩端均帶有游離的3’OH。(五)簡答題1.將核酸完全水解后可得到哪些組分?DNA 和RNA 的水解產(chǎn)物有何不同?2.計算下列各題:(1)T7 噬菌體DNA,107。計算DNA 鏈的長度(設(shè)核苷酸的平均相對分子質(zhì)量為650)。(2)相對分子質(zhì)量為130106 的病毒DNA 分子,每微米的質(zhì)量是多少?(3)編碼88 個核苷酸的tRNA 的基因有多長?(4)編碼細胞色素C(104 個氨基酸)的基因有多長(不考慮起始和終止序列)?(5) 萬的蛋白質(zhì)的mRNA,相對分子質(zhì)量為多少(設(shè)每個氨基酸的平均相對分子量為120)?3.對一雙鏈DNA 而言,若一條鏈中(A+G)/(T+C)= ,則:26(1)互補鏈中(A+G)/(T+C)= ?(2)在整個DNA 分子中(A+G)/(T+C)= ?(3)若一條鏈中(A+ T)/(G +C)= ,則互補鏈中(A+ T)/(G +C)= ?(4)在整個DNA 分子中(A+ T)/(G +C)= ?4.DNA 熱變性有何特點?Tm 值表示什么?5.,測得某一DNA 樣品的Tm ℃。求出四種堿基百分組成。6. 述下列因素如何影響DNA 的復(fù)性過程:(1)陽離子的存在;(2)低于Tm 的溫度;(2)高濃度的DNA 鏈。7.核酸分子中是通過什么鍵連接起來的?8.DNA 分子二級結(jié)構(gòu)有哪些特點?9.在穩(wěn)定的DNA 雙螺旋中,哪兩種力在維系分子立體結(jié)構(gòu)方面起主要作用?10.簡述tRNA 二級結(jié)構(gòu)的組成特點及其每一部分的功能。11.用1mol/L 的KOH 溶液水解核酸,兩類核酸(DNA 及RNA)的水解有何不同?12.如何將分子量相同的單鏈DNA 與單鏈RNA 分開?13., 光徑杯時的260nm 處的A 值(消光度)。已知:AMP 的摩爾消光系數(shù)A260 = 15400GMP 的摩爾消光系數(shù)A260 = 11700CMP 的摩爾消光系數(shù)A260 = 7500UMP 的摩爾消光系數(shù)A260 = 9900dTMP 的摩爾消光系數(shù)A260 = 9200求:(1)32μmol/L AMP,(2),(3),(4)48μmol/L AMP 和32μmol/L UMP 混合物的A260 消光度。(5) A260 = 的GMP 溶液的摩爾濃度(以摩爾/升表示,)。(6) A260 = 的dTMP 溶液的摩爾濃度(以摩爾/升表示,)。14.如果人體有1014 個細胞,每個體細胞的DNA 109 個堿基對。試計算人體DNA 的總長度是多少?是太陽地球之間距離(109 公里)的多少倍?15.、pHpH 時,四種核苷酸所帶的電荷數(shù)(或所帶電荷數(shù)多少的比較),并回答下列問題:(1)電泳分離四種核苷酸時,緩沖液應(yīng)取哪個pH 值比較合適?此時它們是向哪一極移動?移動的快慢順序如何?(2)當(dāng)要把上述四種核苷酸吸附于陰離子交換樹脂柱上時,應(yīng)調(diào)到什么pH 值?(3)如果用洗脫液對陰離子交換樹脂上的四種核苷酸進行洗脫分離時,洗脫液應(yīng)調(diào)到什么pH 值?這四種核苷酸上的洗脫順序如何?為什么?27三、習(xí)題解答(一)名詞解釋1. 單核苷酸(mononucleotide):核苷與磷酸縮合生成的磷酸酯稱為單核苷酸。2. 磷酸二酯鍵(phosphodiester bonds):單核苷酸中,核苷的戊糖與磷酸的羥基之間形成的磷酸酯鍵。3. 不對稱比率(dissymmetry ratio):不同生物的堿基組成由很大的差異,這可用不對稱比率(A+T)/(G+C)表示。4. 堿基互補規(guī)律(plementary base pairing):在形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程中,由于各種堿基的大小與結(jié)構(gòu)的不同,使得堿基之間的互補配對只能在G…C(或C…G)和A…T(或T…A)之間進行,這種堿基配對的規(guī)律就稱為堿基配對規(guī)律(互補規(guī)律)。5. 反密碼子(anticodon):在tRNA 鏈上有三個特定的堿基,組成一個密碼子,由這些反密碼子按堿基配對原則識別mRNA 鏈上的密碼子。反密碼子與密碼子的方向相反。6. 順反子(cistron):基因功能的單位;一段染色體,它是一種多肽鏈的密碼;一種結(jié)構(gòu)基因。7. 核酸的變性、復(fù)性(denaturation、renaturation):當(dāng)呈雙螺旋結(jié)構(gòu)的DNA 溶液緩慢加熱時,其中的氫鍵便斷開,雙鏈DNA 便脫解為單鏈,這叫做核酸的“溶解”或變性。在適宜的溫度下,分散開的兩條DNA 鏈可以完全重新結(jié)合成和原來一樣的雙股螺旋。這個DNA 螺旋的重組過程稱為“復(fù)性”。8. 退火(annealing):當(dāng)將雙股鏈呈分散狀態(tài)的DNA 溶液緩慢冷卻時,它們可以發(fā)生不同程度的重新結(jié)合而形成雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),這現(xiàn)象稱為“退火”。9. 增色效應(yīng)(hyper chromic effect):當(dāng)DNA 從雙螺旋結(jié)構(gòu)變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時,它在260nm 處的吸收便增加,這叫“增色效應(yīng)”。10. 減色效應(yīng)(hypo chromic effect):DNA 在260nm 處的光密度比在DNA 分子中的各個堿基在260nm 處吸收的光密度的總和小得多(約少35%~40%), 這現(xiàn)象稱為“減色效應(yīng)”。11. 噬菌體(phage):一種病毒,它可破壞細菌,并在其中繁殖。也叫細菌的病毒。12. 發(fā)夾結(jié)構(gòu)(hairpin structure):RNA 是單鏈線形分子,只有局部區(qū)域為雙鏈結(jié)構(gòu)。這些結(jié)構(gòu)是由于RNA 單鏈分子通過自身回折使得互補的堿基對相遇,形成氫鍵結(jié)合而成的,稱為發(fā)夾結(jié)構(gòu)。13. DNA 的熔解溫度(Tm 值):引起DNA 發(fā)生“熔解”的溫度變化范圍只不過幾度,這個溫度變化范圍的中點稱為熔解溫度(Tm)。14. 分子雜交(molecular hybridization):不同的DNA 片段之間,DNA 片段與RNA 片28段之間,如果彼此間的核苷酸排列順序互補也可以復(fù)性,形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補堿基配對而使不完全互補的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。15. 環(huán)化核苷酸(cyclic nucleotide):單核苷酸中的磷酸基分別與戊糖的3’OH 及5’OH形成酯鍵,這種磷酸內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)稱為環(huán)化核苷酸。(二)填空題1. WatsonCrick。 19532. 核苷酸3. 2’4. 細胞核;細胞質(zhì)5. β;糖苷;磷酸二酯鍵6. 磷7. 假尿嘧啶8. 胸腺;尿9. 胸腺;尿10. 反向平行、互補11. 胸腺嘧啶12. ;10;36176。13. 大;高14. 退火15. mRNA;tRNA16. 分子大小;分子形狀17. 增加;下降;升高;喪失18. 嘌呤;嘧啶;26019. 增加;不變20. 窄21. 寬;低;高;122. 多;5%;DNA;蛋白質(zhì)23. 樣品的均一度;DNA 的濃度;DNA 片段大?。粶囟鹊挠绊?;溶液離子強度24. 堿基堆積力;氫鍵;離子鍵;范德華力25. 三葉草;倒L 型;CCA;攜帶活化了的氨基酸26. cAMP;cGMP;第二信使;3’;5’27. m7G;polyA;m7G 識別起始信號的一部分;polyA 對mRNA 的穩(wěn)定性具有一定影響28. 單鏈;雙鏈29(三)選擇題1.B:ATP 分子中各組分的連接方式為:腺嘌呤核糖三磷酸,既ARPPP。2.C:hnRNA 是核不均一RNA,在真核生物細胞核中,為真核mRNA 的前體。3.E:tRNA 的功能是以它的反密碼子區(qū)與mRNA 的密碼子堿基互補配對,來決定攜帶氨基酸的特異性。4.D:根據(jù)WatsonCrick 模型,那么1μmDNA 雙螺旋平均含有1000nm/ 個核苷酸對數(shù),即2941 對。5.E:核苷酸是通過3`5`磷酸二酯鍵連結(jié)成多核苷酸鏈的。6.C:核酸是具有極性的分子,習(xí)慣上以5’→3’的方向表示核酸片段,TAGAp 互補的片段也要按5’→3’的方向書寫,即TCTAp。7.C:tRNA 含有稀有堿基比例較多的核酸。8.B:真核細胞mRNA 帽子結(jié)構(gòu)最多見的是通過5’,5’磷酸二酯鍵連接的甲基鳥嘌呤核苷酸,即m7GPPPNmP。9.B:核酸的變性指核酸雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂,變成單鏈的無規(guī)則的線團,并不涉及共價鍵的斷裂。一系列物化性質(zhì)也隨之發(fā)生改變:粘度降低,浮力密度升高等,同時改變二級結(jié)構(gòu),有時可以失去部分或全部生物活性。DNA 變性后,由于雙螺旋解體,堿基堆積已不存在,藏于螺旋內(nèi)部的堿基暴露出來,這樣就使得變性后的DNA對260nm 紫外光的吸光率比變性前明顯升高(增加),這種現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)。因此判斷只有B 對。10.D:因為G161。212。C 對比A=T 對更為穩(wěn)定,故G161。212。C 含量越高的DNA 的變性是Tm 值越高,它們成正比關(guān)系。11.D:ψ為假尿苷酸,其中的U 可以與A 配對,所以反密碼子GψA,所識別的密碼子是UAC。12.D:參照選擇題8。13.C: 的緩沖液中,C 是四種堿基中獲得正電荷最多的堿基。14.A:在生物細胞中存在的環(huán)化核苷酸,研究得最多的是3’,5’環(huán)腺苷酸(cAMP)和3’,5’環(huán)鳥苷酸(cGMP)。它們是由其分子內(nèi)的磷酸與核糖的3’,5’碳原子形成雙酯環(huán)化而成的。都是一種具有代謝調(diào)節(jié)作用的環(huán)化核苷酸。常被稱為生物調(diào)節(jié)的第二信使。15.D:真核染色質(zhì)主要的組蛋白有五種——Hl、H2A、H2B、HH4。DNA 和組蛋白形成的復(fù)合物就叫核小體,核小體是染色質(zhì)的最基本結(jié)構(gòu)單位,成球體狀,每個核小體含有8 個組蛋白,各含兩個H2A、H2B、HH4 分子,球狀體之間有一定間隔,被DNA 鏈連成串珠狀。30(四)是非判斷題1.錯:RNA 也是生命的遺傳物質(zhì)。2.錯:脫氧核糖核苷中的糖環(huán)2’位沒有羥基。3.錯:真核生物的染色體為DNA 與組蛋白的復(fù)合體,原核生物的染色體為DNA 與堿性精胺、亞精胺結(jié)合。4.錯:核酸的紫外吸收與溶液的pH 值有關(guān)。5.錯:生物體的不同組織中的DNA,其堿基組成也不同。6.對:核酸中的修飾成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA 中發(fā)現(xiàn)的。7.錯:DNA 的Tm 值和GC 含量有關(guān),GC 含量高則Tm 高。8.錯:真核生物mRNA 的3`端有一個多聚A 的結(jié)構(gòu)。9.對:(G+C)含量減少,DNA 的Tm 值減少,(A+T)/(G+C)比值的增加。10.對:在細胞內(nèi),BDNA 代表DNA 的基本構(gòu)象,但在不同某些情況下,也會呈現(xiàn)A型、Z 型和三股螺旋的局部構(gòu)象。11.對:DNA 復(fù)性(退火)一般在低于其Tm 值約20~25℃的溫度下進行的。12.對:用堿水解核酸時,先生成2’,3’環(huán)核苷酸,再水解為2’或3’核苷酸。13.對:生物體內(nèi),負超螺旋DNA 容易解鏈,便于進行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄等反應(yīng)。14.錯:mRNA 是細胞內(nèi)種類最多、但含量很低的RNA。細胞中含量最豐富的RNA 是rRNA。15.對:不同tRNA 中額外環(huán)大小差異很大,因此可以作為tRNA 分類的重要指標(biāo)。16.錯:對于提純的DNA 樣品,如果測得OD260/OD280,則說明樣品中有蛋白質(zhì)。17.錯:基因表達的最終產(chǎn)物可以是蛋白質(zhì)或RNA。18.錯:核酸樣品的純度可以根據(jù)樣品的OD260/OD280 的比值判斷,純的DNA 樣品OD260/OD280=,純的RNA 樣品OD260/OD280=。19.錯:真核生物的結(jié)構(gòu)基因中包括內(nèi)含子和外顯子部分,經(jīng)轉(zhuǎn)錄、加工后只有外顯子部分翻譯成蛋白質(zhì),與蛋白質(zhì)氨基酸序列相對應(yīng)。20.對:真核生物成熟mRNA 的5’為帽子結(jié)構(gòu),即m7G(5’)PPP(5’)Nm,因此兩5’端也是3’OH。(五)問答題及計算題(解題要點)1.答:核酸完全水解后可得到堿基、戊糖、磷酸三種組分。DNA 和RNA 的水解產(chǎn)物戊糖、嘧啶堿基不同。2.答:(1)(107/650) = 104nm = 13μm。(2)650/ =106/μm。(3)88 nm = 30nm =。(4)104 3 =106nm ≈ 。31(5)(96000/120) 3 320 = 76800。3.答:(1)設(shè)DNA 的兩條鏈分別為α和β,那么:A =βT,Tα=Aβ,Gα=Cβ,:Cα=Gβ,因為,(Aα+ Gα)/(Tβ+ Cβ)= (Aα+ Gα)/(Aβ+ Gβ)= 所以,互補鏈中(Aβ
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