【正文】 載方法驗(yàn)證以來在實(shí)施過程中存在一些具體問題，對(duì)這些存在問題進(jìn)行了指導(dǎo)； 進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)時(shí)， 因沒有適宜的方法消除供試品中的抑菌作用而導(dǎo)致微生物回收的失敗。 ⑴ 處理方法 ① 應(yīng)采用能使微生物生長(zhǎng)的更高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行方法驗(yàn)證試驗(yàn) 。 ② 若采用允許的最高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)還存在一株或多株試驗(yàn)菌的回收率達(dá)不到要求 。 處理方法 應(yīng)選擇回收情況最接近要求的方法進(jìn)行供試品的檢測(cè)。 ③在以上情況下，生產(chǎn)單位或研制單位應(yīng)進(jìn)行全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 以保證檢驗(yàn)方法的可靠性，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量 。 ５ . 控制菌的確證 沒有規(guī)定進(jìn)一步確證疑似致病菌的方法。僅規(guī)定若供試品檢出疑似致病菌，確證的方法應(yīng)選擇已被認(rèn)可的菌種鑒定方法。 ⒍ 微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 該指導(dǎo)原則對(duì)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行中存在的問題進(jìn)行了分析和指導(dǎo)； ⑴ 明確了微生物限度標(biāo)準(zhǔn)使用范圍 ⑵ 標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行 ① 必檢項(xiàng)目 ② 原則性要求 （丸劑、口服片劑、膠囊劑、顆粒劑），應(yīng)對(duì)其被微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估。 ⑶ 用于手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑應(yīng)符合無菌檢查法要求。 ⑷ 用于創(chuàng)傷程度難以判斷的局部給藥制劑，若沒有證據(jù)證明藥品不存在安全性風(fēng)險(xiǎn)則應(yīng)符合無菌檢查法要求。 ⑸眼用制劑應(yīng)符合無菌檢查法要求。 ⑹ 含動(dòng)物類原藥材粉的口服中藥制劑要求不得檢出沙門菌。其中的動(dòng)物類原藥材粉是指除蜂蜜、王漿、動(dòng)物角、阿膠外的所有動(dòng)物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠等貝類，海蜇、冬蟲夏草、人工牛黃等。 ⑺ 制定合理、安全和嚴(yán)格的微生物限度標(biāo)準(zhǔn) 四、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則 ⒈目的 該指導(dǎo)原則用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制。 ⒉ 藥品微生物的檢驗(yàn)的對(duì)象具特殊性 ； 活的生物、 分布不均勻、重現(xiàn)性差 必須使用經(jīng)驗(yàn)證的檢測(cè)方法并嚴(yán)格按照藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求進(jìn)行試驗(yàn)。 ⒊ 藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范包括以下幾個(gè)方面 人員、培養(yǎng)基、菌種、實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行、設(shè)備、文件、實(shí)驗(yàn)記錄、結(jié)果的判斷等。 ⑴ 人員 從事藥品微生物試驗(yàn)工作的人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景 ① 檢驗(yàn)人員和管理人員培訓(xùn) 進(jìn)行崗前培訓(xùn) 檢驗(yàn)人員 技能培訓(xùn) 熟悉相關(guān)檢測(cè) 方法、程序、檢測(cè)目的和結(jié)果評(píng)價(jià)。 管理人員 ① 其專業(yè)技能和經(jīng)驗(yàn)水平應(yīng)與他們的職責(zé)范圍相符。不斷接受系統(tǒng)的教育與職責(zé)范圍相關(guān)的培訓(xùn)。 ② 客觀評(píng)估檢驗(yàn)人員的能力，必要時(shí)對(duì)其進(jìn)行再培訓(xùn)并重新評(píng)估。 ⒉培養(yǎng)基 培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影 響微生物試驗(yàn)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。 該指導(dǎo)原則 對(duì)培養(yǎng)基的制備、儲(chǔ)存、滅菌及質(zhì)量控制進(jìn)行了指導(dǎo)。 ⒊菌 種 實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保藏的程序應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化， ⑴使盡可能減少菌種污染和生長(zhǎng)特性的改變。 ⑵按統(tǒng)一操作程序制備的菌株是微生物試驗(yàn) 結(jié)果一致性的重要保證。 該指導(dǎo)原則 對(duì)菌種的來源、 菌種保藏 、 菌種的傳代和使用 、 菌種的管理 進(jìn)行 了詳細(xì)的說明和指導(dǎo)。 ２、 菌種保藏的原則 ⑴ 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株 可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株 .冷凍菌株一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后 ,不得重新冷凍或再次使用。 ⑵ 工作菌株 不可代替標(biāo)準(zhǔn)菌株，標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生物僅可用作工作菌株。 ３、 菌種的傳代和使用 ⑴ 工作菌種的傳代次數(shù)應(yīng)嚴(yán)格控制，不得超過 5代防止過度的傳代造成菌種變異 ,工作菌株不可代替標(biāo)準(zhǔn)菌株 . ⑵ 任何亞培養(yǎng) 的形式均被認(rèn)為是轉(zhuǎn)種或傳代一次。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)工作菌株的特性和純度進(jìn)行確認(rèn)。 ⒋ 菌種的管理 嚴(yán)格的程序化管理 實(shí)驗(yàn)室必須建立菌種保存和使用文件的程序管理制度 ⒌ 實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行 ⑴ 實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)計(jì)的基本原則 ① 具有檢測(cè)所需的適宜、充分的設(shè)施條件 。 ② 合理的布局與設(shè)計(jì)，具有獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室、 輔助區(qū)域各區(qū)域應(yīng)有明確標(biāo)識(shí)。 ③ 建立控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 。 ⒍ 建立合理的控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范 ⑴對(duì)進(jìn)出潔凈區(qū)域的人和物建立控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。 ⑵ 消毒劑的配制應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程配制，對(duì)所用的消毒劑種類應(yīng)定期更換，使用的消毒劑應(yīng)無菌。 ⑶ 建立檢樣品傳遞、儲(chǔ)存、處置和識(shí)別管理程序 。 ⑷ 建立帶菌培養(yǎng)物溢出的意外事件制定處理規(guī)程 。 ⑸ 建立合理的取樣控制程序和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范 。 ⒎ 設(shè) 備 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備與檢驗(yàn)?zāi)芰凸ぷ髁肯噙m應(yīng)的儀器設(shè)備，其類型、測(cè)量范圍和準(zhǔn)確度等級(jí)應(yīng)滿足檢驗(yàn)所采用標(biāo)準(zhǔn)的要求，設(shè)備的安裝和布局應(yīng)便于操作，易于維護(hù)、清潔和校準(zhǔn)。使用的消毒劑應(yīng)無菌。 建立相應(yīng)的操作和維護(hù)和保養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 。 ⒏ 文件 文件應(yīng)當(dāng)充分表明試驗(yàn)是在實(shí)驗(yàn)室里按可控的檢查法進(jìn)行的 ， 一般包括以下方面： 質(zhì)量管理文件 、 程序文件 、 技術(shù)操作文件 。 ⒐ 實(shí)驗(yàn)記錄的保存 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的依賴于試驗(yàn)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行，包括正確的試驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)記錄、(所有關(guān)鍵的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié) )，以便確認(rèn)數(shù)據(jù)的完整性。 ⒑ 結(jié)果的判斷 由于微生物試驗(yàn)的特殊性，在實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析時(shí)，應(yīng)從各個(gè)可能的方面去考慮，不但要假設(shè)被污染，而且要考慮微生物在原料、輔料或試驗(yàn)環(huán)境中存活的可能性。此外，還應(yīng)考慮微生物生長(zhǎng)特性。 ⑴ 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行充分和全面的評(píng)價(jià)。 ⑵ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合藥典各論要求或另外建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)進(jìn)行原因調(diào)查。 ⑶ 異常結(jié)果分析時(shí)，應(yīng)充分考慮實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、抽樣區(qū)的防護(hù)條件、樣品在該檢驗(yàn)條件下以往檢驗(yàn)的情況，樣品本身具有使微生物存活或繁殖的特性等情況。 ⑷如果依據(jù)分析調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)有錯(cuò)誤而判實(shí)驗(yàn)結(jié)果無效，那么這種情況必須記錄。實(shí)驗(yàn)室也必須認(rèn)可復(fù)試程序，如果需要，可按相關(guān)規(guī)定重新抽樣，但抽樣方法不能影響不符合規(guī)定結(jié)果的分析調(diào)查。