【正文】 時(shí)為假小葉形成改變，肝臟纖維間隔進(jìn)一步增寬，肝組織正常結(jié)構(gòu)被破壞，有假小葉形成，導(dǎo)致肝硬化。 2022/6/23 93 二、四氯化碳復(fù)合因素模型 [模型評價(jià) ] 1． CCl4加高膽固醇和酒精飲食所致大鼠肝纖維化，是目前國內(nèi)外常采用的動物模型。該模型可靠，復(fù)制時(shí)間較短，肝纖維化進(jìn)展穩(wěn)定，適合于肝纖維化、肝硬化發(fā)生發(fā)展過程的動態(tài)研究，是值得應(yīng)用的一種模型。 2．如果動物體重較前一次下降 30%以上，可停止注射 CCl4 1次，以減少動物死亡率。 壞死后性肝硬化 2022/6/23 95 門脈性肝硬化 （假小葉） 靈長類肝小葉 2022/6/23 96 A： 正常肝小葉 (Mallory染色 )； B， C： 肝硬化 (Masson trichrome) 2022/6/23 97 第九節(jié) 胰腺炎模型 2022/6/23 98 胰液內(nèi)無活性 有活性的 的胰蛋白酶原 胰蛋白酶 引起胰腺自身消化 其他酶反應(yīng) 引起胰蛋白酶被激活的原因： （ 1）膽汁返流； （ 2）胰液分泌亢進(jìn)； （ 3）病毒感染、外傷、藥物等造成腺泡的損傷。 膽汁和腸液 中的腸激酶 激活 發(fā)病機(jī)制 2022/6/23 99 一、急性胰腺炎模型 牛磺膽酸鈉膽胰管逆行注射法 2022/6/23 100 ? 正常情況下主胰管的壓力高于總膽管，膽汁不會進(jìn)入胰管。但當(dāng)膽總管阻塞時(shí)，膽道內(nèi)的膽汁可被壓入主胰管，引起急性胰腺炎。 ? 早期?；悄懰徕c可直接導(dǎo)致胰腺腺泡細(xì)胞或小導(dǎo)管壁的細(xì)胞溶解，進(jìn)一步的損害可能是膽鹽激活胰酶，如胰蛋白酶、磷脂酶等，產(chǎn)生腺泡自身消化。 ? 采用胰管逆行注射法誘發(fā)動物急性胰腺炎，是根據(jù)胰管、膽管共同通路和膽汁反流理論，模擬人類膽源性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制 ? 大鼠的膽管和胰管為共同開口的管道，解剖上稱為膽胰管，從膽胰管上分出 6~8支胰管的分支進(jìn)入胰腺實(shí)質(zhì)。 造模機(jī)制 2022/6/23 101 [操作方法 ] 1. 大鼠實(shí)驗(yàn)前禁食不禁水 12h， 3%戊巴比妥鈉（ 40mg/kg）腹腔注射麻醉。 2. 上腹正中切口進(jìn)入腹腔，提起胃和十二指腸，顯露出胰腺，辨認(rèn)膽胰管走向，于肝門處用微型無損傷動脈夾夾閉膽總管，以防藥液逆流進(jìn)入肝臟。 3. 用 4號鈍針頭朝胰腺方向穿刺十二指腸前壁，在其漿膜下潛行通過十二指腸乳頭穿入膽胰管，用手指固定針頭，緩慢（約 2min）注入 %或 5%?；悄懰徕c溶液1ml/kg體重。 2022/6/23 102 [操作方法 ] 1. 另一種穿刺方法是，用 4號針頭緊貼膽胰管匯入十二指腸處，自腸外穿刺膽胰管。 2. 注射完畢拔除針頭后繼續(xù)按住穿刺處約 1min。檢查無漏膽，逐層關(guān)腹。 3. 假手術(shù)組僅翻動胰腺和十二指腸后關(guān)腹。 4. 術(shù)后 15 處死動物，解剖時(shí)肉眼觀察胰腺大體變化。取胰腺等組織，10%中性緩沖甲醛液固定，常規(guī)制備石蠟切片，在光鏡下觀察胰腺等臟器的改變。取血測定血清淀粉酶水平。 2022/6/23 103 [結(jié) 果 ] 1. 術(shù)后 15 h血清淀粉酶水平明顯升高。 2. 肉眼觀察，胰腺充血腫脹，包膜緊張，出現(xiàn)不同程度出血壞死，腹腔內(nèi)可見血性腹水，胰腺周圍大網(wǎng)膜和腸系膜出現(xiàn)淡黃色的皂化斑。胃腸道明顯水腫，腎臟明顯增大，顏色晦暗。 3. 光鏡檢查，于術(shù)后 15 h可見胰腺組織大片出血、凝固性壞死及脂肪壞死，壞死區(qū)之間有大量中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤，表現(xiàn)為急性出血壞死性胰腺炎。 2022/6/23 104 [模型評價(jià) ] ? 本模型在病因、發(fā)病機(jī)制及胰腺病變等方面與人類急性胰腺炎相似，是目前被公認(rèn)的、比較常用的復(fù)制急性胰腺炎的方法。 ? 通過改變注射速度、注射持續(xù)時(shí)間、所用?；悄懰徕c的濃度或劑量可控制胰腺病變的程度，操作簡單，造模成功率較高，重復(fù)性較好，適合于評價(jià)藥物對急性胰腺炎的防治效果。 ? 胰腺病變程度及動物死亡率與所用?；悄懰徕c的濃度呈正相關(guān)，隨著所用牛磺膽酸鈉濃度的提高，胰腺損害逐漸加重。 ? 除胰管逆行注射?；悄懰徕c外，還可注射自體膽汁、膽汁酸、胰酶等誘發(fā)急性胰腺炎。 2022/6/23 105 急性胰腺炎 2022/6/23 107 第十節(jié) 膽石癥動物模型 2022/6/23 108 概念 結(jié)石 基本類型： 色素性膽石 呈泥沙樣及砂粒狀；成分以膽紅素為 主，含少量膽固醇。 膽固醇性結(jié)石 黃色或黃白色，表面光滑，剖面呈 放射狀。常為單個(gè)，體積較大，歐美多見。 混合性膽石 呈多種顏色，我國最多見，結(jié)石多為多 面體。大小數(shù)目不等。 膽結(jié)石 膽管結(jié)石 膽囊結(jié)石 2022/6/23 109 色素性膽石 膽固醇性結(jié)石 2022/6/23 110 混合性膽石 2022/6/23 111 依據(jù)人類膽石形成的主要誘發(fā)因素，如 膽汁理化狀態(tài)的改變、膽汁淤滯、膽道感 染、膽道異物、代謝因素等，采用單一或復(fù) 合因素造模。 2022/6/23 112 一、食餌性膽色素結(jié)石模型 膽色素結(jié)石易發(fā)生于高碳水化合物膳食的人群 ， 與正常人相比患者膽汁的磷脂明顯增高 。 給豚鼠喂飼低蛋白飼料造成肝臟及膽汁中 β葡萄糖醛酸酶活性增高 ， 促使結(jié)合膽紅素水解為游離膽紅素 ， 與鈣離子結(jié)合形成不溶于水的膽紅素鈣鹽 ， 形成結(jié)石 。 2022/6/23 113 一、食餌性膽色素結(jié)石模型 1． 飼料配方中的膽酸和膽固醇是形成結(jié)石的關(guān)鍵成分 ， 不能缺少 。 2． 用體重 350~450 g雄性豚鼠 ， 用含 50%淀粉 、 15%葡萄糖 、 35%標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng) 20 d， 造模成功率達(dá) 94%。 3． 用體重 140~160 g地鼠 ， 用含 70%蔗糖 、 %酪蛋白 、5%麻油 、 5%混合鹽 、 10%微晶纖維素 、 1%復(fù)合維生素和 %氯化膽堿的飼料喂養(yǎng) 6周 ， 造模成功率為 80%。 2022/6/23 114 二、感染性膽色素結(jié)石模型 感染性膽色素結(jié)石的發(fā)病與膽道感染及膽汁瘀積有明顯關(guān)系。 感染 是生石的首要因素， 瘀積 是生石的必要條件。 2022/6/23 115 [造模原理 ] 用一定量大腸桿菌注入膽總管引起感染時(shí) ， 大腸桿菌產(chǎn)生 β葡萄糖醛酸酶 ， 可使水溶性膽紅素水解為游離膽紅素 ， 后者與鈣結(jié)合形成不溶性膽紅素鈣 ， 在粘液物質(zhì)的凝聚下形成膽色素結(jié)石而析出 ， 加之膽總管被結(jié)扎 ，膽道阻塞 ， 導(dǎo)致細(xì)菌繁殖加快并促使感染加重 ， 可加速膽色素結(jié)石的形成 。 3~8周后解剖檢查 ， 可見動物出血黃疸 ， 肝內(nèi) 、 外膽管呈不同程度淤膽及擴(kuò)張 ， 在膽管內(nèi)可見黃褐色結(jié)石 。 2022/6/23 116 三、異物植入性膽色素結(jié)石模型 將人的同類型結(jié)石或蛔蟲碎片或其他異物直接植入兔或犬的膽囊內(nèi)，以此為核心， 2~3個(gè)月后可誘發(fā)大量膽色素結(jié)石。脫落的膽道上皮細(xì)胞、細(xì)菌殘?bào)w、蛔蟲碎片、蛔蟲卵等均可作為結(jié)石的核心，使之不斷增大。 植入異物 2~3個(gè)月后可見膽色素結(jié)石形成。這種膽結(jié)石在異物表面沉積大量粘液和膽色素等成分，也可出現(xiàn)由數(shù)個(gè)異物粘合成團(tuán)的較大結(jié)石，有時(shí)也可見多量黑色膽砂。 2022/6/23 117 四、食餌性膽固醇結(jié)石模型 正常膽汁中含有一定濃度 膽汁酸和磷脂 ，與 膽固醇、蛋白質(zhì) 等組成膠性微粒，懸浮于膽汁中而不析出。長期食用高膽固醇和缺乏維生素 C的飼料，使體內(nèi) 膽固醇含量升高， 膽汁酸和磷脂含量相對或絕對降低， 各成分比例失調(diào) ,致使膽汁中膽固醇過飽和、鈣離子濃度增多而形成膽固醇結(jié)石。