遺傳變異ppt課件(2)-資料下載頁(yè)
2025-05-07 02:26本頁(yè)面
【正文】 迅速消失，而只是進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯（性狀表達(dá)），這種現(xiàn)象就稱(chēng)為流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)。 現(xiàn)象：發(fā)生流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞在其進(jìn)行細(xì)胞分裂后，只能將這段外源 DNA分配給一個(gè)子細(xì)胞，而另一子細(xì)胞僅獲得供體基因的產(chǎn)物 ——酶，在表型上表現(xiàn)出輕微的供體菌特征，每經(jīng)過(guò)一次分裂，就受到一次稀釋?zhuān)? 所以，能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成微小菌落就是流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)。 2. 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) 通過(guò) 部分缺陷的溫和噬菌體 把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并獲得表達(dá)的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。 特點(diǎn) ：噬菌體對(duì)供體菌和受體菌都是溫和噬菌體；只能轉(zhuǎn)導(dǎo)供體菌的個(gè)別特定基因（一般為噬菌體整合位點(diǎn)兩側(cè)的基因）；該特定基因由 部分缺陷的噬菌體 攜帶；缺陷噬菌體使由于其在形成過(guò)程中所發(fā)生的低頻率（約 10 – 5） “ 誤切 ” ，或由于 雙重溶源菌 的裂解而形成（約形成 50%缺陷噬菌體）。 1）低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（ LFT） 一般的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象中，從宿主染色體上切離時(shí)發(fā)生不正常切離的頻率極低，故這種裂解物中的部分缺陷噬菌體的比例是極低的（ 10–4 ~ 10–6）。把這種裂解物稱(chēng)為 LFT（低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)）用 LFT裂解物以低 （感染復(fù)數(shù)）感染宿主，就可獲得極少量的局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子，即低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。 2）高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)（ HFT） 當(dāng)用 LFT裂解物以高 感染 E. coli gal–（ 不發(fā)酵半乳糖的營(yíng)養(yǎng)缺陷型 ） 菌株時(shí) ， 凡是感染有λ dgal噬菌體任一細(xì)胞 ， 幾乎都同時(shí)感染有正常的 λ 噬菌體 。 這時(shí) λ 與 λ dgal同時(shí)整合在一個(gè)受體菌的核染色體組上 ， 從而使它成為一個(gè)雙重溶源菌 。 當(dāng)雙重溶源菌被紫外線等誘導(dǎo)時(shí) ， 其中的正常 λ 噬菌體的基因可補(bǔ)償 λ dgal缺失的部分基因功能 ， 因而兩種噬菌體就同時(shí)獲得復(fù)制的機(jī)會(huì) 。 所以在雙重溶源菌中的正常 λ 噬菌體被稱(chēng)為助體 （ 或輔助 ） 噬菌體 。 雙重溶源菌的裂解物中含有等量的 λ 和λ dgal粒子 ， 稱(chēng)為 HFT（ 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) ） 裂解物 。 用 HFT裂解物以低 感染另一個(gè) E. coli gal–（ 不發(fā)酵半乳糖的營(yíng)養(yǎng)缺陷型 ）受體菌 ， 就可以高頻率地把它轉(zhuǎn)化為能發(fā)酵半乳糖的 E. coli gal+ 轉(zhuǎn)導(dǎo)子 。 是為高頻轉(zhuǎn)導(dǎo) 。 第四節(jié) 基因工程 基因工程：用人為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì) DNA大分子提取出來(lái)，在離體的條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M(jìn)行切割后，把它與作為載體的 DNA分子連接起來(lái)，然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長(zhǎng)、繁殖的受體細(xì)胞中使供體 DNA進(jìn)行正常的復(fù)制和表達(dá)，從而獲得新物種的一種嶄新的育種技術(shù)。 基因工程在食品工業(yè)中的應(yīng)用： 工程菌的構(gòu)建（外源基因的表達(dá)、工業(yè)發(fā)酵用菌種的改造） 工業(yè)用酶蛋白的該性（第二代基因工程） 一、 基因工程技術(shù) 基因工程操作一般分為以下四個(gè)步驟： 目的基因的取得 載體的選擇 目的基因與載體 DNA的體外重組 重組載體引入受體細(xì)胞 獲得目的基因的主要方法： 從供體細(xì)胞的 DNA中分離（酶切法、 PCR擴(kuò)增）。 通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶的作用由 mRNA合成 cDNA（拷貝數(shù)少的目的基因的獲得）。 由化學(xué)方法合成特定功能的基因（磷酸二酯法、磷酸三酯法、固相亞磷酸三酯法，合成的長(zhǎng)度150—200bp，作用：合成基因的元件、合成引物、合成探針、用于基因的定點(diǎn)誘變、作為重組 DNA連接的構(gòu)件）。 載體的選擇 載體必須具備的幾個(gè)條件： 必須是一個(gè)復(fù)制子 在受體細(xì)胞中有較高的復(fù)制率 最好只有一個(gè)內(nèi)切酶切口 必須具有選擇性遺傳標(biāo)記 目前常用載體： 質(zhì)粒載體 噬菌體載體 柯斯質(zhì)粒載體（噬菌體 DNA的 COS序列和質(zhì)粒復(fù)制子構(gòu)成的特殊類(lèi)型的質(zhì)粒載體） 目的基因與載體 DNA的體外連接 核酸內(nèi)切酶與 DNA分子的體外切割： 在基因工程中，必須使用特定的內(nèi)切酶（一般為 Ⅱ 型內(nèi)切酶）消化目的基因與載體 DNA，使它們產(chǎn)生互補(bǔ)的粘性末端或平末端，如 EcoRⅠ 消化 DNA 產(chǎn)生的粘性末端為： G3’ 5’ AATTC CTTAA5’ 3’ G 目的基因與載體 DNA用同一種內(nèi)切酶消化，即產(chǎn)生相同的粘性末端，在低溫（ 56℃ ）下進(jìn)行退火時(shí)，互補(bǔ)的粘性末端配對(duì)重新形成帶缺口的雙鏈。 DNA連接酶進(jìn)行目的基因與載體 DNA的體外連接： 粘性末端連接（來(lái)源于 DNA連接酶）；平末端連接（ T4 DNA連接酶）。 重組載體引入受體細(xì)胞 受體細(xì)胞的種類(lèi)： 微生物細(xì)胞（ ） 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞 重組載體引入受體細(xì)胞的方法： 轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)染 二、基因工程的應(yīng)用及發(fā)展前景 基因工程在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)療、環(huán)保方面的應(yīng)用。 基因工程與基本理論研究的關(guān)系。 基因工程的展望
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