遺傳變異ppt課件(2)-資料下載頁
2025-05-07 02:26本頁面
【正文】 迅速消失，而只是進行轉錄和轉譯（性狀表達），這種現象就稱為流產轉導。 現象：發(fā)生流產轉導的細胞在其進行細胞分裂后，只能將這段外源 DNA分配給一個子細胞，而另一子細胞僅獲得供體基因的產物 ——酶，在表型上表現出輕微的供體菌特征，每經過一次分裂，就受到一次稀釋， 所以，能在選擇性培養(yǎng)基平板上形成微小菌落就是流產轉導的特點。 2. 局限性轉導 通過 部分缺陷的溫和噬菌體 把供體菌的少數特定基因攜帶到受體菌中，并獲得表達的轉導現象。 特點 ：噬菌體對供體菌和受體菌都是溫和噬菌體；只能轉導供體菌的個別特定基因（一般為噬菌體整合位點兩側的基因）；該特定基因由 部分缺陷的噬菌體 攜帶；缺陷噬菌體使由于其在形成過程中所發(fā)生的低頻率（約 10 – 5） “ 誤切 ” ，或由于 雙重溶源菌 的裂解而形成（約形成 50%缺陷噬菌體）。 1）低頻轉導（ LFT） 一般的轉導現象中，從宿主染色體上切離時發(fā)生不正常切離的頻率極低，故這種裂解物中的部分缺陷噬菌體的比例是極低的（ 10–4 ~ 10–6）。把這種裂解物稱為 LFT（低頻轉導）用 LFT裂解物以低 （感染復數）感染宿主，就可獲得極少量的局限轉導子，即低頻轉導。 2）高頻轉導（ HFT） 當用 LFT裂解物以高 感染 E. coli gal–（ 不發(fā)酵半乳糖的營養(yǎng)缺陷型 ） 菌株時 ， 凡是感染有λ dgal噬菌體任一細胞 ， 幾乎都同時感染有正常的 λ 噬菌體 。 這時 λ 與 λ dgal同時整合在一個受體菌的核染色體組上 ， 從而使它成為一個雙重溶源菌 。 當雙重溶源菌被紫外線等誘導時 ， 其中的正常 λ 噬菌體的基因可補償 λ dgal缺失的部分基因功能 ， 因而兩種噬菌體就同時獲得復制的機會 。 所以在雙重溶源菌中的正常 λ 噬菌體被稱為助體 （ 或輔助 ） 噬菌體 。 雙重溶源菌的裂解物中含有等量的 λ 和λ dgal粒子 ， 稱為 HFT（ 高頻轉導 ） 裂解物 。 用 HFT裂解物以低 感染另一個 E. coli gal–（ 不發(fā)酵半乳糖的營養(yǎng)缺陷型 ）受體菌 ， 就可以高頻率地把它轉化為能發(fā)酵半乳糖的 E. coli gal+ 轉導子 。 是為高頻轉導 。 第四節(jié) 基因工程 基因工程：用人為的方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質 DNA大分子提取出來，在離體的條件下用適當的工具酶進行切割后，把它與作為載體的 DNA分子連接起來，然后與載體一起導入某一更易生長、繁殖的受體細胞中使供體 DNA進行正常的復制和表達，從而獲得新物種的一種嶄新的育種技術。 基因工程在食品工業(yè)中的應用： 工程菌的構建（外源基因的表達、工業(yè)發(fā)酵用菌種的改造） 工業(yè)用酶蛋白的該性（第二代基因工程） 一、 基因工程技術 基因工程操作一般分為以下四個步驟： 目的基因的取得 載體的選擇 目的基因與載體 DNA的體外重組 重組載體引入受體細胞 獲得目的基因的主要方法： 從供體細胞的 DNA中分離（酶切法、 PCR擴增）。 通過反轉錄酶的作用由 mRNA合成 cDNA（拷貝數少的目的基因的獲得）。 由化學方法合成特定功能的基因（磷酸二酯法、磷酸三酯法、固相亞磷酸三酯法，合成的長度150—200bp，作用：合成基因的元件、合成引物、合成探針、用于基因的定點誘變、作為重組 DNA連接的構件）。 載體的選擇 載體必須具備的幾個條件： 必須是一個復制子 在受體細胞中有較高的復制率 最好只有一個內切酶切口 必須具有選擇性遺傳標記 目前常用載體： 質粒載體 噬菌體載體 柯斯質粒載體（噬菌體 DNA的 COS序列和質粒復制子構成的特殊類型的質粒載體） 目的基因與載體 DNA的體外連接 核酸內切酶與 DNA分子的體外切割： 在基因工程中，必須使用特定的內切酶（一般為 Ⅱ 型內切酶）消化目的基因與載體 DNA，使它們產生互補的粘性末端或平末端，如 EcoRⅠ 消化 DNA 產生的粘性末端為： G3’ 5’ AATTC CTTAA5’ 3’ G 目的基因與載體 DNA用同一種內切酶消化，即產生相同的粘性末端，在低溫（ 56℃ ）下進行退火時，互補的粘性末端配對重新形成帶缺口的雙鏈。 DNA連接酶進行目的基因與載體 DNA的體外連接： 粘性末端連接（來源于 DNA連接酶）；平末端連接（ T4 DNA連接酶）。 重組載體引入受體細胞 受體細胞的種類： 微生物細胞（ ） 植物細胞 動物細胞 重組載體引入受體細胞的方法： 轉化 轉染 二、基因工程的應用及發(fā)展前景 基因工程在工業(yè)、農業(yè)、醫(yī)療、環(huán)保方面的應用。 基因工程與基本理論研究的關系。 基因工程的展望
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1