吸光度法ppt課件-資料下載頁(yè)
2025-05-06 18:14本頁(yè)面
【正文】 小 ? 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 A T% Er r 4lg( )cTEc T TT??????() 實(shí)際工作中，應(yīng)控制 T在 10～ 70％ , A在 ～ (調(diào) c, b) 167。 吸光光度法的應(yīng)用 1. 單組分的測(cè)定 p258 通常采用 AC 標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測(cè)定。 2. 多組分的同時(shí)測(cè)定 p260 ⑴ 若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長(zhǎng)處分別進(jìn)行測(cè)定。這本質(zhì)上與單組分測(cè)定沒(méi)有區(qū)別。 ⑵若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。 Aλ1= εaλ1bca ＋ εbλ1bcb Aλ2= εaλ2bca ＋ εbλ2bcb 高含量組分的測(cè)定 示差法 ? 普通分光光度法一般只適于測(cè)定微量組分，當(dāng)待測(cè)組分含量較高時(shí)，將產(chǎn)生較大的誤差。需采用示差法。 ? 即提高入射光強(qiáng)度，并采用濃度稍低于待測(cè)溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。 設(shè)：待測(cè)溶液濃度為 cx，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為 cs(cs cx)。則： Ax= ε b cx As = ε b cs ΔＡ＝Ａ x －Ａ s =ε b(cx － cs ） =ε bΔc 測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差 ΔＡ。 ΔＡ＝Ａ x －Ａ s =ε b(cx － cs ） =ε bΔc 測(cè)得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測(cè)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差 ΔＡ。 示差法測(cè)得的吸光度與 Δc呈直線關(guān)系。由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的 Δc值，則待測(cè)溶液濃度 cx ： cx = cs + Δc 普通法： cs的 T=10%； cx的 T=5% 示差法： cs 做參比，調(diào) T=100% cx的 T=50% ；標(biāo)尺擴(kuò)展 10倍 酸堿解離常數(shù)的測(cè)定 一元弱酸 HB HB==H++B 在某一波長(zhǎng)下， 酸 HB和堿 B均有吸收，液 層厚度 b=1 cm ，根據(jù) 吸光度的加和性； A =AHB+AB pHAAAApKBHBa ?????? )()(lg 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定 ?摩爾比法 : M + nL MLn 固定 CM ，改變 CL， 以吸光度 A為縱坐標(biāo)， CL/CM為橫坐標(biāo)作圖。 配合比 =? ? 穩(wěn)定常數(shù)： 若形成 1:1的配合物 cM = [M] + [ML] cL = [L] + [ML] 若金屬離子和配位劑在測(cè)定波長(zhǎng)沒(méi)有吸收，則 A= ? [ML] (b=1 cm) A0= ? [ML] = ? CM = = CLA0 A / ? (CM[ML])(CL[ML]) MLLM ?? ]][[][1 LMMLK ?穩(wěn)2MLLML ?? ]][[][ 22 LMLMLK ?穩(wěn)．．． ?。畁n MLLML ??? )1( ]][[][)1( LMLMLKnnn??穩(wěn)K穩(wěn) = = A (CM? A) (CL? A) A CM ( A) (A0A) A0 ? = CM ? 不需空白溶液作參比；但需要兩個(gè)單色器獲得兩束單色光 (λ 1和 λ 2)；以參比波長(zhǎng) λ 1處的吸光度 Aλ 1作為參比，來(lái)消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復(fù)雜試樣時(shí)顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測(cè)量精密度等方面都比單波長(zhǎng)法有所提高。 ΔＡ＝ A λ 2 － A λ 1 ＝（ ε λ 2 － ε λ 1 ) b c 兩波長(zhǎng)處測(cè)得的吸光度差值 ΔＡ與待測(cè)組分濃度成正比。 ε λ 1和 ε λ 2分別表示待測(cè)組分在 λ 1和 λ 2處的摩爾吸光系數(shù)。 雙波長(zhǎng)分光光度法 關(guān)鍵問(wèn)題 : 關(guān)鍵問(wèn)題是測(cè)量波長(zhǎng) λ 2和參比波長(zhǎng) λ 1的選擇與組合。 以兩組分 x和 y的雙波長(zhǎng)法測(cè)定為例： 設(shè)： x為待測(cè)組分， y為干擾組分，二者的吸光度差分別為 ΔＡ x和 ΔＡ y，則該體系的總吸光度差 ΔＡ x+y為： ΔＡ x+y = ΔＡ x + ΔＡ y 如何選擇波長(zhǎng) λ 1 、 λ 2有一定的要求。 選擇波長(zhǎng)組合 λ 1 、 λ 2的基本要求是： ⑴ 選定的波長(zhǎng) λ 1和 λ 2處干擾組分應(yīng)具有相同吸光度， 即： Δ Ay = ΔＡ yλ 2 － ΔＡ yλ 1 = 0 故： ΔＡ x+y = ΔＡ x=(ε xλ 2－ ε xλ 1)bcx 此時(shí)：測(cè)得的吸光度差 ΔＡ只與待測(cè)組分 x的濃度呈線性關(guān)系，而與干擾組分 y無(wú)關(guān)。若 x為干擾組分，則也可用同樣的方法測(cè)定 y組分。 可采用作圖法選擇符合上述兩個(gè)條件的波長(zhǎng)組合 。 ⑵ 在選定的兩個(gè)波長(zhǎng) λ 1和 λ 2處待測(cè)組分的吸光度應(yīng)具有足夠大的差值。 作業(yè) ? P269 1， 2， 3， 4， 5， 6
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