吸光度法ppt課件-資料下載頁
2025-05-06 18:14本頁面
【正文】 小 ? 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 A T% Er r 4lg( )cTEc T TT??????() 實際工作中，應控制 T在 10～ 70％ , A在 ～ (調 c, b) 167。 吸光光度法的應用 1. 單組分的測定 p258 通常采用 AC 標準曲線法定量測定。 2. 多組分的同時測定 p260 ⑴ 若各組分的吸收曲線互不重疊，則可在各自最大吸收波長處分別進行測定。這本質上與單組分測定沒有區(qū)別。 ⑵若各組分的吸收曲線互有重疊，則可根據(jù)吸光度的加合性求解聯(lián)立方程組得出各組分的含量。 Aλ1= εaλ1bca ＋ εbλ1bcb Aλ2= εaλ2bca ＋ εbλ2bcb 高含量組分的測定 示差法 ? 普通分光光度法一般只適于測定微量組分，當待測組分含量較高時，將產生較大的誤差。需采用示差法。 ? 即提高入射光強度，并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標準溶液作參比溶液。 設：待測溶液濃度為 cx，標準溶液濃度為 cs(cs cx)。則： Ax= ε b cx As = ε b cs ΔＡ＝Ａ x －Ａ s =ε b(cx － cs ） =ε bΔc 測得的吸光度相當于普通法中待測溶液與標準溶液的吸光度之差 ΔＡ。 ΔＡ＝Ａ x －Ａ s =ε b(cx － cs ） =ε bΔc 測得的吸光度相當于普通法中待測溶液與標準溶液的吸光度之差 ΔＡ。 示差法測得的吸光度與 Δc呈直線關系。由標準曲線上查得相應的 Δc值，則待測溶液濃度 cx ： cx = cs + Δc 普通法： cs的 T=10%； cx的 T=5% 示差法： cs 做參比，調 T=100% cx的 T=50% ；標尺擴展 10倍 酸堿解離常數(shù)的測定 一元弱酸 HB HB==H++B 在某一波長下， 酸 HB和堿 B均有吸收，液 層厚度 b=1 cm ，根據(jù) 吸光度的加和性； A =AHB+AB pHAAAApKBHBa ?????? )()(lg 絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定 ?摩爾比法 : M + nL MLn 固定 CM ，改變 CL， 以吸光度 A為縱坐標， CL/CM為橫坐標作圖。 配合比 =? ? 穩(wěn)定常數(shù)： 若形成 1:1的配合物 cM = [M] + [ML] cL = [L] + [ML] 若金屬離子和配位劑在測定波長沒有吸收，則 A= ? [ML] (b=1 cm) A0= ? [ML] = ? CM = = CLA0 A / ? (CM[ML])(CL[ML]) MLLM ?? ]][[][1 LMMLK ?穩(wěn)2MLLML ?? ]][[][ 22 LMLMLK ?穩(wěn)．．． ．．．nn MLLML ??? )1( ]][[][)1( LMLMLKnnn??穩(wěn)K穩(wěn) = = A (CM? A) (CL? A) A CM ( A) (A0A) A0 ? = CM ? 不需空白溶液作參比；但需要兩個單色器獲得兩束單色光 (λ 1和 λ 2)；以參比波長 λ 1處的吸光度 Aλ 1作為參比，來消除干擾。在分析渾濁或背景吸收較大的復雜試樣時顯示出很大的優(yōu)越性。靈敏度、選擇性、測量精密度等方面都比單波長法有所提高。 ΔＡ＝ A λ 2 － A λ 1 ＝（ ε λ 2 － ε λ 1 ) b c 兩波長處測得的吸光度差值 ΔＡ與待測組分濃度成正比。 ε λ 1和 ε λ 2分別表示待測組分在 λ 1和 λ 2處的摩爾吸光系數(shù)。 雙波長分光光度法 關鍵問題 : 關鍵問題是測量波長 λ 2和參比波長 λ 1的選擇與組合。 以兩組分 x和 y的雙波長法測定為例： 設： x為待測組分， y為干擾組分，二者的吸光度差分別為 ΔＡ x和 ΔＡ y，則該體系的總吸光度差 ΔＡ x+y為： ΔＡ x+y = ΔＡ x + ΔＡ y 如何選擇波長 λ 1 、 λ 2有一定的要求。 選擇波長組合 λ 1 、 λ 2的基本要求是： ⑴ 選定的波長 λ 1和 λ 2處干擾組分應具有相同吸光度， 即： Δ Ay = ΔＡ yλ 2 － ΔＡ yλ 1 = 0 故： ΔＡ x+y = ΔＡ x=(ε xλ 2－ ε xλ 1)bcx 此時：測得的吸光度差 ΔＡ只與待測組分 x的濃度呈線性關系，而與干擾組分 y無關。若 x為干擾組分，則也可用同樣的方法測定 y組分。 可采用作圖法選擇符合上述兩個條件的波長組合 。 ⑵ 在選定的兩個波長 λ 1和 λ 2處待測組分的吸光度應具有足夠大的差值。 作業(yè) ? P269 1， 2， 3， 4， 5， 6
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