吸光度法ppt課件-展示頁
2025-05-15 18:14本頁面
【正文】 =2cm , 在波長 508nm處測得 A=，計算 a和 ?。L1表示時，用 ?表示 . ? =Ma ? －摩爾吸收系數(shù)， A＝ ?bc 例： 鄰二氮菲分光光度法測 Fe2+。mol1 ? 越大 , 方法靈敏度越高 : ? 104為低靈敏度 . ? 105為超高靈敏度 。g 1 A B A ? )(m ax A? )(m ax B?A ? C 增大 光的吸收基本定律 : 朗伯 比爾 定律 A = lg(1/T) = lgT= lg(I0/I)=abc b— cm c—g 什么叫吸光光度法 ? ?靈敏度高 ?準確度 能夠滿足微量組分的測定要求： 相對誤差 2～ 5％ ?操作簡便快速 ?應(yīng)用廣泛 特 點 如何進行測定 ? 可以直接測什么物質(zhì) ? 167。 可見吸收光譜： 電子躍遷光譜 ， 吸收光波長范圍400?750 nm ， 主要用于有色物質(zhì)的定量分析 。 96 紫外吸收光譜法簡介 基于物質(zhì)對光的選擇性吸收而建立起來的分析方法稱為吸光光度法 ,主要有 : 紅外吸收光譜： 分子振動光譜 ， 吸收光波長范圍?1000 ?m ,主要用于有機化合物結(jié)構(gòu)鑒定 。 94 吸光度測量條件的選擇 167。 92 光度計及其基本部件 167。第九章 吸 光 光 度 法 167。 91 吸光光度法基本原理 167。 93 顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇 167。 95 吸光光度法的應(yīng)用 167。 紫外吸收光譜： 電子躍遷光譜 ， 吸收光波長范圍200?400 nm（ 近紫外區(qū) ） ， 可用于結(jié)構(gòu)鑒定和定量分析 。 本章主要講授 可見吸光光度法 。 吸光光度法的基本原理 物質(zhì)對光的選擇性吸收 溶液的顏色由透射光波長還是由入射光波長決定 ? ?/nm 顏色 互補光 400450 紫 黃綠 450480 藍 黃 480490 綠藍 橙 490500 藍綠 紅 500560 綠 紅紫 560580 黃綠 紫 580600 黃 藍 600650 橙 綠藍 650780 紅 藍綠 不同顏色的可見光波長及其互補光 吸收光譜 物質(zhì)的電子結(jié)構(gòu)不同，具有不同的量子化能級 , 其能量差也不同 , 吸收光的波長也不同，這就構(gòu)成了物質(zhì)對光的選擇性吸收基礎(chǔ) . hcEh ??? ? ?物質(zhì)對光的選擇性吸收 h? M + M* 吸收光譜 300 400 500 600 700 ?/ nm 350 525 545 Cr2O72 MnO4 350 A 定性分析基礎(chǔ) 定量分析基礎(chǔ) 物質(zhì)對光的選擇吸收 在一定的實驗條件下， A與 c成正比。L1 a— L cm1 T— 透光度 0IIT ?全部吸收 T = % 全部透射 T = % 影響 ?的因素 入射光波長 物質(zhì)的性質(zhì) 溶劑和溫度 ? 5 104 為 高 靈敏度 。 Lcm1 當(dāng) c的單位用 mol ?(Fe2+)= 104 g 解： 11419010052190 ?????????? cmgLbcAa..? =Ma= 190 = 104 Lcm1 p243 吸光度的加合性 A = A1 + A2 + … +An =?1bc1+ ?2bc2+ … + ?nb 偏離比爾定律的原因 A C 正偏離 負偏離 0 1 2 3 4 c(mg/mL) A 0 A＝ ?bc 工作曲線法 (標準曲線 ) 單色光 ：具有單一波長 的光。 非單色光引起的偏離 設(shè)入射光僅由 ?1 和 ?2 兩種波長組成，兩波長下比爾定律都是適用的： ?1 + ?2： 2100IIIIA??? 39。39。39。39。39。bcbcbcA ?????? 21?1： bcIIA110 ???39。 lg bcII 10 101 ???? 39。39。39。39。 ? ?1 對應(yīng)的 ? ? 1較小 ? ?2 對應(yīng)的 ? ? 2較大 A或 ? ? ? ?2 ? ?1 化學(xué)因素引起的偏離 ● 吸光質(zhì)點間相互作用引起的偏離 . ● 吸光質(zhì)點形式變化 引起的偏離 . 例： Cr2O72 + H2O 2H++2CrO42 （ 橙色 ） （ 黃色 ） 167。 可見光區(qū)： 鎢燈，碘鎢燈 (320～ 2500nm) 紫外區(qū)： 氫燈，氘燈 (180～ 375nm) 單色器 ：將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的 裝置。 可見光區(qū)：光學(xué)玻璃池 紫外區(qū)：石英池 檢測系統(tǒng) ：利用光電效應(yīng)，將光強度轉(zhuǎn)換成 電流訊號。 167。mol1mol1 對比度 ： ?λ max60
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