菌種的選育ppt課件-資料下載頁
2025-05-03 05:09本頁面
【正文】 變型等。 遺傳標(biāo)記要求： ?菌體形態(tài)穩(wěn)定 ?能在基本培養(yǎng)基上形成豐富的孢子 ?不影響產(chǎn)量 ?在配對過程中容易形成異核體 （強(qiáng)制異合） 方法：完全培養(yǎng)基液體混合法、完全培養(yǎng)基等方法（見 P47). 。 原生質(zhì)融合 :把親本的細(xì)胞壁在酶的作用下瓦解 ,形成原生質(zhì)體 .兩個原生質(zhì)體在高滲環(huán)境條件下 ,在助融劑的作用下 ,發(fā)生細(xì)胞融合 ,基因組通過接觸到交換 ,從而實(shí)現(xiàn)遺傳重組 . 標(biāo)記菌株篩選 原生質(zhì)體制備 融合 再生 融合子選擇 實(shí)用菌株篩選 、遺傳轉(zhuǎn)化、原生質(zhì)體融合效率高 。 。 原生質(zhì)體融合技術(shù)的應(yīng)用 ?原生質(zhì)體制備和再生過程引起產(chǎn)量突變。 ?原生質(zhì)體制備和再生過程引起質(zhì)粒丟失。 ?種內(nèi)融合引起抗生素合成中限速酶得到修飾 ?種間融合可能引起“沉默基因”的表達(dá)。 DNA重組技術(shù) DNA重組技術(shù)：按照人的意志，將某一（供體）的遺傳信息在體外經(jīng)人工與載體相接（重組），構(gòu)成重組 DNA分子，然后轉(zhuǎn)入另一生物體（受體）細(xì)胞中，使被引入的外源 DNA片段在后者內(nèi)部得以表達(dá)和遺傳。 開辟了一個分子育種的新領(lǐng)域 分子育種 分子育種：利用基因工程技術(shù)、原理和設(shè)備，在分子水平上改良菌種。 優(yōu)越性： ； 2. 導(dǎo)入強(qiáng)啟動子或抗性基因增加抗生素產(chǎn)量； ] 以合成雜交抗生素； ，以期徹底改變生產(chǎn)工藝。 DNA重組技術(shù)的基本過程 有三種途徑： ?從供體中直接提取 ?通過反轉(zhuǎn)錄取得 cDNA ?化學(xué)合成特定功能的目的基因 ?具有一個自我復(fù)制能力的復(fù)制子 ?能在受體細(xì)胞內(nèi)大量繁殖； ?最好只有一個限制性內(nèi)切核酸酶的切口； ?必須有一種選擇性遺傳標(biāo)記 DNA的體外重組 采用限制性酶切或人為地在 DNA的 3?端接上polyA和 polyT可以使重組的兩個 DNA分子產(chǎn)生“卯眼”似的粘性末端。然后兩者在5~6℃ 下“退火”形成新的雙鏈，在連接酶的作用下形成重組載體 篩選類別 遺傳學(xué)直接篩選法：抗藥性、噬菌斑形成能力等 分子生物學(xué)間接法：酶切相對分子量的大小、分子雜交等 舉例抗藥性變化檢測： 質(zhì)粒 Apr Tcr Apr + 含氨卞青霉素培養(yǎng)基 含四環(huán)素培養(yǎng)基 基因工程菌不穩(wěn)定具體表現(xiàn) ?質(zhì)粒的丟失 ?重組質(zhì)粒發(fā)生 DNA片段脫落 ?表達(dá)產(chǎn)物不穩(wěn)定 解決不穩(wěn)定性對策 ?組建適當(dāng)載體 (質(zhì)粒上插入 特殊 DNA片段 ) ?選擇適當(dāng)宿主 ?施加選擇壓力（抗生素添加法、抗生素依賴變異法、營養(yǎng)缺陷型法） ?控制基因過量表達(dá) ?控制培養(yǎng)條件 ?改良質(zhì)粒 ?固定化工程菌 菌種的保藏 意義：菌種保藏首先是菌種不死亡，保持優(yōu)良的生產(chǎn)性狀。 原理：根據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，人工創(chuàng)造條件，使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低，以減少變異。 菌種保藏的幾種方法： ； ； ； ； 作業(yè) 通過查閱資料請你設(shè)計一套從自然界篩選構(gòu)建高產(chǎn)纖維素菌株的方法 . 要求 :1
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