雜交瘤技術(shù)與單克隆抗體-資料下載頁(yè)
2025-05-02 08:35本頁(yè)面
【正文】 接相關(guān)， 根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析 。 （ 1） 血清法 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞 按 1～ 3 107cells／ ml 接種于 小鼠背部皮下，每處注射 ml。待腫瘤 達(dá)到一定大小后 (一般 10～ 20天 )則可 采血，從血 清中獲得單克隆抗體 含量可達(dá) 到 110mg／ ml。 缺點(diǎn)是 采血量有限 。 （ 一 ） 體內(nèi)接種法 （ 2）腹水制備法 腹腔注射 1 106個(gè)雜交瘤細(xì)胞， 接種細(xì)胞 7～ 10 天后可產(chǎn)生腹水 ，處死小鼠，用滴管將腹 水吸入 試管中，一般一只小鼠可獲 1～ 10ml腹水。也可 用注射器抽取腹水， 可反復(fù)收集數(shù)次 。 腹水中單克隆抗體含量可達(dá) 5～ 20mg/ml， 這是 目前最常用的方法 。 常用 生 物反應(yīng)器培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞大規(guī)模生產(chǎn)單抗 雜交瘤細(xì)胞 生物反應(yīng)器 培養(yǎng)液 離心除去細(xì)胞，收集上清液提取抗體。 （二 ）體外培養(yǎng)法 123 人源化單克隆抗體 鼠源性單抗仍帶有鼠抗原決定簇 而使其應(yīng)用存在一定 的 局限性 : （ 1）不能有效地激活人體中補(bǔ)體和 Fc 受體相關(guān)的效 應(yīng)系統(tǒng) （ 2）被人體免疫系統(tǒng)所識(shí)別 , 產(chǎn)生人抗鼠抗體 ( Human antigen mouse antibody,HAMA) （ 3） 在人體循環(huán)系統(tǒng)中很快被清除掉。 通過(guò)人源化改造獲得 低免疫原性、高效性、人源性單 克隆抗體， 解決鼠雜交瘤單抗用于人體的變態(tài)反應(yīng)的 問(wèn)題。 但是進(jìn)展很慢 。 人 — 鼠雜交瘤 ：融合方法基本與鼠 — 鼠雜交瘤相同。 親本骨髓瘤細(xì)胞是 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 ，親本 B細(xì)胞則來(lái) 源于人外周血淋巴細(xì)胞 、淋巴結(jié)細(xì)胞、脾細(xì)胞。但 是，人 — 鼠雜交瘤的人單克隆抗體分泌性能 很不穩(wěn) 定 ，多數(shù)情況下雜交瘤會(huì) 很快失去抗體分泌能力 。 人 — 人雜交瘤 ：可通過(guò)建立 人骨髓瘤 或其他人細(xì)胞系 與人淋巴細(xì)胞融合 來(lái)制備人單克隆抗體。人源性融合 親本細(xì)胞需具有較高的融合率、產(chǎn)生的雜交瘤核型穩(wěn) 定并能產(chǎn)生一定量的具有特異性的抗體等特征。人 — 人雜交瘤核型穩(wěn)定，然而 遺憾的是可供利用的人類骨 髓瘤細(xì)胞種類非常有限 。 課外學(xué)習(xí)視頻： 單克隆抗體制備
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