常用的單克隆抗體檢測方法-資料下載頁
2025-04-07 21:25本頁面
【正文】 然后100℃水浴處理1小時；將冷卻至37℃的熱處理LPS與6%醛化紅細胞等量混合，37℃攪拌作用45分鐘；取出離心2000r/min 10分鐘，；配制成4%致敏血球，分裝，保存于4℃?zhèn)溆茫騼龈杀４?。c、McAb的篩選：取待測McAb樣品25ul，加入V型微量血凝板孔中，同時設立陰性、陽性對照；%致敏紅血球懸液25ul，在振蕩器上混勻30秒；置室溫或37℃ 3060分鐘觀察結果。陰性對照孔應呈緊縮的圓點。③可溶性蛋白抗原的間接血凝試驗a、紅細胞醛化：采用雙醛法。采綿羊或人“O”型抗凝血，每次加10倍于紅細胞壓積的PBS洗滌46次，然后配成8%紅細胞懸液；向此8%紅細胞懸液緩慢加入等量含有3%丙酮醛和3%甲醛的PBS，于室溫緩慢攪拌17小時；其后洗滌3次，配成20%雙醛化紅細胞懸液，% NaN3防腐，4℃保存?zhèn)溆谩、致敏紅細胞：取20%，1500r/min 10分鐘，棄上清，并加最適濃度（應預先測定，蛋白抗原為50ug/ml左右）的抗原1ml，混勻，于45℃致敏30分鐘，有時輕輕搖動，使紅細胞不下沉。然后離心去上清，并用20倍于紅細胞壓積的PBS洗34次，%致敏紅細胞，4℃保存?zhèn)溆?。c、McAb測定：同上法。（4）放射免疫測定放射免疫測定是用放射性同位素標記抗原或抗體，以檢測相應抗原或抗體的定量方法。在篩選和鑒定單抗時常用抗原固相法，即用抗原包被聚乙烯微板，借以檢測樣品中的McAb，其操作步驟如下：a、用碳酸鹽緩沖液將抗原稀釋至適宜的濃度（1100ug/ml），滴加聚乙烯微板孔內，100ul/孔，4℃過夜或37℃ 2小時。b、棄去抗原液，% BSA的PBS，4℃ 12小時封閉。c、用BSAPBS洗滌3次，每次3分鐘。d、加待檢樣品，每孔100ul，設立陰性孔、陽性孔和空白孔；37℃12小時，同法洗滌。e、每孔加125I標記的抗鼠Ig抗體工作液100ul，37℃ 12小時，同法洗滌。f、用γ射線閃爍計數(shù)儀分別測定各孔放射性。通常要求樣品孔和陽性對照孔的放射性脈沖分別超過本底5倍和10倍。若以空白孔的放射性為基準，凡樣品孔與陰性孔放射性之比大于3的樣品定為陽性。歡迎您的光臨，！希望您提出您寶貴的意見，你的意見是我進步的動力。贈語； 如果我們做與不做都會有人笑，如果做不好與做得好還會有人笑，那么我們索性就做得更好，來給人笑吧！ 現(xiàn)在你不玩命的學，以后命玩你。我不知道年少輕狂，我只知道勝者為王。不要做金錢、權利的奴隸；應學會做“金錢、權利”的主人。什么時候離光明最近？那就是你覺得黑暗太黑的時候。最值得欣賞的風景，是自己奮斗的足跡。壓力不是有人比你努力，而是那些比你牛幾倍的人依然比你努力。學習參
公司管理相關推薦
鄂ICP備17016276號-1