單克隆抗體與基因工程抗體制備-資料下載頁
2025-09-11 20:42本頁面
【正文】 獲得穩(wěn)定分泌 McAb的雜交瘤細(xì)胞株 McAb的制備（雜交瘤培養(yǎng)上清或誘生腹水） McAb 純化及鑒定 單克隆抗體特性 ? 優(yōu)點(diǎn)： 理化性狀高度均一，生物活性專一，只與一種抗原表位發(fā)生反應(yīng)，特異性強(qiáng)，純度高，易于實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化和大量制備 ? 缺點(diǎn)： 制備復(fù)雜，價(jià)格昂貴；反應(yīng)強(qiáng)度不如多克隆抗體；應(yīng)用有一定的局限性等等 單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 ? 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑 ? （ 1）病原微生物抗原抗體的檢測(cè) ? （ 2）腫瘤抗原的檢測(cè) ? （ 3）免疫細(xì)胞及其亞群的檢測(cè) ? （ 4）激素測(cè)定 ? （ 5）細(xì)胞因子的測(cè)定 ? 蛋白質(zhì)的提純 ? 腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù) 基因工程抗體與抗體庫技術(shù) ? 單抗體內(nèi)應(yīng)用和療效受限原因： ? ? 甚少 ? ,難于普及應(yīng)用 ? 人雜交瘤技術(shù)未獲真正突破原因 : ? 融合率低、建株難、不穩(wěn)定、產(chǎn)量低、人體不能隨意免疫 ? 新思路：盡量減少抗體中的鼠源成分，但又盡量保留原有的抗體特異性。 ? 基因工程抗體：根據(jù)研究者的意圖，采用基因工程方法，在基因水平，對(duì)免疫球蛋白基因進(jìn)行切割、拼接或修飾后導(dǎo)入受體細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)，產(chǎn)生新型抗體，主要包括 嵌合抗體、人源化抗體、小分子抗體、抗體融合蛋白和雙特異性抗體。 ? 抗體庫技術(shù)：用細(xì)菌克隆取代 B細(xì)胞克隆表達(dá)抗體，不經(jīng)細(xì)胞融合，甚至不經(jīng)免疫，制備針對(duì)任何抗原的單克隆抗體。 嵌合抗體 (chimeric antibody) 從雜交瘤細(xì)胞分離出功能性可變區(qū)基因，與人 Ig恒定區(qū)基因連接，插入適當(dāng)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，表達(dá)人 鼠嵌合抗體。 特點(diǎn)：減少了鼠源性抗體的免疫原性，同時(shí)保留了親本抗體特異性結(jié)合抗原的能力。 人源化抗體 (humanized antibody) 1. 將小鼠的 CDR序列移植到人抗體可變區(qū)框架中，產(chǎn)生的抗體稱為 CDR移植抗體。 Ig基因敲除，轉(zhuǎn)染人 Ig基因，在小鼠體內(nèi)產(chǎn)生人 Ab， 再經(jīng)雜交瘤技術(shù)，產(chǎn)生大量完全人源化抗體
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