動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體ppt-資料下載頁
2024-10-03 17:07本頁面
【正文】 第三十八頁，共四十六頁。 第三十九頁，共四十六頁。 如何進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法〞來選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋，用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過一個(gè)，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體〔常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法〕，那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細(xì)胞還不能保證是來自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋，一般需進(jìn)行 3～ 4次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。該過程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。 第四十頁，共四十六頁。 在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下，培養(yǎng)得到的細(xì)胞群是單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學(xué)性質(zhì)單一的，特異性強(qiáng)的單克隆抗體。這里的確有 的含義，只不過不是 B淋巴細(xì)胞，而 。 雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。 第四十一頁，共四十六頁。 整個(gè)制備過程為何要經(jīng)過 ? 第四十二頁，共四十六頁。 單克隆抗體的 概念： 由 進(jìn)行無性繁殖 ,也就是通過克隆，形成細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的稱為單克隆抗體。 第四十三頁，共四十六頁。 單克隆抗體的制備 抗原注入小鼠體內(nèi) 骨髓瘤細(xì)胞 分離 B淋巴細(xì)胞 細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)細(xì)胞 注入小鼠 體內(nèi)培養(yǎng) 培養(yǎng)基 體外培養(yǎng) 從腹水提取 從培養(yǎng)液提取 單克隆抗體 能產(chǎn)生抗體 能無限增殖 既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖 第四十四頁，共四十六頁。 我們以制備單克隆抗體為例來說明這一問題。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上，但是每一個(gè) B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞〔含 B淋巴細(xì)胞〕和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；假設(shè)用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 第四十五頁，共四十六頁。 內(nèi)容總結(jié) 電影。 把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中別離出所需的抗體。免疫原理，細(xì)胞融合原理和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理?！苍袐D尿中的人絨毛膜促性腺激素能與抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合〕。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。 與動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)有什么不同。 1．在動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的選項(xiàng)是〔 〕。第一次篩選：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出多種雜交瘤細(xì)胞 第四十六頁，共四十六頁。
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