動物細胞融合與單克隆抗體ppt-資料下載頁
2025-09-24 17:07本頁面
【正文】 第三十八頁，共四十六頁。 第三十九頁，共四十六頁。 如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)？ 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細胞就是雜交瘤細胞。但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞，通常用“有限稀釋法〞來選擇。將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細胞不超過一個，通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體〔常用酶聯(lián)免疫吸附試驗法〕，那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞，挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋，一般需進行 3～ 4次，直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。 第四十頁，共四十六頁。 在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下，培養(yǎng)得到的細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產(chǎn)生的抗體必然是化學性質(zhì)單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的確有 的含義，只不過不是 B淋巴細胞，而 。 雜交瘤細胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體。 第四十一頁，共四十六頁。 整個制備過程為何要經(jīng)過 ? 第四十二頁，共四十六頁。 單克隆抗體的 概念： 由 進行無性繁殖 ,也就是通過克隆，形成細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的稱為單克隆抗體。 第四十三頁，共四十六頁。 單克隆抗體的制備 抗原注入小鼠體內(nèi) 骨髓瘤細胞 分離 B淋巴細胞 細胞融合 雜交瘤細胞 細胞培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)細胞 注入小鼠 體內(nèi)培養(yǎng) 培養(yǎng)基 體外培養(yǎng) 從腹水提取 從培養(yǎng)液提取 單克隆抗體 能產(chǎn)生抗體 能無限增殖 既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖 第四十四頁，共四十六頁。 我們以制備單克隆抗體為例來說明這一問題。我們知道，體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達百萬種以上，但是每一個 B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體，如果僅取一個脾細胞〔含 B淋巴細胞〕和一個瘤細胞雜交，我們不能確定該脾細胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；假設用大量的脾細胞和瘤細胞進行融合，就可以從融合細胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細胞。 第四十五頁，共四十六頁。 內(nèi)容總結(jié) 電影。 把某種抗原反復注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中別離出所需的抗體。免疫原理，細胞融合原理和動物細胞培養(yǎng)原理?！苍袐D尿中的人絨毛膜促性腺激素能與抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合〕。準確找到癌細胞位置，原位殺死癌細胞。 與動物細胞融合技術有什么不同。 1．在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的選項是〔 〕。第一次篩選：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出多種雜交瘤細胞 第四十六頁，共四十六頁。
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