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動物細胞融合與單克隆抗體ppt(更新版)

2024-10-03 17:07上一頁面

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【正文】 繁殖 ,也就是通過克隆,形成細胞群,這一細胞群所產生的稱為單克隆抗體。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞,挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋,一般需進行 3~ 4次,直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。 ?為什么滅活的病毒能作為誘導劑? 因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布,細胞膜翻開,細胞發(fā)生融合。 〔二〕動物細胞融合的過程 與植物原生質體融合原理相同,方法類似。 第二十九頁,共四十六頁。 資料: 目前世界各國已經研制出數(shù)以百計的單克隆抗體。 第二十四頁,共四十六頁。 單克隆抗體的應用 第二十一頁,共四十六頁。 6. 選擇所需要的雜交瘤克隆細胞群,體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖。注意 B淋巴細胞是一個系列。而BB,GG在此培養(yǎng)基上不能存活。 單克隆抗體的制備 第十三頁,共四十六頁。 第八頁,共四十六頁。 (三 )動物細胞融合的應用 ,使遠緣雜交成為可能。電影 ?人獸雜交 ?劇照 第一頁,共四十六頁。 第四頁,共四十六頁。 缺點: 第七頁,共四十六頁。 注射抗原 B淋巴細胞 骨髓瘤細胞 雜交瘤細胞 細胞培養(yǎng) 篩選,繼續(xù)培養(yǎng) 足夠數(shù)量的、能產生特定抗體的細胞群 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 單克隆抗體 第十二頁,共四十六頁。但 BG雜交瘤細胞也是一個系列:如 B1G,B2GBnG。 1. 動物特異性免疫 2. 別離 B淋巴細胞〔 B〕;找到骨髓瘤細胞〔 G〕?!翱寺』囵B(yǎng)〞每個雜交瘤細胞,并進行“單一抗體檢測〞,“檢測陽性〞的孔內即是所需要的雜交瘤細胞。 ? 作為診斷試劑 : 在臨床生化診斷、病理組織定位、體內腫瘤的定位等 ,與常規(guī)抗體相比 ,具有準確、高效、簡易、快速 特點 . 單克隆抗體的優(yōu)點: 特異性強,靈敏度高,可大量制備。 單克隆抗體的應用 第二十三頁,共四十六頁。 第二十七頁,共四十六頁。因此,把一種 B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合,產生雜交瘤細胞,它會兼有兩個親本細胞的特性── 在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時能產生出某種特異性的抗體。 (一 )動物細胞融合的概念 動物細胞融合也稱細胞雜交 ,是指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。 第三十七頁,共四十六頁。然后檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體〔常用酶聯(lián)免疫吸附試驗法〕,那些上清液可與特定抗原結合的培養(yǎng)孔為陽性孔。 整個制備過程為何要經過 ? 第四十二頁,共四十六頁。 把某種抗原反復注射到動物體內,然后從動物血清中別離出所需的抗體
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