動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體ppt(更新版)
【正文】 繁殖 ,也就是通過(guò)克隆，形成細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的稱(chēng)為單克隆抗體。陽(yáng)性孔中的細(xì)胞還不能保證是來(lái)自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽(yáng)性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋?zhuān)话阈柽M(jìn)行 3～ 4次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。 ?為什么滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑？ 因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜翻開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。 〔二〕動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程 與植物原生質(zhì)體融合原理相同，方法類(lèi)似。 第二十九頁(yè)，共四十六頁(yè)。 資料： 目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。 第二十四頁(yè)，共四十六頁(yè)。 單克隆抗體的應(yīng)用 第二十一頁(yè)，共四十六頁(yè)。 6. 選擇所需要的雜交瘤克隆細(xì)胞群，體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。注意 B淋巴細(xì)胞是一個(gè)系列。而B(niǎo)B,GG在此培養(yǎng)基上不能存活。 單克隆抗體的制備 第十三頁(yè)，共四十六頁(yè)。 第八頁(yè)，共四十六頁(yè)。 (三 )動(dòng)物細(xì)胞融合的應(yīng)用 ,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。電影 ?人獸雜交 ?劇照 第一頁(yè)，共四十六頁(yè)。 第四頁(yè)，共四十六頁(yè)。 缺點(diǎn)： 第七頁(yè)，共四十六頁(yè)。 注射抗原 B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選，繼續(xù)培養(yǎng) 足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 單克隆抗體 第十二頁(yè)，共四十六頁(yè)。但 BG雜交瘤細(xì)胞也是一個(gè)系列：如 B1G,B2GBnG。 1. 動(dòng)物特異性免疫 2. 別離 B淋巴細(xì)胞〔 B〕；找到骨髓瘤細(xì)胞〔 G〕?！翱寺』囵B(yǎng)〞每個(gè)雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行“單一抗體檢測(cè)〞，“檢測(cè)陽(yáng)性〞的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細(xì)胞。 ? 作為診斷試劑 ： 在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等 ,與常規(guī)抗體相比 ,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速 特點(diǎn) . 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)： 特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。 單克隆抗體的應(yīng)用 第二十三頁(yè)，共四十六頁(yè)。 第二十七頁(yè)，共四十六頁(yè)。因此，把一種 B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞，它會(huì)兼有兩個(gè)親本細(xì)胞的特性── 在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖，同時(shí)能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。 (一 )動(dòng)物細(xì)胞融合的概念 動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交 ,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。 第三十七頁(yè)，共四十六頁(yè)。然后檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體〔常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法〕，那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。 整個(gè)制備過(guò)程為何要經(jīng)過(guò) ? 第四十二頁(yè)，共四十六頁(yè)。 把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi)，然后從動(dòng)物血清中別離出所需的抗體
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