動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體ppt-在線瀏覽
2024-10-03 17:07本頁面
【正文】 B淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 篩選，繼續(xù)培養(yǎng) 足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群 體外培養(yǎng) 注射到小鼠腹腔 單克隆抗體 第十二頁，共四十六頁。 〔二〕單克隆抗體的制備 第十四頁，共四十六頁。注意 B淋巴細(xì)胞是一個(gè)系列。BG。但 BG雜交瘤細(xì)胞也是一個(gè)系列：如 B1G,B2GBnG?！? 5. 第二次篩選：在“多孔培養(yǎng)板上〞培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞系列 ，每孔只放一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。 單抗的制備過程要點(diǎn)： 第十五頁，共四十六頁。 第十七頁，共四十六頁。 1. 動(dòng)物特異性免疫 2. 別離 B淋巴細(xì)胞〔 B〕；找到骨髓瘤細(xì)胞〔 G〕?！?B1,B2,B3,Bn〕 3. 細(xì)胞融合 —— 三種融合方式 :〔 BB。GG〕 4. 第一次篩選：在“選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)〞上培養(yǎng)篩選雜交瘤細(xì)胞〔只有 BG雜交瘤細(xì)胞存活。而BB,GG在此培養(yǎng)基上不能存活?！翱寺』囵B(yǎng)〞每個(gè)雜交瘤細(xì)胞，并進(jìn)行“單一抗體檢測〞，“檢測陽性〞的孔內(nèi)即是所需要的雜交瘤細(xì)胞。 7. 提取單克隆抗體。 3〕、為何要進(jìn)行兩次篩選？ 4〕、如何進(jìn)行第 2次篩選？ 培養(yǎng)在多孔培養(yǎng)板上，每孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞。第 2次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群。 ? 作為診斷試劑 ： 在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等 ,與常規(guī)抗體相比 ,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速 特點(diǎn) . 單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)： 特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。 單克隆抗體與 早孕測試 ? 試劑主要成分：抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體 ? 原理：定性測定尿液中的人絨毛膜促性腺激素。 ? 作為診斷試劑 ： 在臨床生化診斷、病理組織定位、體內(nèi)腫瘤的定位等 ,與常規(guī)抗體相比 ,具有 準(zhǔn)確、高效、簡易、快速 特點(diǎn) . ? 用于治療疾病和運(yùn)載藥物 ： ? 主要用于癌癥治療。準(zhǔn)確找到癌細(xì)胞位置，原位殺死癌細(xì)胞。 單克隆抗體的應(yīng)用 第二十三頁，共四十六頁。 為什么不用兩個(gè)而要用多個(gè)細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞間的融合？ 就目前常用的細(xì)胞融合方法來看，不管是用物理的、化學(xué)的方法，還是生物的方法，其僅用。目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是單克隆抗體的制備。 主要用于制備單克隆抗體 獲得雜種植株 用途 物理、化學(xué)方法〔同左〕 滅活的病毒 物理〔離心、振動(dòng)、電激〕 化學(xué)〔聚乙二醇〕 誘導(dǎo)方法 使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 細(xì)胞融合的方法 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 細(xì)胞膜的流動(dòng)性、
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