疫苗制造基本程序ppt課件-資料下載頁
2025-05-01 18:04本頁面
【正文】 兔腦毒種接種綿羊腦內(nèi)途徑感染 。 幾種動(dòng)物常用的接種途徑如下： 1. 腦內(nèi)注射：顱前后中線 5mm平行線與瞳孔橫線交叉處 。 2. 靜脈注射：家兔由耳靜脈注入；雞自翅下肢靜脈注入 。 3. 肌肉注射：選擇腿部 、 胸部 、 臀部等肌肉豐滿處注射 。 4. 皮下注射：家兔和豚鼠可選擇在腹部或后腿內(nèi)注射 。 5. 腹腔注射：家兔與豚鼠可選腹股溝處刺入腹腔 。 （二）種毒與接種 三 、 病毒性動(dòng)物組織疫苗制造 觀察與收獲 動(dòng)物選擇 配苗 種毒與接種 動(dòng)物在接種感染后應(yīng)每天觀察和檢查規(guī)定的各項(xiàng)指標(biāo) ， 指標(biāo)或項(xiàng)目因不同病毒而異 。 常規(guī)觀察 、 檢查的項(xiàng)目如食欲 、 精神和活動(dòng)狀態(tài) 、 體溫 、糞便 、 尿和血液變化等 。 根據(jù)觀察的征象和檢查的結(jié)果選出符合要求的發(fā)病動(dòng)物按規(guī)定方式剖殺 ， 采取收集含毒量高的器官組織 。 如豬瘟結(jié)晶紫疫苗采取發(fā)病豬的血液制備；兔出血癥組織滅活疫苗采集病兔肝臟生產(chǎn)；狂犬病疫苗利用發(fā)病羊的羊腦組織制造 。 （三）觀察與收獲 三 、 病毒性動(dòng)物組織疫苗制造 觀察與收獲 動(dòng)物選擇 配苗 種毒與接種 1． 組織滅活疫苗 采取收獲的組織經(jīng)無菌檢驗(yàn)及毒價(jià)測定合格后 ， 按規(guī)定比例加入平衡液和滅活劑 （ 甲醛 、 酚 、 結(jié)晶紫等 ） 制成勻漿 ， 然后按不同病毒的滅活溫度 、 時(shí)間進(jìn)行滅活 。 如狂犬病疫苗配制按腦組織 1:4加入含有甘油及 1%酚蒸餾水 ， 于 36??C滅活 7天制成；豬瘟結(jié)晶紫疫苗配制 ， 按血毒 4份 ， 結(jié)晶紫甘油溶液 1份混合 ， 于 37?C~38?C滅活 6~8天 。 2. 弱毒組織疫苗 在無菌操作下剔除臟器上的脂肪與結(jié)締組織等 ， 稱重后剪碎 ， 加入適最保護(hù)劑制成勻漿 ， 然后濾過扣除殘?jiān)?， 再按濾液中的實(shí)際組織量計(jì)算稀釋倍數(shù) ， 加入余量保護(hù)劑和青鏈霉素 500~1000U(?g/ml)， 充分搖勻后臵 0~4?C冷暗處處理一定時(shí)間后作無菌檢驗(yàn)與毒價(jià)測定 。 合格者進(jìn)行分裝 ，冷凍真空干燥制成凍干疫苗 。 （四）制 苗 三 、 病毒性動(dòng)物組織疫苗制造 觀察與收獲 動(dòng)物選擇 配苗 種毒與接種 流程圖2——病毒性組織疫苗制造工藝流程 動(dòng) 物 感染動(dòng)物 毒 株 種 毒 滅活病毒液 鑒定 培育 檢驗(yàn) 檢驗(yàn) 配制 原 料 佐 劑 配苗、乳化 滅活疫苗 含病毒組織 含病毒懸液 配 苗 活疫苗 保護(hù)劑 分裝、凍干 分 裝 滅活 原 料 種 子 擴(kuò)增 收獲 配制 純化病毒懸液 接種 ? 毒種：毒種的優(yōu)劣不僅影響疫苗的產(chǎn)量，而且也影響疫苗的質(zhì)量，毒種不純會(huì)產(chǎn)生相互干擾，減毒活疫苗毒種若毒力回升易造成事故，因此毒種的選擇應(yīng)挑選那些致病性低，免疫效價(jià)高而持久，抗原譜廣的，易增殖，便于生產(chǎn)，可在傳代細(xì)胞上傳代的毒種。 ? 培養(yǎng)病毒的細(xì)胞：細(xì)胞若有潛在的致癌性病毒或慢病毒，以及有支原體污染均不能用作疫苗生產(chǎn)。對(duì)此因素應(yīng)嚴(yán)格檢查。此外若細(xì)胞本身發(fā)生轉(zhuǎn)化后，不宜于制備活疫苗，只能制備一些滅活疫苗或亞單位疫苗。 ? 培養(yǎng)液：培養(yǎng)細(xì)胞的營養(yǎng)液中多少含有一定量的血清蛋白，在疫苗使用中常會(huì)出現(xiàn)某種程度的過敏反應(yīng)，為此，應(yīng)盡量使細(xì)胞適應(yīng)于無血清蛋白的培養(yǎng)基中，以消除過敏源。 ? 甲醛滅活劑的使用：甲醛能使病毒滅活，但仍保持其抗原性，因此普遍用來制備滅活病毒疫苗，但要控制含量。 影響疫苗質(zhì)量的因素 獲得質(zhì)量優(yōu)良 、 安全的產(chǎn)品 ， 關(guān)鍵環(huán)節(jié)如下 1. 選擇優(yōu)良的菌種和毒種 ， 并保持其穩(wěn)定性； 2. 選用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)繁殖細(xì)菌與病毒等微生物的方法 ， 包括優(yōu)良的培養(yǎng)基 、 合乎要求的最好是標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 、 禽胚及細(xì)胞； 3. 熟練掌握制品的生產(chǎn)工藝； 4. 準(zhǔn)確掌握產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法和判定標(biāo)準(zhǔn) ， 嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量檢定 。
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